Вот такой модульный светофор мы с сыном собрали в школу. Количество модулей не скажу, но пошло много.
Собираем четыре боковины
Модули размер 1/32 листа а4
1 – по 9 белых модулей
2ряд -8белых
3ряд -9 белых(крайний модуль надеваем на уголок модуля 1 и 2 ряда)
4ряд-3 белых,2 зелёных,3 белых(зелёные модули развернуть)
5 ряд-3 белых,3 зелёных,3 белых
6ряд-2 белых,4 зелёных,2 белых
7ряд-2 белых,5 зелёных,2 белых
8ряд-1 белый,6 зелёных,1 белый
9ряд-(уменьшаем зелёную серединку)2 белых,5 зелёных,2 белых
11ряд-3белых,3зелёных,3белых
12ряд-3белых,2 зелёных,3зелёных
13ряд-9 белых
14ряд-8белых
15ряд-9белых
Далее собирайте так же, как начинали, только измените цвет светофора.
Ножка модульное оригами светофора
10 модулей собрать в кольцо и собирать дальше по кругу, делайте высоту такую, какую какая вам нужна, толщину ножки можете регулировать сами.
Склейте каркас для светофора, в каркасе снизу сделайте крестообразное отверстие для ножки, вклейте её, затем приклейте все четыре стороны светофора. Вклейте вниз ножки модули для подставки.
Образовавшиеся щели между приклеенными пластинами заклейте модулями меньшего размера (1/64 листа а4)
Затем закройте верх модульного светофора.
Tweet
Share
{lang: ‘ru’}
Нравится
Поделка светофор своими руками для детей может стать отличной возможностью освоить технику создания аппликации – мозаики, ненавязчиво повторив при этом главные правила перехода через проезжую часть.
В качестве элементов мозаики можно использовать различные материалы: пластилиновые шарики, фрагменты яичной скорлупы, прозрачную самоклеющуюся пленку, засушенные лепестки цветов или листьев деревьев. При необходимости, они легко окрашиваются в нужные цвета уже после приклеивания. Но наиболее просто изготавливается поделка светофор своими руками из бумаги подходящих оттенков – зеленого, желтого или оранжевого и красного.
Поделка светофор своими руками
Ножка модульное оригами светофора
Склейте каркас для светофора, в каркасе снизу сделайте крестообразное отверстие для ножки, вклейте её, затем приклейте все четыре стороны светофора. Вклейте вниз ножки модули для подставки.
Образовавшиеся щели между приклеенными пластинами заклейте модулями меньшего размера (1/64 листа а4)
Затем закройте верх модульного светофора.
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Светофор Схема Оригами
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Оригами полицейский светофор — Купить Азбукварик в интернет-магазине в Москве
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Светофор из модульного оригами схема
Детские поделки ко дню гибдд
Мой друг светофор поделки фото — ВТВ — Светофор
Модули для оригами светофор — Изделия ручной работы — Продукция — Кондитерская
Оригами, оригами схемы, модульное оригами, оригами мастер классы » Page 46
Идея для творчества!
Светофор оригами своими руками — Rc-garaj.
ru
Оригами светофор мастер класс » Tib Wot
Схема вышивки светофор
Виктория Маруняк
Моё хобби — модульное оригами
Мои работы. Оригами
-это очень интерестное занятия. Это искусство создания различных моделей путём сгибания бумаги. Моей первой поделкой стал маленький умный совёнок. Вот он.
Но на этом я не остановилась. Следующую поделку мне заказали друзья на день рождения мужу. Он занимается спортом, он штангист. И ему в подарок я сделала вот такого штангиста. Вот он.
Поделка светофор своими руками для детей может стать отличной возможностью освоить технику создания – мозаики, ненавязчиво повторив при этом главные правила перехода через проезжую часть.
В качестве элементов мозаики можно использовать различные материалы: пластилиновые шарики, фрагменты яичной скорлупы, прозрачную самоклеющуюся пленку, засушенные лепестки цветов или листьев деревьев. При необходимости, они легко окрашиваются в нужные цвета уже после приклеивания.
Но наиболее просто изготавливается поделка светофор своими руками из бумаги подходящих оттенков – зеленого, желтого или оранжевого и красного.
Самый простое и наглядное пособие для изучение правил дорожного движения. Палочку делаем из коричневого картона. Заклеиваем ее между двумя листами черного картона. Приклеиваем цветные круги.
Посмотрите на видео, как сделать светофор своими руками для детского сада.
Наполнение уголка ПДД зависит от возраста воспитанников (ведь каждый из них имеет свои задачи изучения дорожной грамоты).
Ясельная группа
Пособие, развивающее мелкую моторику, подойдёт для ясельной группы
Вторая младшая группа
Вышеуказанные пособия пополняются новыми.
Издания непременно следует выбирать красочные, с яркими картинками.
Во второй младшей группе малыши знакомятся с новыми видами машин, например, спецтехникой
Средняя группа
В средней группе на макете улицы обязательно появляется пешеходный переход
Старшая группа
Кончаловская «Самокат».Воспитатель может изготовить дорожные знаки самостоятельно либо приобрести готовый набор
Подготовительная группа
К каждой ситуации нужно подобрать соответствующий знак, а импровизированные водительские права выдавать детям в ходе игры
Что касается стендов для родителей в раздевалке, то основным их содержанием будут консультации по актуальным темам, касающихся ПДД.
Тема детских автокресел очень актуальна для родителей, которые водят машину
Консультация содержит конкретные советы по обучению ребёнка ПДД
Фликер на одежде ребёнка — реальный способ уберечь его от опасности
Еще один замечательный светофор может получиться из картонных коробок. Лучше всего подойдут вытянутые прямоугольные коробки. Обрезаем верх у картонной коробки.
Красим коробку черной краской или оборачиваем черной бумагой.
Приклеиваем на одну сторону коробки круги под цвет светофора: красный, желтый и зеленый.
Мы будем играть с этим светофором, поэтому нам понадобилось сделать для него ручку. Для этого мы сделали дырки в боковых частях коробки, и привязали за низ веревку.
Для светофора можно сделать подставку из картонного рулона и коробки. Получится очень наглядное пособие.
Из картонного рулона, обклеенного цветной бумагой и черной бумаги получается очень интересный «подвижный» светофор.
Красим картонный рулон в черный цвет или оборачиваем его черной бумагой. Приклеиваем на него желтый, красный и зеленый круг. Соединяем степлером два черных листа бумаги, в одном из которых проделаны три отверстия.
Детки пошли в школу и их учат тому, что пригодится в дальнейшей жизни – читать, писать, считать, рисовать, заниматься физической нагрузкой, а также знать основные правила. Чтобы ребёнок лучше понял правила дорожного движения нужно не только о них рассказать, но и показать на наглядном примере. В этой статье мы рассмотрим, как сделать поделки на тему правила дорожного движения своими руками.
Вам понадобится: картонные коробки, цветная бумага и картон, ножницы, клей, фломастеры, простой карандаш, линейка, игрушечные машинки, гаишник.
Очень наглядным пособием для изучения правил дорожного движения становится светофор с подвижными частями.
Во внутренней стороне поделки размещаются три цвета — красный, желтый и зеленый. Сложенный вдвое черный картон соединяется с черными кругами с подвижной ручкой. С помощью ручки мы можем закрывать те цвета, которые в данный момент нам не нужны.
Вот, например, светофор «показывает» красный цвет.
А так светофор «показывает» желтый цвет.
В уголке ПДД можно предлагать ребятам самую разную самостоятельную работу. Конечно, ведущим видом деятельности для детей дошкольного возраста является игра. Именно в такой форме любой малыш скорее поймёт правила дорожной грамоты.
При работе с будущими школьниками, конечно, большую роль также играет занимательная беседа.
В более старшем возрасте актуальными будут пособия на закрепление дорожных знаков, будущие школьники также любят настольно-печатные игры с использованием фишек и кубика.
Инспектор ДПС объясняет своим ученикам правила вождения
В разном возрасте дошкольники любят игры-моделирования с машинками и макетом дороги
Многие ребята, особенно старшие дошкольники, любят подолгу рассматривать картинки на интересную им тематику, например, транспорт или дорожные знаки
Старшие дошкольники обычно любят настольно-печатные игры с фишками
Забавный светофор можно сделать из цветных баночек от йогурта.
Баночки наклеиваются на плотный картон. Можно сделать над баночками «крыши» из цветной бумаги.
Теперь ребятишки смогут повторять правила дорожного движения, не покидая границ своей собственной квартиры.
Посмотрите, как просто можно сделать светофор и дорожные знаки:
К сожалению, дети достаточно часто становятся участниками различных ДТП. И происходит это все потому, что многие из них не знают основные правила. Заучить правила дорожного поведения на дорогах и улицах города несложно. В этом деле ребенку должны помочь родители и работники учебных заведений. В учебных заведениях достаточно часто проводятся уроки ПДД. И заканчиваются эти уроки тем, что дети мастерят на них разнообразные поделки. Поэтому в этой статье мы решили привести для вас поделки на тему правила дорожного движения для детей. Данные поделки детки запросто смастерят своими руками, если посмотрят на фото.
Светофор — простая поделка.
Несколько вариантов.
Самый простой вариант поделки — это светофор. Действительно, такую поделку сможет сделать даже ребенок, который посещает детский садик. В процессе создания такого изделия не забывайте напоминать ребенку о том, что означают цвета светофора.
В качестве основы поделки будет — альбомный лист. Его необходимо разукрасить в черный цвет. Еще на листе можно нарисовать прямоугольник и разукрасить соответствующим образом. Из цветной бумаги вырежьте кружочки и приклейте их к своему светофору.
Светофор можно сделать из коробки.
Кроме этого, для создания светофора можно использовать старые СД-диски. Добрый светофор, который выражает свои эмоции наглядно сможет объяснить правила поведения на светофоре.
Очень интересно смотрится светофор, который имеет голову полицейского. Приделайте светофору ручки и ножки.
Старая бутылка — это отличный вариант для изготовления поделки. Вы ее просто раскрашиваете в базовый цвет, рисуете на ней кружочки светофора.
Еще не забудьте к бутылке прикрепить ножки. Из бумаги вырежьте ручки и вставьте в них основные атрибуты полицейского.
Аппликации на тему ПДД.
Следующими несложными поделками являются аппликации. С этой задачей также справятся малыши дошкольного возраста. Аппликации могут быть из цветной бумаги и картона.
Еще аппликации можно сделать из пластилина. В начале стоит на плотную бумагу нанести рисунок, после чего украсить его следует пластилином.
Еще одна картина из пластилина. Выглядит она очень необычно и ярко.
Фигурки из бумаги.
Поделка правила дорожного движения для детей должна быть интересной. Из бумаги можно смастерить множество разнообразных поделок на эту тему. И все они будут по-своему интересными.
Сложные аппликации.
Стоит сказать о том, что поделки про правила дорожного движения для детей могут быть не только простыми. И если детки воспользуются помощью родителей, то у них получиться вместе с ними сделать более сложные аппликации, которые наглядно объяснят правила поведения на дорогах.
В заключение
Как видите, делать поделки на тему ПДД очень просто. В таком случае ребенок фантазирует и запоминает важные правила, которые в дальнейшем помогут ему сохранить его здоровье и жизнь.
Сделать светофор быстро и просто своими руками должен каждый хороший родитель, если не желает для своего ребенка попасть в дорожную аварию. Но дети просто так не хотят изучать дорожное движение и его правила. Есть способ родителям помочь своим детям в этом. Светофор из бумаги можно сделать не только детям вместе с родителями, но и устроить это как увлекательную игру. Такое же обучение детей ПДД можно устроить как игру и в детском садике или школе.
В школах заботятся об изучении дорожного движения и его правил. Изготовление такой поделки детскими руками будет полезно.
Посмотрим — как и из бумаги, из коробки от обуви и еще некоторых элементов можно сделать нашу самоделку.
Наиболее легким и быстрым в исполнении можно назвать светофор из пластилина.
На его изготовление потребуется меньше получаса. И материал более чем доступен. К тому же, дети просто обожают лепить из пластилина. Так почему бы не объединить приятное с полезным: лепка и обучение? Кроме того, нарисовав на листке бумаги зебру, установив полученный светофор и взяв мелкие игрушки, можно проигрывать с малышом разные варианты перехода через дорогу.
Для поделки нам понадобятся кусочки пластилина красного, желтого, зеленого, коричневого и черного цветов. Пластилин лучше использовать мягкий, чтобы ребенку было удобнее с ним справляться. Также понадобится тонкая палочка (можно применить стержень от ручки или палочку от чупа-чупса) и крышка от бутылки (можно от газированной воды).
В процессе приклеивания кружков нужно комментировать свои действия, рассказывая о значении каждого сигнала светофора, чтобы ребенок лучше усваивал новую информацию.
Чудесная поделка готова, можно играть и учиться.
Вариант 1.
Начнем с изготовления самого простого и доступного всем светофора, который несмотря на его простоту стал популярен как среди родителей, так и среди детей.
Для этого мы возьмем картонную коробку из под обуви, состоящую из самой коробки и отдельной крышки, по одному листу цветного картона в цветах светофора, карандаш, два листа черной бумаги, клей «момент», и большую чашку (чашка несколько меньше диаметром ширины коробки)
Наклеиваем сверху вниз в порядке цветов светофора и на соответствующем расстоянии.Светофор готов.
Вариант 2.
Вот что можно сделать из простой бумаги, изготавливая из нее сначала объемные модули (шары), а после из модулей формируем всю конструкцию светофора
Сделав такие шары трех цветов получаем почти готовый светофор.
Для этого задания понадобятся плотная бумага или картон, толстые нитки, клей «Момент», и обычные ножницы.
Вариант 3.
Делаем светофор из модулей в форме шара. Вначале делаем шары.
Изготавливать светофоры из разноцветной бумаги и с используя различные шаблоны и выкройки возможно в очень большом разнообразии и если это становится интересным в свободное время можно делать еще много различных поделок из бумаги
Вариант 4.
Берется гофрированная цветная бумага трех соответствующих светофору расцветок (достаточное количество для изготовления 30 полосок размером 5см на 20см каждого цвета).
Для изготовления основы возьмем пустую пластиковую бутылку и кусок толстого картона черного цвета. Для работы нам понадобятся ножницы, острый нож, клей «момент» и толстые нитки.
Приступаем к изготовлению:
Светофор — это очень полезная для обучения и воспитания самоделка!
При наличии определенной смекалки и фантазии светофор можно сделать из пластилина, из бисера, из дисков и еще много из каких компонентов.
Интересно познакомиться с образцами наполнения и оформления уголков ПДД в передовых дошкольных учреждениях.
Руководитель ДОУ рассказывает, что уголок ПДД — это часть работы по обучению воспитанников дорожной грамоте
Подробно демонстрируются пособия, представленные в центре ПДД в группе и в раздевалке
Представлены центры ПДД в различных возрастных группах: от первой младшей до подготовительной
Диск с мультфильмом можно разместить в уголке ПДД в раздевалке.
Насыщенное движение на дороге — примета современной общественной жизни.
И дети невольно вовлекаются в этот процесс, потому им просто необходимо уже в раннем дошкольном возрасте постигать основы дорожной грамоты. Развивающий центр в группе снесёт свою важную лепту в это занятие. Малыши на практике смогут примерить на себя роль водителя и пешехода, рассмотреть поучительные картинки, поиграть с интересными пособиями. Задача педагога — сделать зону ПДД яркой и красочной, доступной малышам. И тогда им захочется проводить там больше свободного времени.
Светофор своими руками для детского сада можно сделать из использованной бутылки, например, из-под йогурта. В доме всегда найдется несколько разноцветных закручивающихся пробок. Поискать нужно зеленую, красную и желтую. Это будут сигналы светофора. В нужном порядке их надо приклеить на бутылку. Чтобы светофор стоял на ножке, надо к бутылке приделать стойку.
Ее можно приспособить из подручного материала. Это может быть тонкая баночка от мыльных пузырей или одноразовый стаканчик, перевернутый вверх дном.
Такую поделку можно использовать для настольных игр или поставить в дорожный уголок для самостоятельных игр детей с маленькими машинками. Это переносной вариант, так что дети могут играть с машинками даже на ковре.
Для детей 6-7 лучше усложнить задание, чтобы малыши сами вырезали из предложенных трафаретов формы для светофора и подрисовывали к ним мимику. Чтобы больше их заинтересовать, можно предложить нарисовать на кружках поделки мордочки столь популярных в наше время смайликов или эмоджи.
Сигналы светофора можно декорировать различными элементами. Чтобы выделить горящий сигнал, остальные могут быть заштрихованы в виде решетки. Или, наоборот, подчеркнуть нужный цвет можно с помощью наклеивания или дорисовывания лучей вокруг него.
В старшем дошкольном возрасте уже можно смело создавать обрезные аппликации. Также замечательное сочетание аппликация имеет с оригами. Сигналы светофора будут оригинально смотреться в виде фигурок, созданных при помощи свернутых листков разноцветной бумаги.
Тем самым совмещается 2 вида техники изготовления поделок и повышается интерес детей. Пример такого изделия — светофор из котов.
Самым ярким и интересным для детворы образцом сделанного своими руками светофора для детского сада будет вариант из воздушных шариков. Надо купить целую пачку черных шаров и три цветных – зеленый, желтый и красный. Основные шары для светофора можно приобрести немного большего размера, чтобы они выделялись. Для того чтобы шары держались в нужном положении, лучше всего придумать какую-то стойку. Например, сделать деревянную палку и вставить ее в крестовину для елки. Потом вокруг стойки привязываются надутые шары в необходимой последовательности.
Саму палку для эстетичности можно обмотать лентами и внизу привязать тоже несколько шариков для закрытия крестовины, чтобы ее не было видно. Такую поделку можно использовать даже на утреннике или в спектакле, посвященном данной теме. Она очень яркая и привлекательная для малышей.
Можно сделать светофор из подручных материалов.
Потребуются пакеты (целлофановые или для мусора), ножницы, пластиковая крышка, скотч, нитки.
Такой светофор можно повесить или прикрепить к стене. По этому принципу можно сделать механизм регулировки дорожного движения из ниток, оберточной бумаги.
Интересный вариант – сшитый из ткани светофор. Он может послужить развивающей игрушкой, если сделать цвета съемными, посадив их на липучку.
Из черной ткани выкраивают контур светофора, сшивают, проложив синтепон или флизелин.
Сигнальные цвета удобнее делать из фетра.
Съев вкусный светофор, каждый малыш запомнит правила перехода через улицу. Приготовить такие лакомства несложно: можно испечь печенье или взять готовое.
Главный секрет – в украшении.
Печенье, вафлю или сладкую булочку надо облить сверху шоколадом и, пока он не застыл, разложить сверху три конфетки нужных цветов (красный, желтый, зеленый). Это могут быть карамельки, цукаты или M&M. Вот и все!
Понравится детям и станет украшением мероприятия, посвященного знанию ПДД, светофор из воздушных шаров.
Шары закрепляются на стойку: черные служат основой, сигнальные размещают в правильной последовательности.
Творчество и фантазия помогут ребенку создать произведение искусства и навсегда запомнить правила перехода дороги на нужные сигналы светофора.
Stirmovik › Блог › Светофор — поделка в детский садик.
.
В садике в честь месячника по безопасности дорожного движения была поставлена задача — сделать поделку касающуюся, как ни странно, дорожного движения)). Делать из бумаги и картона — не наш путь. Поэтому, применив с женой мозговой штурм, было принято решения сделать светофор, да не просто чтоб светил, а чтоб мигал и переключался. В итоге была написана прошивка под Attiny2313, нарисована схема и сделаны платы. Светодиоды были применены 10 мм высокой яркости.
Для воспитательницы написал руководство по эксплуатации:
СВЕТОФОР Руководство по эксплуатации
Включение и выключение светофора:
Включение и выключение светофора осуществляется кнопкой «ПИТАНИЕ». Включение светофора сопровождается одновременным зажиганием всех элементов светофора и однократным звуковым сигналом.Работа светофора:В светофоре предусмотрено 3 режима работы: автоматический, ручной и мигающий желтый. Переключение между режимами осуществляется последовательно кнопкой «РЕЖИМ».
Описание режимов:
1. Автоматический – светофор автоматически производит смену разрешенного направления движения каждые 10 секунд. Включение режима сопровождается однократным звуковым сигналом. После включения светофор находится в автоматическом режиме.
2. Ручной – автоматическая смена разрешенного направления движения отсутствует. Смена разрешенного направления движения осуществляется только нажатием кнопки «СМЕНА». Включение режима сопровождается двукратным звуковым сигналом.
3. Мигающий желтый – светофор работает в режиме мигания желтого сигнала светофора по всем направлениям непрерывно, до момента переключения в другой режим. Включение режима сопровождается трехкратным звуковым сигналом.
Кнопка «СМЕНА» — предназначена для переключения разрешенного направления движения на светофоре. Смена направления доступна для автоматического и ручного режима работы светофора, при этом отсчет 10 секунд между сменой разрешенного направления в автоматическом режиме начинается заново после принудительной смены направления данной кнопкой.
В режиме мигающего желтого кнопка не функционирует.
Замена элемента питания:
Работа светофора осуществляется от одного элемента питания 9В типа «Крона» (далее батарейка). Для замены батарейки необходимо аккуратно сдвинуть кожух базовой платы светофора вверх, по направлению к светодиодам, снять разряженную батарейку, отсоединить разъем питания и установить новую батарейку, вновь подсоединив разъем питания. При необходимости наклеить на плату новый кусочек двухстороннего скотча для фиксации батарейки.
Как сделать светофор для детского сада своими руками.
Каждый детский сад время от времени проводит тематические выставки, на которых презентуются совместные работы родителей и деток. Для взрослых это возможность отвлечься от ежедневной суеты и вспомнить детство, а для детей – обогатить свои знания и навыки работы с различными материалами. Кроме этого, совместное изготовление поделок расширяет возможности общения между детьми и родителями.
Одной из важных тематических выставок является выставка, посвященная ПДД.
Итак, как сделать светофор для детского сада своими руками? Рассмотрим несколько простых и оригинальных способов.
Светофор из картона с меняющимися огнями
Казалось бы, бросовая вещь – пустая пластиковая бутылка, а сколько забавных поделок из нее можно сделать! Светофор можно сделать разными способами.
3 крышки окрашивают в сигнальные цвета, их крепят на пустой бутылке. В бутылочную крышку вставляют палочку, укрепленную на еще одну крышку-подставку. Вот и все!
Поделка из бутылки может стать настоящим шедевром. Для этого надо окрасить бутылку в нейтральный цвет, перевернуть крышкой вниз и нарисовать или наклеить из самоклейки глаза, нос, рот. Расположить сигналы посередине. По бокам приклеить руки из картона или ткани, снизу сделать ноги. В руки светофору можно дать полицейский жезл и знак дорожного движения.
Легче всего изготовить светофор на плотном картоне или ДВП. Сначала вырезают прямоугольник, обклеивают его черной бумагой со всех сторон.
Можно купить самоклейку нужных цветов. Тогда светофор своими руками для детского сада сделать будет намного проще, а готовое изделие будет ярким и блестящим. Для сигнальных фонарей вырезается шаблон из картона круглой формы. На бумаге красного, зеленого и желтого цветов обрисовываются контуры и вырезаются круги. Потом их наклеивают в нужном порядке: красный – сверху, желтый – посередине, зеленый – внизу. Располагают их посередине прямоугольника в колонке, один над другим.
Чтобы светофор можно было держать или поставить на пол, приделывается деревянная ручка с тыльной стороны. Ее нужно прикрутить на болты. Использовать такой светофор можно во время подвижных игр, например, «Водители» или «Поезд».
Мастер- класс «Мой друг-Светофор» в технике оригами
Цель: Развивать умение создавать конструкцию из бумаги по схеме.
Задачи: Развивать творчество детей, желание
помогать сверстникам, которым нужна помощь.
Материал: Картинки светофоров, образец светофора, сделанный воспитателем, схемы оригами «Собачки», «Кошечки» квадраты 8*8 цветной бумаги: красного, желтого и зеленого цвета, клей, ножницы.
Воспитатель загадывает загадку:
Он и вежливый и строгий.
Он известен на весь мир.
Он на улице широкой
Самый главный командир.
Чтоб тебе помочь
Путь пройти опасный
Горят и день, и ночь.
Зелёный, желтый, красный
(Светофор)
Воспитатель вместе с детьми рассматривает картинки светофоров.
А из какого материала делают настоящие светофоры, те, что висят или стоят на улице?
Для чего стоят светофоры?
Послушайте стихотворение А. Северного “Светофор”
Чтоб тебе помочь
Путь пройти опасный
Горят и день, и ночь.
Зелёный, желтый, красный
Наш домик — светофор,
Мы три родные брата,
Мы светим с давних пор
В дороге всем ребятам.
Самый строгий — красный свет.
Стоп! Дороги дальше нет,
Путь для всех закрыт.
Чтоб спокойно перешел ты,
Слушай мой совет: Жди!
Увидишь скоро жёлтый
В середине свет.
А за ним зелёный свет
Скажет он: “Препятствий нет, смело проходи!”
-Ребята, сегодня мы с вами сделаем необычный светофор. Показывает образец.
Воспитатель напоминает детям способ работы с бумагой, дети выполняют самостоятельно.
«Собачка»
Берем квадрат бумаги и складываем его уголок к уголку так чтобы получился треугольник.
У треугольника складываем уголки, делаем их похожими на ушки.
Далее складываем нижнюю часть лица нашей собаки, загибая во внутрь, а с внутренней части складываем наш треугольник наружу.
Вырезаем детали морды собаки: глаза, нос, язычок.
Приклеиваем наши детали на морду собаки.
«Кошка»
Квадрат бумаги складываем пополам по диагонали.
Затем полученный прямой угол сгибаем до
середины так, чтоб получилась трапеция.
Далее от середины длинной стороны трапеции вверх загибаем уши кошки (левое и правое).
Вырезаем детали морды кошки: глаза, нос, язычок.
Приклеиваем наши детали на морду кошки.
Физкультминутка: “Светофор”
В светофор мы поиграли (ходьба на месте)
Руки, ноги разминаем (встряхивание руками, ногами)
Красный свет нам
Ждать зелёного велит.
Чтобы было ждать не скучно,
Наклоняемся мы дружно.
И назад. И вперёд. (Наклоны)
Влево, вправо поворот. (Поворот туловища)
Вот и жёлтый загорелся,
Руки, ноги разогреем, (Рывки руками перед грудью)
Начинаем детвора! (ходьба на месте) .
Верх поднимем, вниз опустим,
Полетим как самолёт, (прыжки)
Вот зелёный загорелся,
Можно нам идти в перёд.
Левой, правой, левой, правой, (ходьба с высоким поднятием бедра)
Смело мы идём в перёд, (ходьба на месте.)
Светофор — помощник славный
Уставать нам не даёт.
После физминутки воспитатель предлагает детям закончить светофор. Вырезать белые круги, на них приклеить оригами в соответствии с сигналами светофора. Здесь дети применяют уже имеющиеся навыки вырезывания круга из квадрата. Круги наклеивают на основу.
Наши светофоры готовы.
Настольная игра «Светофор» от компании «Десятое королевство» – это сразу 5 игр, которые в увлекательной форме расскажут ребенку о правилах дорожного движения.
Изучайте дорожные знаки с помощью картинок и стихов, учитесь встречать их на дороге, примерьте на себя роль водителя или пешехода и устройте настоящее путешествие из одного конца города другой во время игры-ходилки.
Это полезное и увлекательное развлечение даст ребенку ценные знания о том, как вести себя на настоящей дороге.
Разнообразные варианты игры позволяют участвовать детям от 5 до 12 лет, подходят как для домашнего досуга, так и для занятий в начальной школе и старших группах детского сада.
10 апреля в 16.00 по адресу пр. Невский, 100 концертный зал «Колизей» состоится финал V юбилейного городского открытого конкурса «По дороге всей семьей» на знание ПДД для многодетных семей. В финале будут участвовать 75 семейных команд. Они представят на суд зрителей и жюри свои творческие работы.
С 16.00 до 17.00 в малом зале будет проходить благотворительная ярмарка, средства от которой направят на оплату лечения ребенка-инвалида. Семьи Петербурга подготовили для ярмарки различные сувениры с символикой ПДД.
Гости смогут найти здесь и кухонную утварь, выпечку, украшения, картины, елочные игрушки и даже одежду.
В это же время для юных участников пройдут бесплатные мастер-классы. Дети создадут открытки водителю и светофор оригами. Из новшеств на юбилейном конкурсе – 2 новых номинации: поэзия и фото-творчество.
В 17.00 начнется кульминационная часть мероприятия – соревнования 6 семей финалистов на главной сцене концертного зала «Колизей», где команды будут соревноваться в знаниях правил дорожного движения и демонстрировать творческие способности. Отряды юных инспекторов движения выступят в качестве болельщиков всех команд.
В 18.30 будут объявлены победители. В каждой из номинации обладатели первого, второго и третьего места получат столь полезные в хозяйстве термоподы, блендеры и вафельницы соответственно. Самую ответственную и творческую семью по итогам конкурса выберет компетентное жюри, в составе которого ведущий программы «Автошкола» на Авторадио, представители ГИБДД и руководство Детского Дома Творчества Союз.
Победителю вручат ценный приз. Какой – пока остается сюрпризом. В прошлом году победителям подарили велосипед.
***
Конкурс проводится в пятый раз и состоит из 2 этапов. Первый заочный этап стартовал 20 января. 170 семей из 17 районов города подали заявки на участие в 4-х номинациях: декоративно-прикладное творчество на тему «Сладкие правила» и «Добрых дел мастера», фото-творчество на тему «Семья на страже ПДД», литературное творчество на тему «Безопасные рифмы», видео-творчество на тему «Учим дома ПДД». Финалистами стали 75 команд. Инициатором конкурса выступает Дом Детского Творчества «Союз» Выборгского района Санкт‑Петербурга, много лет работающий над формированием сознательного поведения водителей и пешеходов на дороге, соблюдением правил дорожного движения.
Личностные результаты:
· Проявление познавательной активности, расширение информированности в данной области;
· Формирование ответственного отношения к учению, к способности к саморазвитию и самообразованию;
· Самооценка умственных физических способностей при трудовой деятельности;
· Развития трудолюбия и ответственности за результаты своей деятельности;
· Формирование уважительного отношения к труду;
· Формирование коммуникативной компетентности в общении и сотрудничестве со сверстниками, умение общаться при коллективном выполнении работ;
· Формирование основ экологической культуры, соответствующей современному уровню экологического мышления.
Метапредметные результаты:
· Самостоятельное определение цели своего обучения, постановка для себя новых задач в познавательной деятельности;
· Планирование познавательно – трудовой деятельности;
· Определение способов решения учебной или трудовой задачи на основе заданных алгоритмов;
· Самостоятельная организация и выполнение различных творческих работ по созданию изделий;
· Моделирование технологических процессов, использование инновационного подхода в процессе моделирования изделия или технологического процесса
· Развитие компетентности в области использования ИКТ, а также различных источников информации, словари, энциклопедии. Интернет – ресурсы;
· Организация учебного сотрудничества и совместной деятельности с учителем и учениками, объективное оценивание вклада своей познавательно – трудовой деятельности в решение задач коллектива;
· Оценивание правильности выполнения учебной задачи, собственных возможностей ее решения;
· Соблюдение норм и правил безопасности познавательно – трудовой деятельности.
Предметные результаты:
· Овладение необходимыми приемами складывания бумаги;
· Освоение базовых форм и умение складывать их по памяти;
· Умение выразить свой замысел на плоскости;
· Овладение терминологией, принятой в оригами
· Выполнение моделей различной степени сложности;
· Планирование технологического процесса и процесса труда;
· Овладение методами моделирования, конструирования, проектирование последовательности выполнения работы;
· Контроль промежуточных и конечных результатов труда по установленным критериям, выявление допущенных ошибок и способов их исправления;
· Стремление к экономии и бережливости в расходовании материала, времени;
· Овладение методами эстетического оформления изделий;
· Установление рабочих отношений в группе для выполнения практической работы;
· Соблюдение необходимой величины усилий, прилагаемых к инструментам, с учетом технологических требований.
Формы подведения итогов
· Участие в выставках и конкурсах творческих работ
· Презентация творческих работ
· Анализ творческих работ
2 октября в центре молодежных инициатив «Форвард» поселка Чистые Боры Буйского муниципального района для юных дарований прошло познавательно-развлекательное мероприятие «Грибное лукошко».
Много полезной и интересной информации дети получили в результате встречи в центре: узнали о том, что на Руси была грибная столица — город Судиславль в Костромской губернии, отвечали на вопросы викторины, в игровой форме учились определять по внешнему виду съедобные и несъедобные грибы. Презентация «Грибы» расширила у ребят знания и представления о грибах, познакомила с их особенностями и ролью грибов в природе; вызвала интерес к окружающему миру.
В завершение мероприятия специалисты центра провели яркий красочный и интересный мастер-класс по изготовлению грибочков из подручных материалов. Все работы получились по-своему интересны и красочны.
В этот же день для детей поселка прошел еще один мастер-класс – «Волшебный павлин». В начале ведущие познакомили присутствующих с историей возникновения одного из видов декоративно-прикладного искусства – оригами, рассказали о видах оригами. В ходе мероприятия научились складывать из бумаги волшебного павлина. Все юные мастера смогли освоить это непростое искусство. Работы получились очень необычными и яркими.
Далее было проведено не менее важное и поучительное мероприятие – познавательный час по правилам дорожного движения «Что такое светофор?». Ребята «познакомились» со светофором, зеброй и дорожными знаками, разгадывали загадки о дорожных знаках, узнали о том, когда и где появился первый светофор и что означают его цвета. А для того чтобы закрепить полученные знания, поучаствовали в различных играх: «Разрешается – запрещается», «Светофор», «Это можно – это нет», «Сказочный транспорт», «Пешеходы и транспорт».
Мероприятие прошло весело и познавательно. Дети приобрели опыт безопасного движения на улице, знания о правилах дорожного движения и дорожных знаках.
Специалист по работе с молодежью ЦМИ»Форвард» Полина Асаткина
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie. Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Наташа Старова
Я с ребятами в детском саду занимаюсь очень разными творческими работами, поэтому у меня возникла идея сделать необычную и яркую «ФОНАРЬ ДВИЖЕНИЯ ». Для этого нам понадобится бумага яркого цвета – красно-желто-зеленая, диски, ножницы для клея и золотые ручки.
Бумагу нарежьте тонкими полосками и приклейте к краю диска, а затем таким же образом приклейте с другой стороны.
1. Возьмите красную бумагу.
Получается вот такой цветок.
2 Затем желтый
3 И зеленый
Получилось три чудесных цветочка, потом середину дисков обклеиваем цветной бумагой по цвету цветка и они превращаются в очаровательный светофор … И в конце находим основу на которые они будут наклеивать, приклеиваем и теперь у нас есть готовый большой светофор .
Сейчас этот светофор занимает самое почетное место в нашей группе и в нашем углу по правилам дорожного движения.
Спасибо за внимание!
Публикации по теме:
В феврале в нашей группе прошла тема «Домашние животные», мы с ребятами поехали на экскурсию в наш жилой уголок. Детям это очень понравилось.
Путь пролегает через луг, ныряет налево, направо. Куда ни глянь, кругом цветы, Да по колено травы.
Зеленый луг, как чудесный сад, Вонючий и.
НАЗНАЧЕНИЕ: развитие у детей творческих музыкальных способностей… ЗАДАЧИ: – дать первоначальное представление о широких возможностях шума.
Здравствуйте, уважаемые участники МААМ! Спешу внести свой вклад – кукулоскуток – в страну «Кукуруза». У меня было горячее желание принять участие.
Как правило, мы вспоминаем о подарках накануне праздников. В настоящее время магазины предлагают богатый ассортимент и выбор самых разных.
Возникла необходимость в приобретении экранов в группе для разделения пространства. Как правило, все варианты, предлагаемые в Интернете, есть.
УКРАШЕНИЕ ДЛЯ ЗАЛА ИЛИ ГРУППЫ “ЦВЕТОК”. Вот какой пышный цветок можно сделать из подручного материала. Для его изготовления вам понадобится:
Мастер-класс по работе с макулатурой и бумагой, поделки для дорожных мероприятий.
Назначение: Изготовление поделок для мероприятий согласно Правилам дорога.
Использование урока пригодится:
– в работе с детьми от 6 лет (с помощью взрослых), детьми старшего возраста и взрослыми.
Цель занятия:
Создание условий для творческой самореализации личности ребенка.
Задачи:
– вызвать интерес к правилам дорожного движения;
– для воспитания грамотного пешехода, для закрепления правил дорожного движения;
– закрепить и отработать умение студентов работать с шаблонами;
– развивать аккуратность и терпение в работе;
– для поощрения творчества и нестандартных решений при выполнении работ;
– коррекция общей и мелкой моторики;
– для развития художественного вкуса и ориентации на качество продукции;
– для развития познавательного интереса к декоративно-прикладному искусству;
– способствовать формированию всесторонне развитой личности;
– осваивать новые технологии.
Сказка о светофоре.
В одном городке жил самый обыкновенный светофор.
Он стоял на самой обыкновенной улице, и самые обычные жители города постоянно проходили мимо него. Проходили дни и недели подряд. Времена года сменяли друг друга, а светофор все еще стоял и стоял. И у него не было выходных и даже перерыва на обед. Работа на светофоре была непростой. Единственным его удовольствием было наблюдать за пешеходами. День за днем светофор следил за горожанами и всегда считал поведение каждого из них.Больше всего ему нравилось наблюдать за детьми.
Вот девочка Варя с мамой. Капризничает, просит у мамы игрушку. Я смотрю на нее сердитым красным глазом. Варя перестала плакать, смотрит на меня и протягивает руку маме. Это хорошо, это умно! Все маленькие дети должны уметь переходить дорогу, беря за руки взрослых.
Вика занимается своим бизнесом. Бегает и не смотрит по сторонам !!! Стой, Вика !!!
.. Жалко, что Вика вообще не соблюдает ПДД! В каждом детском саду, в любой школе учат правилам, а дома родители тоже рассказывают, как лучше переходить дорогу. Почему Вика их не знает? Почему он не понимает опасности? А вот и мальчик Егор, наверное, в школу. У него за спиной рюкзак. Торопился, видимо проспал. Я смотрю на него красными глазами, он нетерпеливо топает ногой, но стоит на месте. Мой желтый глаз заставил Егора повернуть голову во все стороны, я подмигиваю ему зеленым.Все, бежал так быстро, как только мог.
Светофор каждый день присматривал за взрослыми и детьми. Он был расстроен и счастлив. Иногда он очень переживал, что не может кричать. Порой очень хотелось отругать нерадивых пешеходов. И тут ему пришла в голову мысль: «А может, на меня не обращают внимания, потому что я самый обыкновенный?» На светофоре твердо решили: «Мне нужно менять!» Как украсить себя? Красивые гирлянды и лампочки отвлекут водителей и пассажиров.Флаги на ветру могут закрыть глаза.
И светофор решил превратиться в цветок. Он очень любил ромашки, они росли рядом на обочине дороги. Получился очень шикарный костюм! Теперь все, кто проезжал или проезжал мимо, очень внимательно смотрели на него. Светофор очень обрадовал, нарушителей на его участке больше не было.
Жители городка полюбили светофор и всегда улыбались, глядя на него. Никто не торопился и не перебегал, не проезжал на красный свет.Как приятно, когда все соблюдают ПДД !!!
Слушай и помни
И всегда соблюдай их.
Загорелся КРАСНЫЙ свет,
Подожди, детка, выхода нет.
ЖЕЛТЫЙ свет выглядит горит
Приготовьтесь говорит.
И загорелся ЗЕЛЕНЫЙ
Давай, мой друг ученый.
Помните ПДД
Как таблица умножения!
I. Dahl
Необходимые материалы и инструмент:
– ножницы;
– диски;
– цветная бумага;
– клеевой пистолет;
– рисунки печатные;
– лента.
Этапы исполнения:
Для светофора используем цветную фольгу.
Бумага для принтера формата А4 и ненужные диски.
С помощью одного мы прописали словами значения цветов светофора. Спасибо большое за внимание.
Ждем ваших отзывов)))
В школе детям часто дают задание по ПДД своими руками сделать поделку, например, светофор. Это неотъемлемая часть правил дорожного движения, которую должен знать каждый. Сегодня мы рассмотрим способы сделать светофор.
Замечательный светофор сделан из трех лазерных дисков и трех крышек для сока.-800x600.jpg)
Красим крышки в нужный цвет, прикрепляем диски к картонной основе, приклеиваем крышки и готово!
Если вы хотите создать что-то подобное, вы можете собрать кусудаму светофора.Кусудама – это составная фигура, а точнее шар, сделанный из кусочков сложенной бумаги. Проще говоря, оригами.
Аналогичным образом можно собрать такой светофор. Работа эта кропотливая, требуется много модулей. Но результат того стоит. Если это поделка для соревнований, то первое место вам гарантировано.
Модули складываются как показано на фото. Затем они собираются по кругу, вставляя один в один, поэтому сначала собираем один зеленый цилиндр, затем еще один желтый, а последний красный.
Если подключить фантазию, то такой красивый светофор можно сделать из бумажных трубочек и мишуры.
Или можно подключить светофор. Эта задача больше для матери, чем для ребенка.
А может быть, сделав эту поделку, вы покажете дочери навыки работы на спицах, и она будет активно вам помогать.
Детскую поделку в виде светофора можно собрать даже из цветных целлофановых пакетов, что, согласитесь, смотрится очень красиво.
Продолжая тему рукоделия, отмечу, что светофор можно сплести из бисера. Все очень просто, стоит только взглянуть на эти замечательные поделки, и принцип их изготовления становится понятен.
Вот такой светофор модульный мы с сыном собирались в школу. Количество модулей не скажу, но пошло очень много.
Собираем четыре боковины
Модули размер 1/32 листа А4
1-9 белых модулей каждый
2 ряд – 8 бел
3-й ряд −9 белый (крайний модуль кладем на угол модуля 1 и 2 ряда)
4 ряда-3 белых, 2 зеленых, 3 белых (развернуть зеленые модули)
5 ряд-3 белых, 3 зеленых, 3 белых
6 ряд – 2 белых, 4 зеленых, 2 белых
7 ряд – 2 белых, 5 зеленых, 2 белых
8 ряд – 1 белый, 6 зеленых, 1 белый
9 ряд- (зелень убавить по центру) 2 белых, 5 зеленых, 2 белых
10 ряд – 2 белых, 4 зеленых, 2 белых
11 ряд-3 белых, 3 зеленых, 3 белых
12 ряд-3 белых, 2 зеленых, 3 зеленых
13 ряд-9 белый
Ножки модульного оригами светофор
Приклейте рамку для светофора, сделайте крестообразное отверстие для ножки в рамке снизу, приклейте, затем приклейте все четыре стороны светофора.
Приклейте ножки модулей для подставки.
Образовавшиеся зазоры между приклеенными пластинами закрыть модулями меньшего размера (1/64 листа А4)
Затем закройте верхнюю часть модульного светофора.
Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Схема оригами для светофора
Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Оригами полицейский светофор – Купить Азбуку в интернет магазине в Москве
Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Светофор из схемы оригами
Детские поделки на день ГАИ
Мой друг светофор фото ручной работы – ВТВ – Светофор
Модули для светофоров оригами – Изделия самодельные- Изделия – Кондитерские изделия
._d1-800x600.jpg)
Оригами, схемы оригами, модульное оригами, мастер-классы оригами »Страница 46
Идея для творчества!
Оригами светофор своими руками – RC-garaj.ru
Оригами светофор Мастер-класс “Тиб Вот
“.Схема вышивки светофор
Виктория Маруняк Мое хобби – модульное оригами
Мои работы. Оригами – очень интересное занятие. Это искусство складывать разные модели из бумаги. Моей первой поделкой был умный совенок. Вот.
Но я не остановился на этом. Друзья заказали на день рождения мужу следующую поделку.Занимается спортом, тяжелоатлет. И я сделал ему такого штангиста в подарок. Вот.
Предлагаю вашему вниманию оригинальную развивающую игрушку-поделку из пустой коробки от зубной пасты с пошаговым фото.
Данный мастер-класс предназначен: для воспитателей детских садов, учителей начальных классов, руководителей дополнительного образования. Кроме того, такая игрушка «Светофор» будет полезна родителям малышей, как полезный дидактический инструмент для изучения сигналов светофора вместе с ребенком.
Также в детском саду, в школе можно организовать выставку на лучшем светофоре, дополнив ее некоторыми оригинальными элементами, например, прикрепив кепку, ручки и т. Д.
Вам не нужно будет тратить столько времени на светофор . А материал, из которого будет сделана игрушка, довольно простой и доступный каждому. В общем, фантазии нет границ, так что вперед в сказочное дорожное движение!
Для изготовления понадобится следующее оборудование: цветная бумага (красный, желтый, зеленый цвет), один белый лист формата А4, клей ПВА (или клей-карандаш), ножницы, пустая коробка от зубной пасты, простой карандаш, линейка. , шило (для проделывания дырки в светофоре), крышка для крема или дезодоранта (для рисования цветных кружков), приспособление для воздушного шара на пластиковой ножке (на нем будет стоять игрушка).
Описание работы
Шаг № 1. На белом листе бумаги простым карандашом и линейкой нарисуйте линии, соответствующие размеру коробки с зубной пастой.
Примечание.
Для маленьких детей шаблоны можно приготовить заранее.
Шаг №2. Ножницами вырезаем по внешним краям (контуру) заготовку, которая понадобится для оклейки коробки.
Шаг № 3. Согните бумагу по линиям так, чтобы углы при приклеивании коробки были ровными и четкими.
Шаг № 4. Наклейте на коробку белую заготовку.
Шаг № 5. Простым карандашом у основания светофора (с одной стороны) наметьте место для отверстия, а затем проткните его шилом.
Шаг № 6. На цветные листы – красный, желтый, зеленый приклеиваем крышечку из крема и обводим ее простым карандашом кружочком.
Шаг № 7. Вырежьте ножницами нарисованные цветные кружки и приклейте их клеем-карандашом к светофору в правильной последовательности: красный, желтый, зеленый.
Шаг № 8. Вставьте пластиковую ножку с круглым основанием (приспособление для воздушного шара) в проделанное отверстие.
Вот каким оказался светофор! Такая развивающая объемная игрушка обязательно привлечет ребенка не только к игре, но и заинтересует его при изучении правил дорожного движения! Примечание.
Для большей устойчивости светофора пластиковую ножку лучше немного укоротить ножницами.
А для изучения сигналов можно с разных сторон дополнить игрушку каким-то одним цветом – красным, желтым и зеленым, чтобы дети могли попеременно называть определенный цвет и его значение.
… На палубе
(В каком порядке нам удастся представить эти коллекции – наберитесь терпения, мы неспешные читатели)
Алекс Столис, Питер Робертс, Ума Гоуришанкар, Лоррейн Капуто, Нина Анин, Джон Грей, Кен Гирке, Джейн Бил, Джейсон У. МакГон …
Следующий информационный бюллетень: ЗИМА 2021 Зарегистрируйтесь здесьУма Говришанкар – Места любви
Питер Робертс – Временные ряды
Алекс Столис – В бегах с Диком и Джейн
· § ·
Январь 2022 г.
Далее…
Обложка автора
Выборки
большое почему почему там что-то есть? краткая песня любви настоящих тебе подобных | объединение минутных пятнышка вся жизнь, все вещи, из падающих вод: • Питер Робертс © 2022 |
Питер Робертс, , стихи будут опубликованы в North Dakota Quarterly, а также были опубликованы стихи и рассказы в нескольких изданиях, включая Coffin Bell, LabLit.com, Illumen, Meniscus, phase shift (микроглаву из Origami Poems Project), Haikuniverse , Shoreline of Infinity, Scifaikuest, Shot Glass Journal, The Chaffin Journal, Nature “Futures”, Bitter Oleander, Lilliput Review, The Road Not Taken, Contemporary Verse 2, Poetry Salzburg Review, The South Carolina Review, Astropoetica, Café Irreal, Ars Medica, The Wisconsin Review, The William and Mary Review, New York Quarterly и многие другие.
• Õ •
Декабрь 2021 г.-Последняя микросхема этого года-
Обложка поэта
Выборы:
Что вы пришли сюда посмотреть? хотя у меня есть цель, я позволяю своему телу желтая бабочка – снова мимо сосновых шишек при любых условиях , достигнув точки, отмеченной на карте мягкие удары дятлов | Деревьев мало , чтобы сформировать концепцию леса, Достаточно для нации черепах, избавление от укусов Назовем это пограничной территорией, Но деревьев достаточно Хватит тишины, которую они издают. с восходом солнца позади, И везде есть трещины. • Крейг Киттнер © 2021 |
Крейг Киттнер жил во многих местах. Четырнадцать по последнему счету. Провиденс увидел начало интересных вещей, которые DC помог укрепить. На протяжении многих лет он находил выражение в актерстве и живописи, но с 2016 года хорошо освоился в поэзии.Его работы недавно появились в таких фильмах, как «Желудь», «Бутылочные ракеты», «Кувалда с подсветкой», «Проект стихов оригами» и «Тряпка на главной улице».
Уилмингтон, Северная Каролина, теперь дома. Это как бы недалеко от моря и полно света, когда не идет дождь. Хорошее место, чтобы побродить и написать. Крейг любит птиц, кошек и дождь, но редко пишет о кошках.
• Õ •
Фото на обложке: Reckendorf Public Well • Фото на обложке: Адельхайд Вашка
Выборки
ПРОГУЛКА В ДОМЕ Прогулка в ЕГО доме, | DURCHS HAUS GEHEN Durch SEIN Haus gehen, • Дуэйн Л. Херрманн © 2021 Кредиты на перевод: |
Дуэйн Л. Херрманн , всемирно издаваемый, отмеченный наградами поэт и историк, занимал различные преподавательские и другие должности, сейчас на пенсии.Его история и поэзия отмечены наградами и переведены на несколько языков. У него есть научно-фантастический роман: «Побег с Земли». Его полные сборники стихов: «Прерии возможностей», «Ихнографическая»: 173, «Слава царю славы», «Семейная вспашка» и «Остатки жизни». Его поэзия была отмечена Стипендией Роберта Хайдена по поэзии, включением в «Американские поэты 1990-х годов», «Карту литературы Канзаса» (веб-сайт), «Канзасская тропа поэтов» и другие.
Его история, «Твоя укрепляющая благодать», была удостоена премии Фергюсона Канзаса за книгу истории в 2007 году.Ожидаются сборники рассказов и исторических статей. Эти достижения бросают вызов его травматическому детству, украшенному дислексией, СДВГ, а теперь и посттравматическим стрессовым расстройством. Он все еще учится быть человеком и одновременно дышать.
• Õ •
Кредит на покрытие: American Linden (NatureHills.com)
Выборы:
ГОРОДСКОЕ ЛИНДЕВОЕ ДЕРЕВО Одинокое дерево, вы стоите в одиночестве | ОПАСНЫЙ Вот как это было. • Сара Куэйл © 2021 |
Сара Куэйл a – уроженка Вермонтера, письмо которой часто вдохновлено ее любовью к природе и опыту матери, дочери и педиатра, а также страстью к социальной справедливости.
Ее стихотворение «Калейдоскоп» получило вторую премию на фестивале танцевальной поэзии Embassy International в 2013 году, а ее стихотворение «Карнавальное зеркало» было опубликовано в журнале «Исцеляющая муза» осенью 2014 года.Она была отмечена поэтессой в февральском номере журнала Mockingheart Review за 2021 год. Ее стихотворение «Голоса» получило вторую премию на Фестивале танцевальной поэзии 2021 года. Ее стихи также принимали «Написать в точку» и «Evening Street Review». Она входила в совет директоров проекта «Молодые писатели». В настоящее время она работает с дочерью над сборником оригинальных стихов.
• Õ •
Дизайн обложки выполнен с использованием Alabama Media Group article photo
«Бывший пастор Сельмы:« Не переименовывайте мост Эдмунда Петтуса »
Выборки
Хорошая проблема Мне было пятнадцать Их дубинки раскололи тебе кости. Когда вы умерли, Но мы не одни. | Черные дрозды Подобно пологу тьмы Спустя годы я спрашиваю своего отца сидят крыло к крылу дубы оставили Он говорит, что мы никогда не видели, чтобы они покидали котловину черных полос * Челла Курингтон © 2021 |
Челла Курингтон (она / они) – писатель и учитель, чьи стихи и художественная литература публикуются во многих антологиях и журналах, включая Lavender Review, Spillway и Gargoyle.Имея три сборника художественной литературы и шесть стихов, она недавно опубликовала флэш-новеллу «Адель и Том: портрет брака» (издание «Нарушение правил»), представленную на Vancouver Flash Fiction. Курингтон, получивший звание «Лучшая художественная литература», «Лучший новый поэт» и «Лучший из сетевых номинантов», вырос на юге Аппалачей, а сейчас живет в Калифорнии.
• Õ •
Ноябрь 2021 г.
Обложка ‘Aquiline’ автора
Выборки
Aquiline Я смотрю, как спит мой прекрасный сын, Я выключаю его ночник, убираю Когда я смотрю на панели, я вижу, что Как я тогда в это верил. | Зима 1998 г. Когда я просыпаюсь, я решаю Я перестаю останавливаться на поцелуях, которых скучаю, Изношенная версия меня плавает, и я, Я обнимаю этого искалеченного близнеца. Спустя годы я оглянусь назад и узнаю • Уормила Виджаякришнан Прахлад © 2021 |
instagram.com/oormila_paintings• Õ •
Кредит на обложке: Callejuela de pueblo village, tipico de Asturias con gallina
por el medio, автор LLeandralacuerva
Выборки
•
Стихотворение из шести строф, создающее небольшую драму.
В Кордове # 1 на Смит-стрит базар, поросята очищенные от шкуры среди сорняков. чьи шеи будут поставляет | В Кордове # 4 Цикорий и роза Песни марьячи Чарро подходит для блеска На площади она ее красные юбки переливаются, Ее черные глаза • Аннет Гальярди © 2021 |
Ее первая полнометражная книга стихов под названием «Недостаток жизнеспособности» будет опубликована в 2022 году издательством The Poetry Box.
• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выборки
Хайку, называемое омни-ку, можно читать по-разному.
гелий | луна | |
а | мечта | подъемов |
в | звезды |
•
размытый | черный | |
а | ворон | облако |
из | миграция |
Кэт Леманн – поэтесса хайку, гончар и ученый из Коннектикута, США.
Ее стихи были номинированы на звание «Лучшее в сети» и были отмечены премией The Haiku Foundation Touchstone Awards (отдельное стихотворение), премией Haiku Общества хайку Америки им. Гарольда Г. Хендерсона и японской премией Basho-an. Она является участником премии The Haiku Foundation Touchstone Distinguished Books Award и судьей первого конкурса Trailblazer Contest. Ее произведения появлялись более чем на 100 площадках, включая Rattle, MacQueen’s Quinterly, Frogpond и Modern Haiku. В своей третьей книге, Stumbling Toward Toward Happiness , она делится своими заметками о самоисследовании.
Социальные сети: @SongsOfKat Веб-сайт: https://katlehmann.weebly.com/
• Õ •
Обложка: Лаури Берк
Выборки
1. До конца коридора 2. Началось еще одно утро | 5. С воскресенья и обратно 6. Это когда мы понимаем • Джо Марчиа © 2021 |
Джо Марчиа – автор двух сборников стихов: «Like Movies» (2015) и «Я буду сидеть на тротуаре, я не шучу» (2016).
• Õ •
Обложка Лаури Берк с деревом на переднем плане
Выборки
Окно в мир Идеальное место для наблюдения за Ночное освещение (008) Вспышки молнии, Гром из темного горизонта. В безмолвных последствиях играют | Порыв ветра сметает листья с деревьев. и вчера Дует ветер, пауза. • Дэн Фицджеральд © 2021 |
Дэн Фицджеральд тихо живет в Понтиаке, штат Иллинойс, ухаживая за домом и садом.Его стихи были опубликованы в The Writer’s Journal, PKA Advocate, Nomad’s Choir и многих других. Его работы также включены в несколько антологий.
• Õ •
Октябрь 2021 г.
Дизайн обложки ЯнК
Выборки
Скален Наклоняюсь, | Решить Мои стены поправляются, Равнобедренный: треугольника, имеющего две стороны • Эмма Фостер © 2021 |
Эмма Фостер – писатель-фантаст и поэт из Флориды. Она была опубликована в Cedarville Review, Ariel Chart, Aurora Journal, Writing in a Woman’s Voice, Nailpolish Stories и других.
• Õ •
Обложка из книги Ирены Орловой Птицы на дереве
Выборки
Она, пчелиная матка, выходит замуж за Зиму Забывчивый серфинг на этих уступах, Чайки, рассыпанные в зеленом свете Я буду как новенький, люблю, люблю мое время года. Глаз, котел траура, ничего не требует от жизни, | Она, моя певчая птица, ты mi pajarilla твой голос крылья открытых дорог ты та песня you are mi amor, querida mia mi cantadora, ты качели ты моя пощечина и хлопанье и ип • Андрена Завински © 2021 |
Источники: эти стихи опубликованы в Cider Press Review, Cloud Women’s Quarterly, Other Woman Worldly Press,
Rise Up Review, Lothlorien Journal.
Четвертый полный сборник стихов Андрены Завински, который выйдет в 2022 году, называется «Рожденные под влиянием». Ее стихи получили признание за свободный стих, форму, лиризм, духовность и социальную направленность. Она основала и руководит женским салоном поэзии в районе залива Сан-Франциско.
• Õ •
Дизайн обложки ЯнК
Выборки
Дом Диссоциации Я хочу написать рассказ Под абажуром, | Горе – светлячок стена искривлена, • Хиба Хеба © 2021 |
•
Хиба Хеба – писатель и поэт из Пакистана. Она получила степень бакалавра английской литературы и лингвистики в воздушном университете и в настоящее время подает заявку на стипендию за границей. Некоторые из ее стихов появились в Daily Times, Terror House Magazine, Autumn Sky Poetry, Women’s Spiritual Poetry, Visual Verse, Feminist Voices Anthology: Volume II, OpenDoor Poetry Magazine, The Raconteur Review, The Wild Word, Ofi Press Magazine и New Feathers.
Антология.Ссылки на ее предыдущие публикации, а также ее сообщения в социальных сетях можно найти здесь: https://linktr.ee/hiba.heba_
• Õ •
Фотография на обложке автора
Выборки
Если бы я был по-своему Я бы посмотрел через ваше плечо утром, Посмотрите, как мягко может падать дождь. Как разбитая чашка, твои золотые волосы Солнце, которое вы мне предлагаете, было довольно добрым. | Бесконечные матрешки Позвольте мне быть вашими матрешками, С годами, с изменениями, • Леннарт Лунд © 2021 |
•
Леннарт Лунд – поэт, фотограф, рассказчик короткометражек и историк.Его работы появляются на международном уровне с 1965 года.
• Õ •
Обложка: Замедленная фотография от androidguys.com
с бесконечными точками прибытия утреннего света день проваливается в счастливую идею из бахромы белой ленты рассказ • «дневной кувырок» – Впервые опубликовано в виде визуального стихотворения | убегающие в подсознание настоящие жабы ввод / вывод Замедленное дыхание в момент заката • «побег» – Впервые опубликовано в выпуске №9. «промежуток времени» – впервые опубликовано в выпуске № 8 – Шлока Шанкар © 2021 |
•
Шлока Шанкар – поэт, редактор и художник-самоучка из Бангалора, Индия.Ей нравится экспериментировать с японскими короткими формами и мириадами найденных поэтических приемов. Номинант на звание лучшего в сети и отмеченный наградами поэт хайку, ее стихи и произведения были опубликованы в более чем 200 известных онлайн-изданиях и печатных изданиях. Кроме того, с 2016 года она отредактировала и соредактировала шесть международных поэтических антологий.
Шлока является редактором-основателем литературного и художественного журнала Sonic Boom и его издательства Yavanika Press. Посетите ее веб-сайт: https://www.shlokashankar.com
Дизайн обложки Ян Кео
Книжная математика Если бы не пожертвовать достаточно Такие нарушения контракта Предложение – не проблема: У меня хорошие намерения: | Подарки Я подарил ей на день рождения электрическую дрель Она не понимала, что Сначала я не понял • C.T. Holte © 2021 |
C.T. Holte вырос в Миннесоте без цветного телевидения; играл в ручьях и на кукурузных полях; много ходил в школу; и выступал в качестве учителя, редактора и занимался менее многословными вещами. Недавно он переехал в Нью-Мексико и купил на Рождество классную электрическую бензопилу.
Его стихи были опубликованы в журналах Words, California Quarterly, Months to Years, Pensive, The Daily Drunk, Mediterranean Poetry и других изданиях и были повешены на деревьях в честь Рио-Гранде-Боске.
• Õ •
Сентябрь 2021 г.
Фотография на обложке: Ян Кео
Выборки
Поздним весенним вечером, скоро появятся Переднее крыльцо, мягкий теплый ветерок, Когда деревья были срублены, Подсолнечник Мягкое свечение в сумерках – Величественный лес | Гладкое, спокойное озеро В естественной тишине, Четвертый ашрам – Он постоянно будит его – Haiku на английском языке, С концентрацией ″ Мо Сулис © 2021 |
Мо Сулис на пенсии, живет в Блэк-Маунтин, Северная Каролина.
• Õ •
Обложка автора
Выборки
КИТО РАССВЕТ На площади ниже От церкви к церкви звонят Движение ускоряется и эта пробуждающая песня | НАСТОЯЩИЙ ПОДАРОК Сильный туман купание в холмы, фокусируется только ″ Лоррейн Капуто © 2021 |
В марте 2011 года парламентский поэт-лауреат Канады почтил ее стихи. Капуто провел более 200 литературных чтений от Аляски до Патагонии.
Она путешествует по Латинской Америке, слушая голоса пуэбло и Земли.
• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выбор
, когда вы думаете, что больше нечего сказать (носить), свободная нить тянет (играет) в сердцах струн и стальных струнах. палец выщипывает. примечание пингует. солнце продолжает восходить.однажды разорванной ткани нужно время, чтобы зажить (тоже смейтесь). колют булавки. кровь кипит и варится (даже самый горячий из чаев (темпераментов) остывает). сладкие щенки облизывают и никогда не теряют _ надежду_ / _heart_ / _home_. 14 способов сшить счастливое сердечко / заклеить шрам (тоже напугать) 1. Нанесите мазь (обильно) |
Джен Шнайдер – педагог, которая живет, пишет и работает в небольших помещениях по всей Пенсильвании. Она номинирована на премию Best of the Net, ее рассказы, стихи и эссе опубликованы в самых разных литературных и научных журналах. Она является автором книг Invisible Ink (Toho Pub), On Daily Puzzles: (Un) lock Invisibility (Moonstone Press) и Blindfolds, Bruses, and Breakups (Atmosphere Press).
• Õ •
Обложка: Pillars of Creation Лаури Берк
Выборки
филиала, холдинг закручивая ветку и вот мы, освобождены выпущено к сезону | эта водяная краска жизнь здесь, где мы устроили пикник тонкое белое облако , пока флеш танцует с , затем стирание снова как мы, признаюсь – в этой жизни водной краски • Эмалиса Роуз © 2021 |
Она добровольно занимается спасением животных. Жизнь в прибрежном городке является источником вдохновения для ее искусства. Ее стихи появлялись в книгах «Написание женским голосом», «Rat’s Ass Review», «Cholla Needles» и в других прекрасных изданиях. Ее последняя антология – “По прихотям перекрестных течений”, изданная Red Wolf Editions.• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выборки
НОЧНОЙ ВЕТЕР Лунный свет ласкает | ОРАНЖЕВЫЙ ШАР Круглый полный шар • Дуэйн Л. Херрманн © 2021 |
• Õ •
Август 2021 г.
Коллаж на обложке Яна Кео
Выборки
Ангелы В «Фелисити», | Ласточка Погода На Сливовом острове, в начале августа – Впервые появился в The Wrack Line • Нэнси Джаспер © 2021 |
Она опубликовала девять микрочагов в рамках проекта «Оригами стихи». В 2015 году OPP номинировал ее на премию Pushcart Prize. Ее работы появились в «Левиафан», «Гавеа-Браун», «Рэклайн» и в антологии «Пропавшее провидение», . Ее сборник исландских стихов E gil Is Baffled by Grief доступен здесь, через Amazon .• Õ •
Обложка: ‘Маленький сад’ из сети
Выборки
В штучной упаковке Кусочек рая | Бюллетени Большие объявления • Чак Харпа © 2021 |
Чак Харп – писатель и победитель конкурса Mad Cave Studios Talent Hunt.Он выпустил два сборника стихов с Unsolicited Press, What Must Go On и Working Title . В 2021 году Чак выпустил мини-альбом со стихотворным устным словом и музыкой под названием Katcheen Tongues.
• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выборки
против течения Краснохвостый ястреб пролетает на тросе Странно медленный, ястреб, словно борется с приливом. на строительство 250 домов у обрывов, Остатки красного дерева Возле шторма истерика забросала | Пасхальный понедельник Круги Над рекой Дешут возле старой мельницы • Мэтью Джеймс Пятница © 2021 |
Мэтью Джеймс Фрайдей i -ый британский писатель и учитель.Он был опубликован во многих международных журналах, в том числе недавно: Dawntreader (Великобритания), VerbalArt (Индия) и Lunch Ticket (США). Микроглавы «Все пути любви», «Воды Орегона» и «Недосказанные слова » были опубликованы проектом «Оригами стихотворения» (США).
• Õ •
Обложка: My Cairo Diary Лаури Берк
С е л е к т и я
Березы Я говорю вам, что они мои любимые На основе «Мозаики времен года | Падение они не шутили «Падение» навеяно скульптурой Джули • Йорис Сёдинг © 2021 |
Последние сборники стихов Джориса Содинга – это Forty (Rinky Dink Press, 2019) и Home in Nine Moons (Clare Songbirds Publishing House, 2018).
Сочинения Сёдинга публиковались в таких публикациях, как Another Chicago Magazine, Columbia Poetry Review и Red River Review. Он учитель языков в пятом классе в Чикаго, где живет с женой, сыном, дочерью и котятами.
• Õ •
Обложка: Saffu с сайта weoneness.com на Unsplash.com
С е л е к т и я
1. Дороги пусты. Сон свисает с кончиков Воздух наполняется ароматом свежеиспеченного хлеба Время хлопает ее по запястью. Моя машина проезжает мимо. | 2. «Гибкое тело Мы текем, как вода от приветствия солнцу, Каждое сухожилие, каждое сухожилие Переходим из позы лодки, Я чувствую растяжение времени • Прит Ганапати © 2021 |
Прит Ганапати – инженер-программист, ставший государственным служащим.
Она является сотрудником налоговой службы Индии и в настоящее время работает в Бангалоре, Индия. Ее сочинения были опубликованы в нескольких онлайн-журналах, включая «Матери всегда пишут», «Литературное обозрение юного ворона» и «Буддийское поэтическое обозрение».
• Õ •
Июль 2021 г.
Полнолуние – 24-е
Фото на обложке: Закат над водой автор
1 на дорожке 2 под деревом, над камнем 3 двое влюбленных | 4 розовое небо и пурпурные облака 5 дождевая вода 6 после купания ребенка • Джейн Бил © 2021 |
Джейн Бил , Ph.
Д., поэт. Ее хайку появляются в Asahi Haikuist, Fireflies ‘Light, Frogpond, Haibun Today, Haiku Journal, Illinois Audubon Society Magazine и Presence, а также в ее микрочипах хайку из Origami Poems: Journey, Garden, Bliss, Wide Awake and Dreaming, и в горах Санта-Крус. Она является автором многих других сборников стихов, в том числе книги хайку «Птицы хайку», книги хайбуна «Дикая песня птиц» (2011) и книги хайга «Луганки приливов». См. Https://janebeal.wordpress.com
• Õ •
Обложка, коллаж Яна К.
С е л е к т и я
чувственный Я вижу боль Задержка аромат Выталкивает Если бы только | Освобождение Кожа к коже, мы пишем [ваша обнаженная фигура] твоя обнаженная фигура • Марк Дановски © 2021 |
Марк Дановски – автор сборника стихов As Falls Trees (NightBallet Press, 2018).
Он также является автором микроглавок Nightfallen, Becomingicing of the tide и Careen , опубликованных проектом Origami Poems Project. Его стихи появлялись в Eunoia Review, Gargoyle, The Healing Muse, The New Verse News, Peacock Journal и других изданиях. Он главный редактор журнала Schuylkill Valley Journal.
• Õ •
Обложка из общественного достояния (piqsel.com)
С е л е к т и я
Земля, любившая небо Они скажут вам, что ледники сформировали вас. – Это стихотворение было показано на | Be My Valentine Забери мое сердце. Не изнутри Нет, разнеси • Джойс Бринкман © 2021 |
Джойс Бринкман , лауреат премии Индиана поэт 2002-2008, верит в поэзию как общественное искусство. Она создает публично-поэтические проекты, в которых задействованы ее стихи и стихи других авторов.Ее стихи постоянно выставлены в витражах высотой в двадцать пять футов в аэропорту, в освещенных произведениях искусства в библиотеке и на стене на городской площади Кесальтепеке в Сальвадоре. Джойс получила стипендии от Центра искусств Мэри Андерсон, Студии Вермонта и Совета искусств Индианаполиса. Она окончила Ганноверский колледж и живет в Зайонсвилле, штат Индиана, с мужем и сварливым котом. Она является членом учредительного совета Brick Street Poetry Inc, продюсера поэтического подкаста «Off the Bricks», который можно услышать на Spotify и других подкаст-платформах на веб-сайте Bricks Street Poetry http: // www.
brickstreetpoetry.org/.
• Õ •
Обложка: мост Montreat NC от JanK
С е л е к т и я
ROVING TROUBADOUR Это еще одна кофейня Несмотря на микрофон, К сожалению, из города в город, Многие дороги прошли Я чужой в своем собственном мире. | СКАЗКА О КНИЖНОЙ ПОЛКЕ Они все здесь, на ваших книжных полках: Интересно, сколько Может быть, для галочки. Я знаю, что • Джон Грей © 2021 |
Джон Грей – австралийский поэт, житель США, недавно опубликованный в журналах Orbis, Dalhousie Review и Round Table. Последние книги «Листья на страницах» и «Память вне головы» доступны на Amazon.
Предстоящая работа в Lana Turner и Hollins Critic.
• Õ •
Обложка Иви Трабант МакКенна
С е л е к т и я
Повару от пирожных Эй! Проверьте размер кастрюли! | Пожалуйста, Пойдем • Тоня МакКенна Трабант © 2021 |
Тоня Маккенна Трабант – тренер, педагог, поэт, мама, живущая в сельском Висконсине со своим партнером, двумя почти идеальными потомками, спасенной собакой и несколькими курицами-несушками.
Ее стихи появляются в Clockhouse Journal, Bramble, Verse Wisconsin, Icebox Journal и других. Она добровольно изгнанная жительница Аляски, которая пишет, чтобы стимулировать человеческие связи, справедливость и радость.
• Õ •
Обложка-коллаж от JanK с иллюстрацией Лаури Берк
С е л е к т и я
| Две галлоны в наши восьмидесятые, выпили какао и съел ящик слоновьих ушей – слоеных, сладких пирожных, , которые ничего не весят до превращаются в целлюлит на бедрах. На сахаре мы писали стихи на старинном Андервуде с такими жесткими ключами, что мы подняли со страстью заставить их отказаться буквы прячутся в ленте. Красная буква черной буквой, мы набирали светские стихи запрещенных слов дерьмо, ебать asS пизда ублюдка быков TWAT ТИЦ Шлонг Годы гашения выпущены, раскрытие тайны опасений, беззакония высвободились на печатной бумаге. Все для нас. Будь проклята приличность. Вечер плохо переводится без слез веселья и соплей. Вы должны были быть там. Вы должны были быть нами. | Когда мы сказали племянникам (только взрослые), смотрели , как если бы мы говорили о первозданном предмете на мертвом языке. Один спросил, что такое Андервуд. Другой не понял почему не удалось напечатать две копии вместо использования копировальной бумаги. Позови в тот вечер кайф от озноба за крошечные жизни, воспитанные за столом, образованы устрашающими словарями , способный вежливо толкнуть человека к стене с сарказмом – и без повышенных голосов. Думаю, ты должен был быть там. Вы должны были быть нами. Никто не понял радость печатать слова с цензурой ЗАГЛАВНЫМИ КРАСНЫМИ буквами. • Лурдес Тутен-Гарсия © 2021 |
Лурдес Тутан-Гарсия кубинка по происхождению, американка по гражданству, кубинец из Новой Англии по культуре.
Она живет на среднем побережье штата Мэн, где слушает, что говорит океан, а затем бежит домой, чтобы это записать. Ее работы публиковались во многих журналах, включая Metafore, The Adanna Literary Journal, Avocet и Cathexis Northwest Press. Одеяло Море номинировало одно из ее стихотворений на премию Sundress Publications 2019 Best of the Net.В 2018 году BestLit Review включил ее в десятку лучших прозаиков на среднем побережье штата Мэн.
• Õ •
Обложка: «Космический цветок» Лаури Берк
Выборов:
Движение на работу Я все время поворачиваю голову налево Девяносто пять в сторону Ньюберипорта Мое окно не пропускает звезды, опубликован в журнале Mineral Lit Mag # 4.2, | Последний многоквартирный дом Если бы не ты бы не был по-прежнему располагались вокруг ощущение • Мэтт Стефон © 2021 |
Мэтт Стефон был религиозным редактором Encyclopaedia Britannica , поэтическим редактором West Texas Literary Review , адъюнктом английского и гуманитарных наук в Общественном колледже Мидлсекса и адъюнктом по сравнительному религиоведению в онлайн-программе получения степени Норвичского университета.
Он учился в Пенсильванском университете и Бостонском университете, имеет две книжки и 463 хоум-рана по виффл-мячу.
Июнь 2021 г.
В середине года
Чехол – пара высоких
В ознаменование 10-й годовщины (23 июля) смерти Эми Уайнхаус.
Выборки
Пробуждение Ты всю ночь пел, | Десять лет Прошло десять лет, • Дайан Илэйн Дис © 2021 |
Дайан Илэйн Дис живет в Ковингтоне, штат Луизиана, напротив озера Пончартрейн от Нового Орлеана. Ее стихи опубликованы во многих журналах и антологиях.Дайан является автором главы, Coronary Truth (Kelsay Books), и будущих глав, Я не могу точно вспомнить, когда я умер, и The Last Time I Saw You . Дайан также издает блог Women Who Serve, в котором публикуются новости и комментарии о профессиональном женском теннисе во всем мире. Ее автор блога – Дайан Илэйн Дис: поэт и писатель в целом.
• Õ •
Обложка-коллаж Ян Кео
Выборки
он был там однажды,
глядя на дерево мрачная, серая древесина , а иногда и я люблю удивляться что случилось мальчику в поезде проживает все это, столько лет назад . , правда, забавная штука, слыша о нем и беги. но он снова; он есть. | я уверен, она увидит это , но я не знаю, когда в погоне за нашими свободами в первый запад Я скучаю по нему. , но мы постарели, я понял. слегка свергнут. , но прежде чем мы снова расстанемся, здесь – Я прижал для тебя лепесток. • Август Рейнольдс © 2021 |
Родом из Блэксбурга, штат Вирджиния, « Августа Рейнольдса» направлена на то, чтобы рассказывать и пересказывать истории о людях, невзгодах, обществе, а также о нашей способности и неспособности забыть. Август черпает вдохновение в американских стилях письма начала-середины 20-го века, детализируя важные, связанные с ними истории и взаимодействия с помощью более доступного, сдержанного стиля письма, который колеблется на линии сложного и чрезмерно упрощенного.
Август включает семь стихотворений, которые в настоящее время приняты для публикации в таких местах, как The Red Cedar Review, Philologia, в антологии, которую вскоре создадут Eber & Wein, и микрочип из четырех стихотворений, принятых для публикации здесь, в Origami Poems Project. Поэма из антологии в настоящее время находится в полуфинале международного поэтического конкурса, проводимого через Poetry Nation материнской издательской компанией Eber & Wein. Оба стихотворения в The Red Cedar Review и Philologia уже были успешно опубликованы обоими и находятся на их соответствующих веб-сайтах.«
• Õ •
Коллаж от JanK с иллюстрацией Лаури Берк
Выборки
Наша улица раньше была яблоневым садом. Позвонил мистер Луи; он хочет, чтобы вы пришли. Все дети переезжают. Не знаю почему – он просто хочет, чтобы все дети Он старик. Адди и Жако будут там. Да, будут. Давай, прямо сейчас. Вот увидишь. Майкл тоже, и Мэтт. Я думаю, Ребекке на тренировке по футболу. Продолжать. Идти. Выходи за дверь. Сейчас. (Поет.) Нет, я серьезно. Идти. Сэм, Клэр. Все. Я уверен, что он им тоже звонил. Я разговаривал со Сьюзен; все идут. | Наша улица раньше была яблоневым садом. Да, это было быстро. Я не знаю, я сейчас возвращаюсь на улицу. Я только что пришел – Не знаю; он только что показал нам, как резать ананас. Нет, на кухне. Не знаю почему. Все были там – все дети. Он только что показал нам, как правильно разрезать ананас. Вы знаете, это мистер Луи. На нем была форма. Нет, обычный ананас. Он купил их в Stop n Shop, но сказал, что ел их в Пуэрто-Рико. Да, он нам дал. Он нам тоже дал сыр. Эти маленькие колеса. Это было хорошо. Нет, она была в своей комнате. Я знаю. Я знаю – ты всегда мне это говоришь! Я должен вынести его мусор завтра. • H Фэй © 2021 hfmpoetry.net |
H Фэй – поэт и педагог из Массачусетса.Недавние работы были связаны с экологией, границами и воплощением.
• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выборки
Следы копыт Эти следы копыт Это не кованые отпечатки | Глициния и звезды Днем глициния прижимает Ночью тени скользят Желание и ликер Мигающий Орион, бормочущая Кассиопея Но звезды, как бы их ни называли • Эллен Сандер © 2021 |
Расширенное издание Trips: Rock Life in the Sixties недавно было переиздано Dover Publications. Чак Клостерман сказал The New York Times (18.07.2019), что это было на его прикроватной тумбочке. Ла-ди-феккинг-да, верно?Она была поэтом-лауреатом Белфаста, штат Мэн, в 2013 и 2014 годах. Ее работы публиковались во многих журналах и антологиях, включая Maine Review, Georgia Review и Visiting Bob (Dylan). «Хоторн», «Дом в Болинасе», издается издательством Finishing Line Press. Ее следующий сборник стихов, Aquifer, будет издан издательством Red Bird Chapbooks.Вы можете легко найти ее веб-сайт и помет в социальных сетях.
Она ведет и продюсирует Poetry Woodshed Radio на WBFY-LP в Белфасте, штат Мэн. Поэзия пинает ее по утрам, а ночью отменяет комендантский час. Она хочет, чтобы фраш был словом. www.ellensander.com
• Õ •
Обложка, коллаж Яна Кео
Выбор *
колибри подтягивается яблони * настой водки взламывая яйцо, змеи шепчут зубы | моя кошка не любит шепчет утром яйца передают привет * снисходительный взгляд «Я просто выпью лимонад. кофейных зерен в мешке с широко открытыми глазами • Роберт Беверидж © 2021 Каждое из этих стихотворений должно стоять независимо, а не как одно представленное произведение. В их число входят: |
• Õ •
Обложка: Ной-на в природном парке слоновДневная торговля в Чанг Мой Двухлитровая бутылка колы бесплатно, | Терпение цепей , посвященный природному парку слонов в Леке Ной-на знает терпение цепей. • Виктория Кроуфорд © 2021 |
Ей особенно нравится тропический сад.• Õ •
Май 2021 г.
5 месяц
Обложка, коллаж Яна Кео
Выборки
Pas des Beaucoup Танцоры создают линию, Дюжина тел сплетается как одно целое, | Музей Музей удивительных объятий, Мы являемся витриной выставки, Табличка на стенде рядом с нами • C.T. Holte © 2021 |
К. Т. Холте вырос в Миннесоте без цветного телевидения; играли под мостами, вдоль ручьев и на кукурузных полях; много ходил в школу; у него были концерты учителем, торговцем, редактором и некоторые менее многословные вещи; и недавно переехал в Нью-Мексико со своей партнершей, самой красивой девушкой в мире.Его стихи были опубликованы в журналах Words, Touch, California Quarterly, Months to Years, Pensive, The Best of Kindness 2020, The Daily Drunk, The Rainbow Poems и других изданиях, а на Рождество ему подарили действительно классную электрическую бензопилу.
• Õ •
Несколько замечательных комментариев
Я очень благодарен за ваш проект и вашу работу!
Шерил Цезарь, 12/2019 Мичиган
·
Уважаемый Ян и OPP! Большое спасибо за публикацию в Facebook и за мой микро-глава.
Я поделился им в некоторых писательских группах FB, к которым я принадлежу, и получаю много лайков.
Это действительно помогло скрасить темные зимние дни, которые мы собираемся здесь, в северном Висконсине!
Всего наилучшего, Ян Кронистер, Висконсин, 12/2019
·
Так же хотел сказать поздравление с десятилетием стихов Оригами – гениальная идея и настоящий подарок поэтам и любителям поэзии. Мне нравится быть частью этого. Также я нашел очень трогательными стихи известного поэта, покойной Хелен Берк.
Best, Сьюзан Мурхед, Нью-Йорк, 11/2019
·
Я так благодарен проекту «Оригами стихи» за то, что вы были первым, кто опубликовал отрывок из моих стихов, и это вселило в меня столько уверенности .
.. Спасибо вам снова и снова. Теперь у меня есть важная новость: моя первая полная рукопись принята к публикации! Он называется «Найдено: между деревьями» и публикуется независимой прессой под названием Grey Borders Books из Онтарио, Канада. Письмо пришло 15 января.Я не мог перестать смеяться и плакать одновременно. Вот ссылка: http://www.greybordersbooks.jigsy.com/tak-erzinger
TAK Erzinger 2/2019
Я работал над сборником стихотворений, основанных на световой шкале – словах, переходящих от светлого к темному. Я отправляю набор из шести штук для создания сборника стихов оригами. Хотя они могут быть слишком длинными? Я подумал о тебе и о твоем замечательном прессе / проекте, потому что я думаю, что они хорошо бы смотрелись вместе.
Юлия Клатт Зингер 15.02.2019
·
Ой, как я этому рад! В последнее время я работаю над очень длинным сборником и не очень часто отправляю небольшие материалы…так что это действительно здорово. Я получил удовольствие, раздавая заранее сложенные парни на чтениях или вставляя их в каждую книгу, которую я продаю.
Людям действительно нравится концепция и поэзия!
Линн С. Вити, 11.01.2019
Отличная новость для начала Нового года! Я рад, что меня снова выбрали. Я с нетерпением жду процесса публикации в ближайшем будущем.
Мэтью Пятница, 10.01.2019
Мои копии прибыли на прошлой неделе. Извините за задержку с ответом. Они прекрасны! Спасибо огромное.
Кристофер Соден 09.01.2019
?
“Как получить оригами Microchap?”
Загрузил микросхему («микро»), наведя курсор на «ссылку» и выбрав «сохранить в файл» на своем любимом электронном устройстве. Откройте этот PDF-файл на указанном устройстве и отправьте на принтер – альбомная ориентация . Каждый микро-файл представляет собой одностраничный PDF-файл … и вы затем распечатываете, складываете, публикуете … бесплатно!
Если у вас нет цветного принтера, просто выберите вариант «печать в оттенках серого».Ниже приведены скриншоты того, что мы имеем в виду.
ЭКРАН НА ОДНОЙ СТРАНИЦЕ PDF-файла (наших) вариантов печати
К началу
Спасибо за ваш интерес к проекту «Оригами стихи» ™
Мы, , знаем, , что вам понравятся эти фигурки оригами
ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ПОДАЧИ
Свяжитесь с нами Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов.У вас должен быть включен JavaScript для просмотра. – Получать наш информационный бюллетень
137 Свиньи оригами / YouTube
Обиженный автомобилист, получивший штраф за нарушение правил дорожного движения в размере 137 долларов, слил его полиции, когда он заплатил штраф 137 свиньями-оригами, сделанными из купюр номиналом в 1 доллар в паре коробок Dunkin ‘Donuts.
С телефоном в кармане рубашки для записи транзакции, человек, который использует это прозвище «Бэкон Мус» на YouTube, прибыл, чтобы внести в муниципальный суд оплату за билет, который, по его мнению, был несправедливым.
На видео не указывается имя мужчины, юрисдикция суда или время уплаты штрафа.
«Я получил этот билет в городке, где копы (и абсурдные камеры красных фонарей) – это в значительной степени денежная ловушка, и все. Я решил заплатить соответствующим образом – 137 бумажек оригами свинья по 1 доллар, вложенные в пару дюжин Данкина. «Коробки с пончиками», – написал он на YouTube.
В видео, которое на YouTube уже просмотрели более 180 000 раз, «Бэкон Мус» подходит к стойке, где офисный работник пытается принять оплату за билет, но обнаруживает, что он представлен в очень уникальной форме.Он отказывается принимать это, поскольку «Бэкон Мус» настаивает на том, что это законное платежное средство.
«Я понимаю это, но из-за того, что вы сложили, я не собираюсь сидеть здесь и раскрывать все это», – говорит сотрудник.
«Бэкон Мус» продолжал протестовать, настаивая на принятии его оплаты.
«Насколько это было бы иначе, если бы у меня в кармане были смятые купюры? Я предлагаю вам платить наличными прямо сейчас.
Я бы заплатил картой, но вы предлагаете 5-процентную комиссию за это», – сказал он.
Офицер-рабочий сбит с толку.
«Зачем тебе это делать? Времена тяжелые. Зачем тебе тратить время на то, чтобы все это сложить?» – спрашивает сотрудник.
В конце концов, клерк приводит к себе полицейского в форме, чтобы оценить ситуацию. Этот офицер весьма вежливо просит «Бэкон Мус» перейти к прилавку и развернуть банкноты.
“Бэкон Мус” наконец соглашается. Спустя несколько мгновений в клипе этот офицер внезапно доходит до того, на что он смотрит.
«Поросята в коробке для пончиков! он смеется.
В конце концов, подсчитывая банкноты, офицер начинает замечать юмор, особенно когда «Бэкон Мус» идентифицирует одну из свиней оригами как адмирала Акбакона, единственного выжившего в великой резне свиней в 2012 году.
«Я дам вам реквизит», – говорит клерк. «Ты рассмешил меня на весь день. Я дам тебе безумный реквизит, если ты не торопишься делать все до одного».
“Bacon Moose” добавил заголовок к клипу, отметив, что для подсчета денег потребовалось восемь минут, а на то, чтобы развернуть его, потребовалось всего три минуты.Он отмечает, что потерял счет через четыре часа того, сколько времени ему потребовалось, чтобы сложить все долларовые купюры. Он задокументировал этот процесс здесь.
Канада
Мексика
Общая информация
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Аргентина
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Бразилия
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Чили
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Колумбия
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Эквадор
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales@sherwin.
com.
Уругвай
Наши продукты доступны по всей Южной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Общая информация
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Коста-Рика
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Сальвадор
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales@sherwin.
com.
Гватемала
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Гондурас
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Мексика
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Никарагуа
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales@sherwin.
com.
Панама
Наши продукты доступны по всей Центральной Америке, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Общая информация
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Багамы
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Bermuda
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.
com.
Бонайре, Синт-Эстатиус и Саба
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Каймановы острова
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Доминиканская Республика
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Гаити
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Ямайка
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Пуэрто-Рико
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Сент-Китс и Невис
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Острова Теркс и Кайкос
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Виргинские острова (Британские)
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Другие островные страны Карибского бассейна
Наши продукты доступны по всему Карибскому региону, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Общая информация
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Китай
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Индонезия
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Япония
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Малайзия
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Сингапур
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Южная Корея
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Таиланд
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Вьетнам
Наши продукты доступны во всем Азиатско-Тихоокеанском регионе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Общая информация
Наши продукты доступны по всей Европе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Хорватия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Кипр
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Чешская Республика
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Дания
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales@sherwin.
com.
Danske
Danske
Английский
Danske
Финляндия
См. Наши продукты по всей Европе. свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Suomi
Suomi
English
Suomi
France
Наши местоположения доступны по всей Европе свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Германия
Наши продукты доступны по всей Европе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Венгрия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Италия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Литва
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Норвегия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Norsk
Norsk
Английский
Нюнорск
Польша
Наши продукты доступны по всей Европе или по всей Европе.
свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Polski
Polski
English
Polski
Portugal
Наши продукты доступны по всей Европе. свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Румыния
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Россия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Сербия
Наши продукты доступны по всей Европе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Словакия
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Словения
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Испания
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Швеция
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Украина
Наши продукты доступны по всей Европе, см.
Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу globalsales @ sherwin.com.
Великобритания
Наши продукты доступны по всей Европе, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Ближний Восток
Наши продукты доступны по всему Ближнему Востоку, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
Австралия
Наши продукты доступны по всей Австралии, см. Адреса ниже или свяжитесь с нами по адресу [email protected].
сгенерировано: четверг, 06 января, 03:28:26 UTC 2022 г.
Хост: tsapp-5c5db4cf9f-274ql
Порт сервера: 443
Локальный порт: 5443
Экземпляр: server1
Создание этой страницы заняло 0 миллисекунд.
ДНК-нанотехнологии – мощный и многообещающий инструмент для разработки наноразмерных устройств для многочисленных и разнообразных приложений. Одна из самых больших потенциальных областей применения нанотехнологии ДНК – это биомедицина, в частности биосенсор. Благодаря контролю над их размером, формой и производством, ДНК-оригами предоставляет уникальную возможность собирать динамические и сложные устройства с точными и предсказуемыми структурными характеристиками.В сочетании с адресуемостью и гибкостью химии для функционализации ДНК, ДНК-оригами позволяет точно проектировать датчики, способные обнаруживать широкий спектр различных целей, включая РНК, ДНК, белки, небольшие молекулы или изменения физико-химических параметров, которые могут служить диагностическими инструментами. Здесь мы рассмотрим некоторые недавние важные разработки сенсоров на основе ДНК-оригами, основанные на методах оптического обнаружения (считывания) с особым упором на чувствительность, селективность и время отклика.
Мы также обсуждаем проблемы, которые все еще необходимо решить, прежде чем этот подход может быть преобразован в надежные диагностические устройства для биомедицинских приложений.
Ключевые слова: ДНК-нанотехнологии, ДНК-оригами, биосенсоры, оптика (плазмонное и флуоресцентное зондирование)
Нанотехнология позволяет применять новые материалы и устройства на наноразмерном уровне во всех дисциплинах науки. Одним из новых материалов для наноразмерной инженерии является ДНК [1].Некоторые из основных характеристик ДНК – высокая специфичность, программируемость, гибкость и субнанометровая точность. Эти характеристики позволяют использовать ДНК для создания высокоточных наноструктур, как впервые было продемонстрировано Симаном в его новаторских исследованиях в начале 1980-х годов [2]. Самосборка наноструктур ДНК началась с кроссоверов и разветвленных соединений [3], за которыми последовали различные объекты ДНК, такие как полиэдрические [4], призмы [5] и бакиболлы [4].
Впоследствии самосборка ДНК получила дальнейшее развитие в усовершенствованном дизайне с использованием плиток кроссовера ДНК [6].С помощью этой стратегии к ДНК добавляются липкие концы для создания двумерных (2D) [7] и трехмерных (3D) [8,9] периодических решеток. Еще одна более продвинутая стратегия одноцепочечных плиток ДНК для построения на основе ДНК – это блоки ДНК, которые формируют большие структуры ДНК в 2D и 3D [10]. Все упомянутые выше самосборки основаны на комбинации «коротких» одноцепочечных ДНК или предварительно собранных мотивов ДНК. Структуры, собранные с помощью этих методов, могут использоваться в качестве программируемых каркасов для организации различных наночастиц или молекул [11], но все же ограничены размером и сложностью.В 2006 году Ротемунд представил метод ДНК-оригами [12]. Этот метод позволил повысить сложность и создать более крупные наноструктуры (в диапазоне сотен нм) [13,14]. Этот метод состоит из длинного каркаса одноцепочечной ДНК (обычно из генома бактериофага M13, содержащего примерно от семи до восьми тысяч нуклеотидов), который складывается в желаемую форму с помощью набора из сотен коротких дополнительных цепей ( длиной примерно 40 нуклеотидов).
Одним из преимуществ метода ДНК-оригами по сравнению с другими стратегиями сборки является простота использования цепи каркаса и складывания ее в любую заранее разработанную форму, а также отсутствие необходимости в стехиометрической смеси компонентных цепей [15]. Каркас имеет хорошо известную нуклеотидную последовательность, в то время как комплементарные азотистые основания скоб тщательно выбираются в зависимости от желаемого дизайна структуры ДНК-оригами. После гибридизации каркаса с нитями штапеля каждый нуклеотид каждого штапеля ДНК затем “займет нужное место” путем гибридизации с комплементарной последовательностью на каркасе.Следовательно, «сворачивание» каркаса в заданную конкретную форму происходит в растворе в условиях температуры и концентрации соли, обеспечивающих полный отжиг всех нитей (). Этот метод позволяет проектировать самые разнообразные, сложные, многофункциональные, 2D и 3D структуры [16,17,18,19,20,21,22,23,24].
Принцип сборки ДНК оригами. Метод ДНК-оригами состоит из длинной однонитевой ДНК («каркас») и нескольких сотен коротких цепей оцДНК («скобы»).
В процессе отжига «скобы» складывают «каркас» в 2D или 3D структуры.
Тот факт, что вся последовательность известна, вместе со способностью прикреплять функциональные молекулы к одиночным цепям в структурах ДНК-оригами с высокой точностью и аккуратностью, делает ДНК-оригами высокоадресным инструментом с предсказуемыми конформационными структурами [25]. Кроме того, структуры ДНК-оригами – это природные биополимеры, которые являются биосовместимыми, биоразлагаемыми и минимально токсичными [26]. Таким образом, этот подход имеет большой потенциал в биомедицинских приложениях [26,27].Кроме того, было показано, что структуры ДНК-оригами более стабильны, чем другие структуры нуклеиновых кислот, что облегчает их использование в биологических и технических приложениях [28]. Кроме того, развитие ДНК-оригами позволило разработать «динамические» структуры, функции которых зависят от конформационных изменений, вызванных внешними стимулами, внешними полями или реакциями смещения цепи [29]. Затем конформационные изменения могут быть использованы для генерации измеримых сигналов, чтобы «почувствовать» исходный стимул [29,30].
Динамические структуры могут использоваться в различных приложениях [31,32,33,34], в частности, для биомолекулярного зондирования. Например, динамическая структура может быть спроектирована так, чтобы открываться и закрываться при входе в определенную среду или при обнаружении определенной цели. Конформационные изменения, вызванные связыванием мишени, могут быть обнаружены с использованием различных методов, таких как оптические и электрохимические [22,24], которые используют преимущества точного позиционирования для усиления сигнала, трансдукции или реализации логических операций.В этом случае функционализация структур ДНК-оригами может быть выполнена с помощью излучателей высокой фотостабильности флуоресценции, таких как квантовые точки, металлические наночастицы (НЧ) и / или флуорофоры. Например, создание плазмонных сенсоров, которые усиливают флуоресцентное излучение [35] и рамановское рассеяние [36], возможно, когда плазмонные НЧ включены в структуры ДНК-оригами. Такие структуры могут состоять из гетерогенного выбора НЧ, например, НЧ серебра, зажатого между двумя НЧ золота [37], или наночастицы ядро-оболочка, состоящей из золотого ядра и серебряной оболочки [38].
Создание датчиков флуоресценции достигается, когда один или несколько флуорофоров (флуоресцентных молекул) функционализируются в структуре для создания сигнала флуоресценции. Подводя итог, можно сказать, что сенсоры на основе плазмонных и флуоресцентных ДНК-оригами являются многообещающими кандидатами для исследования одиночных молекул из-за их предсказуемых структур конформации, их совместимости с биологической средой и их высокой чувствительности обнаружения с огромным потенциалом для трансляции, в частности, для биологических исследований. -медицинские приложения [21].
Внедрение новых концепций зондирования может потенциально улучшить стандартные подходы к биомолекулярному зондированию, такие как полимеразная цепная реакция, нозерн-блоттинг, секвенирование следующего поколения или иммуноферментный анализ (ELISA) [39, 40]. Несмотря на огромный аналитический прогресс, эти методы имеют определенные ограничения [41].
Чаще всего они сложные, включают в себя несколько этапов и требуют много времени.Следовательно, существует постоянная потребность в улучшении и разработке более эффективных инструментов. Технология на основе ДНК-оригами может произвести революцию в разработке нового поколения высокоспецифичных, быстрых, высокопроизводительных аналитических устройств с чувствительностью к одной молекуле для биомедицинских приложений [21,42,43].
Датчики ДНК-оригами объединяют в себе два основных элемента: (1) блок распознавания, который отвечает за обнаружение интересующей цели, и (2) блок преобразователя, который отвечает за преобразование молекулярного взаимодействия между датчиком и анализируемого вещества в измеримый физический сигнал [41].Например: оптические, электрохимические, тепловые, электрические, механические, поверхностные акустические волны или ионно-чувствительные механизмы могут использоваться для преобразования молекулярного взаимодействия в физический измеримый сигнал [44,45]. Они способны обнаруживать различные аналиты, такие как белки [22], небольшие молекулы [46], изменения pH [47], концентрации ионов [48] и температуры [49].
Эти взаимодействия могут быть переведены в оптические сигналы с помощью плазмонного или флуоресцентного возбуждения [50,51]. Оптические датчики ДНК-оригами превращаются в чувствительные, быстрые, точные, гибкие инструменты для определения нескольких целей с низким пределом обнаружения (LOD) [18,19,21,52,53,54,55].Они используются в биологии, мониторинге окружающей среды и в индустрии безопасности пищевых продуктов и имеют большой потенциал для применения в биомедицине для обнаружения и мониторинга заболеваний и патогенов [56].
Этот обзор посвящен недавнему прогрессу в применении плазмонных и флуоресцентных датчиков ДНК-оригами для биомолекулярного зондирования с акцентом на их селективность, предел обнаружения и время отклика. В заключение мы рассмотрим перспективы, в которых будут обсуждены проблемы и возможные будущие разработки.
Флуоресценция – это процесс, который может происходить в молекуле, предварительно возбужденной, например, падающим светом.
Электрон в основном состоянии (S 0 ) может быть переведен падающим фотоном в колебательное состояние S 1 , первое электронное возбужденное состояние молекулы. Электрон сначала быстро распадается (обычно в пикосекундном диапазоне) до низшего колебательного состояния S 1 .Этот распад называется внутренним преобразованием. После внутреннего преобразования электрон релаксирует с 1 на 0 . Один из возможных путей релаксации называется флуоресценцией, при которой испускается фотон. Этот испускаемый фотон имеет меньшую энергию (большую длину волны), чем возбуждающий фотон, из-за энергии, затрачиваемой на внутреннее преобразование. Типичное время жизни флуоресценции находится в наносекундном диапазоне и соответствует среднему времени, в течение которого электрон остается в возбужденном состоянии S 1 , прежде чем вернуться в S 0 .Помимо времени жизни, квантовый выход является важным параметром для характеристики фотофизических свойств сенсорной системы на основе флуоресценции.
Квантовый выход соответствует соотношению между количеством излучаемых фотонов и количеством фотонов, поглощенных молекулой [57,58].
Флуорофоры, такие как Cyanine, Alexa, Fluorescein или Atto, представляют собой флуоресцентные молекулы (или красители), которые могут быть включены в ДНК-оригами-структуры для формирования сенсоров двумя разными способами [57]. Первый метод включает ковалентно связанные комплексы, в которых флуорофоры ковалентно прикреплены к поверхностям структур ДНК-оригами посредством основных цепей или коротких олигомеров [59] с высокой точностью [59,60] и без изменения структуры ДНК [61].Однако этот метод стоит дорого [59]. Второй метод основан на нековалентном связывании красителя с комплексом ДНК: посредством электростатического взаимодействия (внутри внешней двойной спирали ДНК) [62], путем связывания с малой или большой бороздкой ДНК и путем интеркаляции (между пары оснований) [59,63,64]. Последний позволяет легко и быстро [65] включать при меньших затратах по сравнению с ковалентно связанными комплексами.
С другой стороны, интеркаляция красителей между базовыми парами вызывает искажения в структуре комплекса ДНК [66], они не могут связываться специфически [59,66,67], и во многих случаях этот подход показывает снижение эффективности и селективности для зондирование [66].Напротив, взаимодействие флуорофоров с бороздками ДНК вызывает меньшие искажения в структурах ДНК по сравнению с интеркаляторами [66]. Доступны флуорофоры для разных длин волн во всем видимом спектральном диапазоне как для поглощения, так и для излучения. Это свойство позволяет создавать сенсоры с определенным флуорофором или их комбинацией для достижения определенного профиля излучения для обнаружения одной или нескольких молекул-мишеней [57,68]. Как правило, датчики на основе флуоресценции ДНК-оригами привели к развитию трех различных методов биомолекулярного зондирования: (1) прямое излучение флуоресценции (включение), (2) флуоресценция (Фёрстера), резонансная передача энергии (FRET) и (3) ) тушение (выключение) флуоресценции.
Как сообщает Domljanovic et al. [69], структуры ДНК-оригами, в которые нековалентно включены красители, были изучены для обнаружения антител к ДНК (A). В этом методе использовался тот факт, что количество красителей (Eva Green), взаимодействующих с ДНК, изменяется, когда антитела связываются с комплексом ДНК-краситель. Этот принцип позволил специфическое распознавание антител к ДНК при системной красной волчанке (СКВ), аутоиммунном заболевании, характеризующемся выработкой антител против геномной ДНК.Результаты показали, что специфичность иммунофлуоресцентного анализа комплекса ДНК-оригами-краситель сопоставима с иммуноферментным анализом (ИФА) (81–93% и 80–94% соответственно), обычно используемым в диагностике СКВ. Однако LOD (чувствительность) в 10 раз выше, чем у ELISA. Кроме того, необходимое количество сыворотки невелико (2 мкл), а время анализа короче (1,5 ч) по сравнению с ELISA (обычно 100 мкл и 6,5 ч соответственно).
Иллюстрации флуоресцентного зондирования с помощью структур ДНК-оригами.
( A ) Схематическое изображение структур ДНК-оригами (светло-серый) и принцип работы Domljanovic et al. [69]. Структура яркая в начальной точке. В процессе обнаружения флуорофоры заменяются мишенью, что приводит к снижению интенсивности структуры. ( B ) Схематическое изображение металлической микрочастицы (серая сфера), покрытая структурами ДНК-оригами (голубой). На вставке показан принцип сигнализации при обнаружении цели [54].Синие спирали – это аптамеры, с которыми может связываться цель. Красный конус представляет собой антитело, которое несет ди-β-D-галактопиранозид флуоресцеина, а зеленый конус представляет собой антитела, несущие фермент.
В 2019 году Deams et al. [54] представили рентабельный и чувствительный иммуноферментный анализ с гибридным аптамером, связанный с ферментом, для обнаружения арахисового антигена Ara h2. Магнитные микрочастицы были покрыты двумерными структурами ДНК-оригами, каждая из которых функционализирована аптамерами для специфического связывания по крайней мере одной молекулы белка Ara h2.
Структуры ДНК-оригами позволяют контролировать поверхностную плотность аптамеров и оптимизировать доступность и эффективность захвата мишеней. Они также уменьшают количество аптамеров, необходимых для достижения низкого LOD. В одноразовом растворе к покрытым микрочастицам добавляли арахисовый антиген, а затем – антитела против Ara h2, меченные красителем флуоресцеин ди-β-D-галактопиранозидом. Для обнаружения комплекса в раствор добавляли второе антитело, меченное ферментом, с целью отщепления флуоресцеинди-β-D-галактопиранозида при сохранении флуоресцеинового красителя (B).Затем магнитные микрочастицы в растворе загружаются в массив микролунок и захватываются с помощью магнита. Каждая микролунка может содержать одну микрочастицу. Восстановление флуоресценции регистрировали с помощью стандартной флуоресцентной микроскопии. По сравнению с микрочастицами, непосредственно покрытыми аптамером (232 фМ, 45 пг / мл), был измерен LOD на порядок ниже (18 фМ, 3,5 пг / мл) после времени реакции 3 часа 30 минут.
Зарегистрированные значения LOD для ELISA и анализа латерального потока составляли 12 нг / мл и 450 нг / мл соответственно [54].Эти результаты показали явное улучшение чувствительности при использовании структур ДНК-оригами. Многие подходы используют флуорофоры в иммуноанализах для повышения чувствительности анализа, необходимого для раннего выявления заболевания (то есть, когда болезнь все еще протекает бессимптомно). Недавняя статья Rutten et al. [43] сообщили о биоанализе для обнаружения тромбина всего за 25 минут, состоящего из структуры ДНК-оригами, меченной аптамером и флуорофором с LOD 2 ± 0,2 нМ. Chen et al. [70] разработали сенсор с использованием альтернативного метода ДНК-оригами, называемого нанолентами ДНК.Вместо добавления сотен основных цепей, используемых для формирования стандартных структур ДНК-оригами, они включали максимум три основных цепочки на один каркас, образованный амплификацией по катящемуся кругу. Затем флуорофоры карбоксифлуоресцеин (FAM) были включены в наноленты ДНК для определения внутриклеточного pH.
Результаты показали, что датчик имел желаемую чувствительность к pH в диапазоне от 4,0 до 8,0 в сбалансированном солевом растворе Хэнка. В эндосомах снижение pH с 6,4 до 5.6, измеряли в течение 30 мин. Авторы сообщили, что каждое измеренное изменение pH эндосомы соответствовало этапам ее созревания. Поскольку функция эндосом заключается в транспортировке материалов извне внутрь клетки, наноленты ДНК также могут использоваться для доставки миРНК в цитоплазму с целью подавления гена, например, в раковых клетках (грузоподъемность 45,7 мас.%).
В разделе описаны многочисленные достижения в области сенсоров ДНК-оригами на основе флуоресценции. В целом, они могут достигать предела обнаружения в субнаномолярном диапазоне.Усиление флуоресцентного сигнала может позволить использовать более доступные и портативные детекторы, например, смартфоны [71,72]. Одна из стратегий усиления сигнала – включить множество флуорофоров в единую структуру ДНК-оригами. Компания Gattaquant разработала стандарты интенсивности флуоресценции, так называемые Gattabeads, основанные на этом подходе.
Вторая, альтернативная стратегия основана на локальном усилении электрического поля вблизи поверхности наночастиц благородных металлов [73]. Более подробное объяснение этой второй стратегии дается в разделе по поверхностно-усиленному комбинационному рассеянию.
Сводная таблица статей с использованием структур ДНК-оригами (ДНК-ОС) с прямым считыванием флуоресцентного излучения. Звездочка (*) перед надписью «Процедура передачи сигналов» означает считывание флуоресценции одной молекулы (способность определять флуоресценцию от единой структуры оригами ДНК). Еще одно сокращение: Фон (BG).
| Процедура передачи сигналов | Аналит | Чувствительность | Время отклика | Публикация Год | Ссылка |
|---|---|---|---|---|---|
| * Усиление флуоресценции | M 2 932 916 MCl с одним красителем | M 2 BG флуорофоры | Второй диапазон | 2015 | [73] |
| Изменение pH (pH-чувствительные красители) | Межклеточный pH | Высокая чувствительность для pH от 4 до 8 | 30 мин (изменение pH 6. 4–5,6) | 2015 | [70] |
| Обмен красителя с мишенью | Антитела (системная красная волчанка) | В 10 раз выше (чем ELISA) | 1,5 часа | 2017 | [ |
| Обмен красителя с мишенью | Антитела (системная красная волчанка) | 7% ложноположительных результатов (ниже, чем ELISA) | 1,5 часа | 2018 | [62] |
| расщепляющий фермент Ara h2 | 232 фМ (Аптамер) 18 фМ (Аптамер + ДНК-ОС) | 3 ч 30 мин | 2019 | [54] | |
| Связывание аптамера + красители для мечения | Тромбин 2 ± 0556 . 2 нМ (аптамер + ДНК-OS) 22 ± 3 нМ (аптамер) | 25 мин (запись флуоресценции) | 2020 | [43] | |
| * Усиление флуоресценции | оцДНК (Oxa-48) | 2 нМ | 2 ч (инкубация) | 2020 | [72] |
Сенсоры на основе ДНК-оригами могут использовать флуоресцентный (Ферстер) резонансный перенос энергии (FRET) в качестве метода измерения.
Этот метод также можно использовать для изучения молекулярных взаимодействий, конформационных изменений (открытые-закрытые структуры), обнаружения одиночных молекул [57,68,74] или в качестве спектроскопических линейок [75]. FRET возникает между двумя флуорофорами, при этом один действует как донор, а другой – как акцептор. Это безызлучательный процесс, вызванный диполь-дипольным взаимодействием между двумя красителями [57]. Другими словами, когда два красителя находятся в непосредственной близости (обычно менее 10 нм), возбужденный донор может передавать энергию акцептору в основном состоянии и возбуждать его.Как только акцептор возбужден, его электрон может релаксировать из возбужденного состояния в основное, что приводит к испусканию флуоресценции [76,77,78]. Ключевыми параметрами для достижения FRET являются спектральное перекрытие между излучением донора и поглощением акцептора, а также оптимальное расстояние между флуорофорами. Эффективность FRET пропорциональна обратной шестой степени расстояния донор-акцептор и обычно охватывает диапазон 2–10 нм [78].
Эффективность также зависит от относительной ориентации пары доноров и акцепторов.Однако стоит отметить, что флуорофоры не могут быть детерминированно ориентированы в структурах ДНК-оригами, но могут свободно вращаться или фиксироваться в неконтролируемой ориентации в зависимости, среди прочего, от заряда флуорофоров.
Поскольку флуорофоры могут быть точно расположены на структуре ДНК-оригами, возможна сборка нескольких красителей, демонстрирующих FRET. Точное позиционирование многих флуорофоров было использовано для изучения каскадов мульти-красителей FRET и гомо-FRET [76,79]. Линейные решетки FRET получили дальнейшее развитие для формирования комплексов обнаружения нескольких целей [78].С развитием более сложных и динамичных структур, основанных на ДНК-оригами, реализуются новые стратегии восприятия, включая сбор света и усиление сигнала [80]. Об одном из первых разработанных, сконструированных и охарактеризованных сенсоров ДНК-оригами на основе FRET было сообщено Andersen et al.
[18] в 2009 году. Они разработали коробку для трехмерного оригами из ДНК, состоящую из шести листов оригами и управляемой крышки, работающей с системой двойного замка и ключа, состоящей из дуплексов ДНК (A). Дуплексы ДНК обеспечивают «опору» для вытеснения добавленными извне олигонуклеотидами, называемыми «ключами».Смещение цепи, опосредованное пальцами ног (TMSD), основано на смещении одной цепи ДНК или РНК, ранее связанной с частично комплементарной цепью субстрата, с помощью растворимого, полностью комплементарного олигонуклеотида ДНК или РНК, что является фундаментальным принципом нанотехнологии нуклеиновых кислот [81 ]. Чтобы обнаружить открытие крышки коробки, два флуоресцентных красителя, Cy3 и Cy5 (действующие как донор и акцептор, соответственно), были включены в противоположные поверхности коробки. Добавление «ключей» открыло коробку, тем самым изменив FRET (из-за изменения расстояния между флуорофорами) и сделав взаимодействие измеримым (C).В целом, они подтвердили структуру ДНК-оригами, которая может определять концентрацию мишеней 200 мкМ в течение ~ 40 секунд после их добавления.
В то же время коробка может хранить груз и высвобождать его при открытии. Другой пример коробки ДНК-оригами с возможностью выполнения как минимум трех циклов полного открытия и закрытия был описан Zadegan et al. [24]. Первое открытие коробки с ключами 0,4 мкМ было эффективным в течение нескольких минут, а повторное открытие заняло 4 часа. Эта работа продемонстрировала возможность обнаружения двух видов рака молочной железы: miRNAs, miRNA223 [82] и miRNA30c [83].Кроме того, работа, проделанная Grossi et al. [84] улучшили хранение, селективность, специфичность и время отклика коробки ДНК-оригами, называемой ДНК нановалютой (DV). Механизм открытия и закрытия структуры ДНК-оригами был разработан так, чтобы он повторялся несколько раз, а время отклика измерялось в минутах. Еще один достойный упоминания пример – Ijäs et al. [85] они сообщили о нанокапсуле ДНК-оригами с высокой чувствительностью к pH, чрезвычайно быстрым открытием (30 с), а также о возможной конструкции интеллектуальной системы на основе ДНК-оригами, которая реагирует на стимул в живых организмах.-800x600.jpg)
Иллюстрации для измерения флуоресценции (Фёрстера) с резонансным переносом энергии (FRET) с помощью структур ДНК-оригами. ( A ) Представление сенсорного принципа коробки ДНК оригами [18]. В начальной точке конструкция закрывается (возникает FRET). Добавление ключа (цели) открывает структуру и вызывает конформационное изменение. ( B ) Представление сигнала FRET замкнутой структуры ДНК-оригами (происходит FRET) [90]. При наличии в растворе катионов структура раскрывается (FRET не может возникнуть).( C ) Представление спектров излучения FRET закрытой структуры (возникает FRET: красный спектр) и открытой структуры (FRET не может возникать: зеленый спектр).
Чтобы обнаружить белки вместо miRNA, блок ДНК-оригами был модифицирован для включения аптамеров [86,87]. Результаты показали, что устройства ДНК-оригами могут обнаруживать до 100 нМ белка со временем отклика около 20 минут. Смещение цепи мишенью [88], связанное с силой, присутствующей в дуплексах ДНК со стопкой оснований [89], является наиболее распространенным способом активации открытия комплекса ДНК-оригами.
Однако эти методы ограничены диапазоном концентраций нМ, а время отклика находится в диапазоне минут или дольше. Впоследствии сообщалось о структурах ДНК-оригами со временем отклика в несколько секунд или меньше. Маррас и др. [90] использовали гибридизацию ДНК с последовательностью специфичности для изменения конфигурации структуры в ответ на стимулы окружающей среды (B). Структура была разработана с короткими липкими концами оцДНК, которые могут быстро гибридизоваться или дегибридизировать в ответ на изменения концентрации катионов в растворе, что приводит к конформационному изменению структуры.Одна пара флуорофоров FRET была включена в комплекс для обнаружения открытия и закрытия структур [90]. Конформационные изменения в структуре ДНК могут быть вызваны различными типами ионов, включая одно-, двух- и трехвалентные катионы. Измерения FRET одной молекулы показали, что закрытие и открытие может происходить в пределах миллисекунд (≤ 200 мс) и может повторяться в течение одной секунды. Таким образом, быстрый контроль конформации ДНК-оригами с помощью различных ионов [48,91] расширил диапазон активирующих механизмов и показал силу комплексов ДНК-оригами в восприятии сигналов окружающей среды.
Изменение pH растворов использовалось в качестве триггера для сенсорных целей. В этом случае было использовано включение пары pH-чувствительных красителей, которые демонстрируют FRET, в структуру ДНК-оригами (ратиометрические наносенсоры pH). Принцип чувствительности, лежащий в основе этих наносенсоров, заключается в изменении интенсивности флуоресценции путем изменения pH раствора [80]. Повышение pH с 6 до 8 привело к уменьшению времени жизни донорной флуоресценции, которое можно было обнаружить всего за 5,71 нс. Эта работа показала, что помимо быстрой активации, расположение красителей в определенных положениях внутри данной структуры и их количество являются важными параметрами, влияющими на чувствительность комплекса [55,80].Затем внешние стимулы могут быстро вызвать реакцию ДНК-оригами. Например, приложенный электрический потенциал (напряжение выше 200 мВ) может быть преобразован в оптические сигналы на уровне одной молекулы всего за несколько секунд [92]. Еще один пример разработки быстрых, селективных и чувствительных сенсоров был описан Selnihhin et al.
[21]. Они разработали структуру, подобную «книге», в которой флуорофоры-доноры были размещены с одной стороны, а флуорофоры-акцепторы – с другой стороны.Таким образом, в закрытом состоянии флуорофоры находились достаточно близко, чтобы позволить FRET. Добавление полностью комплементарных ключей ДНК привело к открытию датчика и уменьшению сигнала FRET. Структура может обнаруживать последовательности-мишени до концентраций 10 пМ со временем обнаружения 2 мин. Помимо высокой чувствительности, селективности и быстрого времени обнаружения, эта работа демонстрирует возможность создания мультиплексных датчиков для обнаружения нескольких целей на основе различных профилей излучения красителя.Короче говоря, появляющиеся различные возможности быстрых запускающих механизмов структур на основе FRET ДНК-оригами () и возможность восприятия на уровне одной молекулы [92,93] открывают ранее неожиданные возможности использования ДНК-оригами в качестве сенсора. наноустройство.
Сводная таблица подходов с использованием структур ДНК-оригами со считыванием FRET.
Звездочка (*) перед надписью «Процедура передачи сигналов» означает считывание флуоресценции одной молекулы (способность определять флуоресценцию от единой структуры оригами ДНК).Сокращения: открытое и закрытое состояния (O / C), доказательство принципа (POP), лактатдегидрогеназа Plasmodium falciparum (PfLDH), наносклад ДНК (DV), время, необходимое для достижения 50% FRET (t1 / 2), аденозинтрифосфат (АТФ).
| Процедура передачи сигналов | Аналит | Чувствительность | Время отклика | Год публикации | Ссылка |
|---|---|---|---|---|---|
| O / C (смещение нити) | DNA (смещение цепи) | 200PNA (ключ) | 40 с | 2009 | [18] |
| * Перемещение с помощью ферментов | оцДНК + Zn 2+ | 1: 1 (комплекс молярного отношения: оцДНК) 1 мМ (948 2+ ) | 3 нм / мин (50 стадий расщепления) | 2010 | [91] |
| O / C (смещение цепи) | оцДНК | 0. 4 мкМ (10-кратный молярный избыток) | Мин. Диапазон (1-е открытие) 4 ч (2-е повторное открытие) | 2012 | [24] |
| * Изменение конформации | MgCl 2 , Температура (POP) | 5–25 мМ (диапазон концентраций MgCl 2 ) от 11 до 47 ° C (во время O / C) | – | 2015 | [48] |
| Изменение теломерной ДНК в гуаниновые квадруплексы | Na + , K + | 1 мМ K + , 25 мМ NaCl | – | 2016 | [55] |
| Изменение конформации (смещение цепи + сила сцепления) | ssDNA ) | – | – | 2016 | [89] |
| O / C (смещение цепи) | оцДНК (POP) | 1: 1. 3 молярный избыток (DV + закрывающая блокировка) молярный избыток 1: 1,5 (DV + открывающая блокировка) | 15 мин | 2017 | [84] |
| O / C (разделенный аптамер) | ATP | 0,10 –1,00 мМ (Диапазон чувствительности) | 15–25 мин (Наблюдение за флуоресценцией) | 2017 | [86] |
| * Взаимодействие с окружающей средой | Сила истощения | ~ 100 фН (Разрешение) | Диапазон мс (не указан) | 2017 | [93] |
| * Изменение электрического потенциала | Изменение оптического напряжения | 200 мВ (Минимум до определения чувствительности) | ∼50 с | 2018 | [92] |
| * O / C (смещение цепи) | оцДНК | 10–100 пМ | 100 с (эффективность с t1 / 2) | 2018 | [21] |
| * O / C в зависимости от окружающей среды изменить | Катион | ∼200–10 00 мМ (одновалентные ионы) ∼5–40 мМ (двухвалентные ионы) ∼0.  06–0,14 мМ (трехвалентные ионы) | ≤ 200 мс (O / C переходы) | 2018 | [90] |
| Изменение конформации (смещение цепи) | оцДНК | POP | POP | [88] | |
| O / C (аптамер) | PfLDH (белок) | 100 нМ | 0–20 мин | 2018 | [87] |
| Изменение pH (pH-чувствительные красители) | pH | 6–8 (диапазон чувствительности pH) | – | 2018 | [80] |
| O / C (pH-защелки) | pH | 0. 5 pH | 30 с (открытие) Часы (закрытие) | 2019 | [85] |
В то время как некоторые датчики используют определенные профили излучения флуорофоров для обнаружения интересующей молекулы, другие используют уменьшение общей интенсивности их флуоресценции (выключение), процесс, известный как гашение. Тушение может быть вызвано множеством различных процессов. Тушение может быть статическим, динамическим или сочетанием того и другого. Статическое тушение происходит из-за образования комплекса в основном состоянии между парой флуорофора и тушителя.В том случае, когда комплекс поглощает фотон, он немедленно возвращается в основное состояние без испускания флуоресценции [94,95]. Основными характеристиками статического тушения являются изменения в спектрах поглощения флуорофоров и отсутствие изменений их времени жизни флуоресценции (поскольку наблюдаемое время жизни исходит от флуорофоров, которые не образуют комплекса с тушителем (т.
е. свободных флуорофоров) [57]. В случае динамического тушения, также называемого столкновительным тушением, процесс тушения происходит только тогда, когда флуорофоры находятся в возбужденном состоянии (т.е.е. флуорофоры поглотили падающие фотоны) [57,94,95]. В этом случае время жизни уменьшается, поскольку дополнительная скорость гашения вызывает депопуляцию возбужденного состояния [95,96]. Динамическое тушение обеспечивает более быстрое и обратимое обнаружение, чем статическое тушение [90]. Несмотря на это, датчики на основе ДНК-оригами могут использовать динамические, статические или статические гасители с обоими свойствами. Чтобы узнать, какой тип тушения является преобладающим, необходимо измерить спектр и время жизни пар краситель-тушитель [57,95].В целом, сочетание ДНК-оригами с тушением в качестве метода обнаружения открывает возможность мультиплексирования. Точное расположение флуорофоров и гасителей внутри структуры дает возможность создавать штрих-коды целей, выбирая уникальные флуорофоры для получения определенных профилей излучения, которые могут позволить обнаруживать несколько различных целей.
Ke et al. [97] сообщили о наноактуаторе ДНК-оригами, состоящем из четырех балок ДНК-оригами, соединенных в ромбовидную форму посредством гибких соединений оцДНК.Механизмом изменения конформации можно управлять двумя разными способами, добавляя дополнительные нити. Первый способ называется «блокировкой стойки» и состоит из двух жестких двойных спиралей ДНК, соединяющей стойки. Второй называется «угловой фиксацией» и использует только нити ДНК. В присутствии цепей с блокировкой углов наноактуатор ДНК-оригами переключался из закрытого состояния в открытое, что приводило к изменению сигнала флуоресценции пары флуорофор-гаситель 6-FAM / BHQ-1.Этот механизм реагировал на более широкий спектр триггеров для его открытия. Первым продемонстрированным триггером механизма открытия была смена буферного раствора в присутствии 100 мМ KCl. Вторым проверенным триггером была эндонуклеазная ферментативная активность (т.е. 5 единиц рестрикционного фермента BamHI) в 100 мл 20 нМ закрытой конформационной структуры ДНК в течение 10-минутной инкубации.
Третьим испытанным триггером были олигонуклеотиды: 100 нМ ДНК-наноактуатор инкубировали в течение 2 часов с miR-210 в количестве 15 эквивалентов.Кроме того, авторы перепрофилировали и модернизировали структуру, добавив дополнительные нити, названные «блокировкой распорки», тем самым создав механизм аллостерической активации. Структура наноактуатора могла очень точно изменять свою форму, просто регулируя длину соединительных распорок. Изменение расстояния, вызванное в одной части конструкции, будет отражаться в другой части посредством крупномасштабных перемещений. Специфичность и чувствительность этого устройства были доведены до уровня одной молекулы для отслеживания слабых взаимодействий.Эта работа показала возможность многоцелевого использования отдельных устройств в качестве платформы для изучения изменения мобильности [98] и в качестве платформы для обнаружения различных мишеней на уровне одной молекулы. Дальнейшие улучшения могут заключаться в увеличении чувствительности и времени обнаружения комплекса.
Точная диагностика таких заболеваний, как рак, необходима для раннего выявления и эффективного лечения и мониторинга пациентов [99]. Стандартные подходы к биомолекулярному зондированию все еще нуждаются в улучшении, особенно в плане их надежности и воспроизводимости.Недавно для молекулярной диагностики был внедрен метод разветвленной ДНК [100]. Этот метод усиливает сигнал за счет каскада реакций гибридизации. В 2017 году Ochmann et al. [101] сообщили о возможном диагностическом подходе, основанном на методе прямого физического усиления флуоресценции. Этот подход включал создание комплексов ДНК-оригами с заколками для гашения флуоресценции и плазмонных наночастиц, которые действовали как так называемые оптические наноантенны [102,103]. В этом исследовании комплекс ДНК-оригами состоял из пар тушитель красителя (краситель ATTO 647N и гаситель 650 BlackBerry) в непосредственной близости, когда шпилька была закрыта, что приводило к снижению сигнала флуоресценции (A).В присутствии комплементарной олигонуклеотидной мишени шпилька раскрывается, и интенсивность флуоресценции увеличивается.
Они использовали эту платформу для обнаружения синтетической мишени, специфичной для вируса Зика (искусственная ДНК и РНК), в диапазоне концентраций 1 нМ в стандартном буфере и сыворотке крови человека после 18 ч инкубации. Эта концепция показала более сильное усиление сигнала на уровне одной молекулы, что может привести к улучшенным, высокочувствительным портативным биомолекулярным анализам.
Иллюстрации сенсинга путем закалки с ДНК оригами.( A ) Изображение столба ДНК оригами [101], в который встроена шпилька для гашения флуоресценции (FQH). После добавления мишени FQH открывался, что приводило к флуоресценции. Чтобы усилить флуоресценцию, исходящую от FQH, наночастицы были включены в ДНК оригами. ( B ) Изображение ДНК-ходока [107]. В начальной точке комплекс ДНК не излучает флуоресценции из-за присутствия гасителя. Процесс амплификации / эмиссии флуоресценции начинается со связывания мишени (стадия 1), за которым следует добавление фермента (стадия 2), который расщепляет дуплекс (цепь статора + мишень) в определенном положении, и, наконец, связывание цепи формирователя изображения, которая помещается в это положение (Шаг 3).
Другой подход к усилению сигнала основан на использовании линейного усилителя, такого как ДНК-ходок (B). Ходунки по ДНК имитируют естественные молекулярные моторы, работая по принципу броуновского движения и химической энергии [104]. ДНК-ходунки были значительно усовершенствованы в последнее время [105] благодаря усовершенствованию биофизических инструментов [104,106]. Включение молекулярных моторов в наноструктуру ДНК теперь возможно благодаря движущей силе, создаваемой дополнительным спариванием оснований из топливных олигонуклеотидов.Эти молекулярные моторы можно использовать в качестве строительных блоков в нанотехнологиях [91] или для усиленного обнаружения олигонуклеотидов [104]. Wang et al. [107] создали комплекс ДНК-ходунков с никелирующим ферментом [105,108] для усиления сигнала флуоресценции. В этой работе ДНК-ходунок запускает реакцию амплификации, проходя по прямоугольной структуре ДНК-оригами, тем самым высвобождая тушащие молекулы и освобождая пространство для меченных флуоресценцией цепей имидж-сканера (B).
Комплекс «ДНК-оригами» разработан с учетом чувствительности к одному нуклеотиду и может обнаруживать до трех несовпадений в последовательности.Также он может сделать от 20 до 60 шагов. Поскольку ходьба была основана на миграции, опосредованной опорой на пальцы, длине и эффективности связывания мишени, ее скорость ходьбы зависит от количества несовпадений. Тем не менее, результаты показали снижение интенсивности флуоресценции по сравнению с увеличением несовпадений внутри мишеней. Генерируемый сигнал значительно выше по сравнению с фоновым сигналом, что делает эти устройства на один шаг ближе к возможным применениям в биомедицинском биосенсоре.Другой метод, использующий закалку, представлен в статьях Kroener et al. [109,110]. Они создают структуры ДНК-оригами в форме стержней, которые можно ориентировать с помощью приложенного внешнего электрического поля. Основной принцип работы таков: структуры ДНК-оригами одним концом привязываются к электроду. Поскольку структуры ДНК-оригами заряжены отрицательно, угол, под которым эти структуры стоят, можно регулировать, изменяя заряд (знак и амплитуду) электрода.
Общее расстояние между свободным концом стержневидного ДНК-оригами и электродом отслеживают путем мечения свободного конца флуорофором и изучения зависимого от расстояния гашения флуоресценции, индуцированного электродом.Обзор некоторых методов подавления зондирования вместе со структурами ДНК-оригами резюмируется в.
Сводная таблица методов, использующих структуру ДНК-оригами с косвенным считыванием через тушение (выключение). Звездочка (*) перед надписью «Процедура передачи сигналов» означает считывание флуоресценции одной молекулы (способность определять флуоресценцию от единой структуры оригами ДНК). Сокращения: изменение открытого и закрытого состояний (O / C), подтверждение принципа (POP).
| Процедура сигнализации | Аналит | Чувствительность | Время отклика | Публикация Год | Ссылка |
|---|---|---|---|---|---|
| Гибридизация мишени | 1s6684 ssDNA 2055 2014 | [99] | |||
| O / C (изменение окружающей среды) | K + , miR-210 (miRNA) BamHI (фермент) | 100 мМ KCl 1 эквивалент miR-210 (эквиваленты к блокирующей нити) 5 единиц BamHI | 2 часа (miRNA) 10 минут (BamHI) | 2016 | [97] |
| * O / C (шпилька + оптическая антенна) | ssDNA | POP | POP | 2017 | [34] |
| * O / C (шпилька + оптическая антенна) | Зика ДНК / РНК | 1 нМ (РНК и ДНК) | 18 ч | 2017 | [101] |
| * Ферментативный момент комплекса (молекулярные двигатели) | оцДНК (с несовпадениями) | 0, 1, 2 или 3 несовпадения | 2 часа (нет несовпадений) + 4 часа (с несовпадениями) | 2017 | [107] |
4. Датчики на основе комбинационного рассеяния света с усиленной поверхностью По сравнению с флуоресцентными молекулами, наночастицы (НЧ) обладают более высокой стабильностью в физиологических условиях, поскольку они не проявляют фотообесцвечивания, мерцания и ограничений срока службы [111]. Вот почему их оптические свойства используются для зондирования. Более того, взаимодействие НЧ со светом сильно зависит от размера НЧ и материала, а также от частоты света, среди других параметров. Если NPs имеют размер намного меньше, чем длина волны падающего света, электрическое поле проникает в NP, что приводит к смещению свободных электронов NP, вызывая поляризацию NP.Эта поляризация, в свою очередь, приводит к возвращающей силе. Если падающий свет имеет частоту колебаний, которая соответствует собственной частоте НЧ, возникает сильное коллективное электронное колебание (известное как локализованные поверхностные плазмоны) [112,113]. Частота колебаний сильно зависит от размера, формы, типа материала металлических наночастиц и диэлектрической среды [112,113].
Для НЧ золота и серебра эти резонансы в основном расположены в видимой области оптического спектра.Приложения для зондирования, основанные на золотых и серебряных резонансах, могут извлечь выгоду из способности метода ДНК-оригами точно упорядочивать и выравнивать нанообъекты упорядоченным образом на наномасштабном уровне.
Одним из методов, обеспечивающих сверхчувствительное обнаружение с потенциалом охарактеризовать или обнаруживать структуры вплоть до уровня одной молекулы, является спектроскопия комбинационного рассеяния с усилением поверхности (SERS). SERS основан на процессе рассеяния фотонов, взаимодействующих с молекулами и / или атомами в непосредственной близости от металлических структур, например.g., шероховатые металлические поверхности или металлические наночастицы. Стандартный сигнал комбинационного рассеяния увеличивается на несколько порядков (например, от 10 6 до 10 7 для одиночного сферического Ag, Au NP) из-за эффекта усиления локального поля после плазмонного резонансного возбуждения металлической структуры (A, B ) [114].
Локальная концентрация поля, например, за счет изменения кривизны металлической структуры (от округлой формы до игольчатой) или специальной компоновки НЧ еще больше усилит этот эффект (A, B) [115].
( A ) Иллюстрация двух наночастиц (НЧ), которые связаны с шаблоном ДНК оригами. При освещении на подходящей длине волны в промежутке между НЧ формируется плазмонное «горячее пятно», которое можно использовать для усиления рамановских сигналов. На вставке показано ковалентное присоединение НЧ и флуорофора к комплексу ДНК-оригами. Функционализированные ДНК НЧ обычно полностью покрыты одиночными цепями по всей поверхности (для ясности рисунка эти связывающие цепи не представлены).( B ) Представление типичных спектров поверхностно-усиленной рамановской спектроскопии (SERS) (произвольные числа), где рамановский сигнал усилен.
Техника ДНК-оригами позволяет точно позиционировать металлические наночастицы. В частности, для приложений SERS цель состоит в том, чтобы достичь кратчайшего промежутка между наночастицами.
Об одном из первых примеров, основанных на этом подходе, сообщили Prinz et al. [36]. Они использовали две сферические наночастицы золота (AuNP), собранные на поверхности треугольной структуры ДНК-оригами, и рамановский сигнал, генерируемый определенным количеством флуорофоров TAMRA, чтобы оптимизировать размер частиц и зазор [36].Подобные фундаментальные исследования эффекта SERS с участием наноструктур ДНК-оригами были описаны Thacker et al. [116] и Kühler et al. [117]. Simoncelli et al. [53] сообщили о сложной платформе ДНК-оригами для SERS с красителями, расположенными точно в горячей точке димера NP. Путем термического сжатия структур ДНК-оригами (1-2 нм) можно было измерить различные зависимые от промежутков сигналы SERS (близкие к одномолекулярному уровню с установленным количеством одного или четырех флуорофоров Cy3 и C3.5) [53] .Помимо димерных структур со сферическими наночастицами, были исследованы другие геометрии наночастиц, такие как звезды [118] или треугольники [119] в сочетании со структурами ДНК-оригами.
Tanwar et al. [118] изучали сигнал SERS одного техасского красного красителя, помещенного в промежуток между двумя нанозвездами Au, тогда как Zhan et al. [119] показали результаты измерений SERS на уровне одной молекулы для молекул Cy5 и Cy3. По сравнению со стандартными измерениями в растворе, эти структуры увеличили сигнал SERS в 10 9 до 10 10 .Дальнейшее улучшение чувствительности обнаружения одиночных молекул SERS было достигнуто за счет включения дополнительного слоя модификации поверх плазмонной сборки [120] или слоя серебра (Ag), выращенного на димере AuNPs, помещенном на треугольную структуру оригами ДНК. [121]. Интенсивные горячие точки SERS были созданы с помощью рамановского усиления до 10 10 , что позволило детектировать одиночные молекулы Cy3 и TAMRA, размещенные в центре димера [121]. Кроме того, включение кремниевых нанопроволок SiNW продемонстрировало улучшение восприятия с субволновой пространственной точностью [122].В настоящее время разрабатывается несколько стратегий, демонстрирующих высокий потенциал для дальнейшего повышения чувствительности SERS, например, использование большего количества NP (от трех до четырех), различных схем NP [53, 120, 123, 124, 125] или анализа данных в сочетании со специальными алгоритмами, такими как обратный квант (Spectral-IQ) [126].
Подводя итог, можно сказать, что наноструктуры ДНК-оригами с металлическими наночастицами предоставляют новые возможности для быстрого чувствительного обнаружения на уровне отдельных молекул, а также контроля фотообесцвечивания, адресуемости наночастиц разного размера и усиления сигнала.Обзор разработки сенсоров SERS на основе ДНК-оригами можно найти в.
Сводная таблица статей на основе структур ДНК-оригами для спектроскопии комбинационного рассеяния света с усилением поверхности. Звездочка (*) перед надписью «Процедура передачи сигналов» означает считывание флуоресценции одной молекулы (способность определять флуоресценцию от единой структуры оригами ДНК).
| Процедура передачи сигналов | Analyte | Коэффициент усиления | Время отклика | Публикация Год | Ссылка | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Hotspot (два AuNP655 9055 – 9055 9055 9055 | A | [36] | |||||
| Горячая точка (два AuNP) | SYBR gold (25 красителей) | 1. 4 × 10 5 | – | 2014 | [117] | ||
| * Горячая точка (два AuNP) | Родамин 6G, оцДНК | 10 7 (10489 ssDNA) 567 (краситель) | (краситель) | ) | – | 2014 | [116] |
| Горячая точка (четыре AuNP) | аминобензолтиол (4-ABT) | 10 2 / наночастица | – | 2014 | |||
| * Точка доступа (два AuNP) | Один Cy3. 5 | 10 2 (для промежутка 1,4 нм по сравнению с 2,5 нм) | – | 2016 | [53] | ||
| * Точка доступа (два AuNP) | TAMRA и Cy3 | 10 10 | – | 2016 | [121] | ||
| Горячая точка (две AuNP + графен) | TAMRA | – | – | 2016 | [120] | ||
| Одиночный Техас красный | 2. 0 × 10 10 (зазор между частицами 7 нм) 8,0 × 10 9 (зазор между частицами 13 нм) | – | 2017 | [118] | |||
| Hotspot (золотые нанолинзы) | TAMRA | 1,4 × 10 6 | – | 2017 | [123] | ||
| * Горячая точка (две золотые нанопризмы) | Cy5 и Cy3 | 10 9 до 10 | 62018 | [119] | |||
| Горячая точка (серебряные нанолинзы) | Стрептавидин | 10 1 (синяя область, vs. золотые нанолинзы) 4,0 × 10 0 (при 532 нм по сравнению с золотыми нанолинзами) | – | 2018 | [125] | ||
| Одиночная кремниевая нанопроволока | Метиленовый синий | 1,1 × 10 5 | – | 2019 | [122] |
Другой метод спектроскопии в сочетании с нанотехнологией ДНК, привлекший внимание в последние годы, – это так называемая спектроскопия кругового дихроизма (КД).
CD дает подробную информацию о хиральности молекулярной структуры; хиральность происходит из-за отсутствия центра симметрии [127] или зеркальных плоскостей симметрии структуры [127,128]. Это приводит к различному поведению поглощения для левополяризованных или правополяризованных фотонов и, следовательно, к различным сигналам КД [19,127,129,130]. Для хиральных молекул или биомолекул этот сигнал обычно наиболее сильный в УФ-области оптических спектров, например, из-за чувствительности к белкам порядка 0.1 мг / мл [131]. При этом существенное повышение чувствительности КД-спектроскопии на несколько порядков может быть реализовано в сочетании с плазмонными наноструктурами ДНК [127,131]. Kneer et al. [132] сообщили об обнаружении конформации B-формы структуры ДНК-оригами в области горячих точек двух сферических НЧ. Эти структуры наноантенны (при 100 пМ) усиливали сигнал КД в 30 раз по сравнению с измерениями чистых структур ДНК-оригами (1 нМ). Кроме того, сигнал смещается из УФ в видимую область оптических спектров, соответствующих плазмонным резонансам наноструктур.
Другой подход в сочетании с плазмонно-усиленной КД-спектроскопией заключается в использовании ДНК-оригами в качестве матриц для сборки внутренних плазмонно-хиральных структур. Они могут быть спроектированы так, чтобы действовать как статические или динамические конструкции. Статические структуры ДНК-оригами обычно состоят из структуры ДНК-оригами, несущей небольшие AuNP, организованные в левую (LH) или правую (RH) спираль [129, 133]. До сих пор этот или аналогичные подходы в основном использовались для исследования хиральных структур [129, 133, 134]. Однако с точки зрения зондирования и качественного обнаружения мишеней более перспективными являются динамически действующие плазмонные наноструктуры ДНК.Были предложены различные динамические конструкции, включая тетраэдрическую метамолекулу [135], управляемую ДНК плазмонную спираль [136] или двухрукавную метамолекулу [19,20,52,137,138]. Тем не менее, насколько нам известно, для зондирования использовалась только двуручная метамолекула ().
Этот типичный сенсор КД на основе ДНК-оригами был изобретен Кузыком и соавт. [139]. Он состоит из двух плеч, на каждой из которых находится золотой наностержень, соединенных гибким шарниром. Путем вращения можно сформировать левую или правую хиральную структуру.Олигонуклеотиды ДНК на краях рукавов ДНК-оригами служат замками, распознавая конкретную мишень [139]. Эти двуплечие структуры могут обнаруживать две разные цели, каждая из которых фиксирует структуру в соответствующей хиральности. Более того, две клавиши повторного открытия, по одной для каждой цели, могут сбросить датчик. LOD находился в диапазоне ~ 70 нМ.
Иллюстрация механизма обнаружения кругового дихроизма (КД) на основе ДНК-оригами, изобретенного Кузыком и др. [139]. ( A ) Закрытая конструкция в левостороннем исполнении.( B ) Открытая конструкция. ( C ) Закрытая конструкция в правой конфигурации. Синие спирали – это замки, зеленые спирали – это блокирующие нити, красные спирали – это цели, а черная спираль между двумя листами ДНК-оригами представляет собой точку поворота.
Графики представляют собой наброски обычно получаемых сигналов CD.
Впоследствии этот подход был расширен на несколько различных физико-химических переменных или молекул, таких как pH [20], свет [140], тромбин [52], аденозин [137] или вирусная РНК [19].В частности, для РНК генома вируса гепатита C был получен LOD 100 пМ в буфере и 1 нМ целевой РНК в 10% сыворотке крови человека с временем ответа 30 мин для оптимального сигнала [19]. Подобные структуры, опубликованные другими, были использованы для создания устройств для обнаружения органических молекул. Чжоу и др. [138] создали обратимую динамическую структуру на основе ДНК-оригами, способную распознавать кокаин и аденозинтрифосфат в одном устройстве. Обратимость аденозин-кокаинового сенсора вызвана повышением температуры.Полученные результаты показали, что определение 1 мМ аденозина и кокаина может быть выполнено с LOD 50 мкМ (2 молекулы аденозина на замок) и 20 мкМ (1 молекула кокаина на замок), соответственно. Кроме того, Zhou et al.
показали, что длина сегмента гибридизации для аденозина важна для увеличения сигнала CD, открывая возможность для дальнейшего улучшения датчиков на основе кругового дихроизма. Краткий обзор сенсоров ДНК-оригами на основе компакт-дисков можно найти в.
Сводная таблица методов, основанных на структурах ДНК-оригами с использованием изменения сигнала кругового дихроизма (КД) в качестве считывания.Сокращения: левосторонние молекулы (LH), правосторонние молекулы (RH), аденозинтрифосфат (АТФ), доказательство принципа (POP), изменение конфигурации открытой и закрытой структуры (O / C).
| Процедура подачи сигналов | Analyte | Чувствительность | Время отклика | Год публикации | Ссылка | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Измерение сигнала CD | POP 9055 – | 133 ] | ||||
| Измерение сигнала CD | POP | – | – | 2012 | [129] | |
| Конструкции O / C | Топливо | 70 нМ (первый цикл) | – | – | – | 2014[139] |
| Соотношение структур RH, LH | pH | Диапазон зависит от процентного содержания молекул LH или RH | Несколько минут | 2017 | [20] | |
| Структура O / C | Вирусная РНК (вирус гепатита С) | 100 пМ (буфер) 1 нМ (человеческая сыворотка) | 30 мин (инкубация) 0.  01 с (каждая длина волны) | 2018 | [19] | |
| Структура O / C | Аденозин | 20 мкМ (стиль блокировки 1) 65 мкМ (стиль блокировки 2) | 1 мин (стиль блокировки 1 ) | 2018 | [137] | |
| Структура O / C | АТФ и кокаин | Диапазон отдо мкМ (АТФ или кокаин) | – | 2018 | [138] | Человеческий α-тромбин | 100 пМ | – | 2019 | [52] |
Выводы и перспективы В этом обзоре мы описали впечатляющие достижения в области оптического зондирования на основе наноструктур ДНК-оригами. Достигнутый прогресс позволил улучшить сложные конструкции для обнаружения интересующих молекул в диапазоне концентраций от наномолярного до пикомолярного [21]. Тем не менее впереди еще несколько проблем. Повышение предела обнаружения устройств в субпикомолярном диапазоне предоставит новые возможности для обнаружения новых целей в качестве новых биомаркеров и для повышения чувствительности уже известных целей до более низких концентраций, возможно, на уровне одной молекулы.Это может быть особенно актуально для обнаружения внеклеточной ДНК опухолевого происхождения (цтДНК), мРНК (цтмРНК), микроРНК (миРНК), вирусной ДНК или РНК, белков или малых молекул [141]. Новые подходы к улучшению восприятия уже тестируются, такие как плазмонные оптические антенны на основе димерных структур NP или использование нескольких флуорофоров для усиления сигнала.
Скорость сенсоров – еще один ключевой вопрос при рассмотрении биосенсоров для биомедицинских диагностических целей. Обычно низкая целевая концентрация вызывает более медленное время отклика.В настоящее время количественное определение в микромолярном или наномолярном диапазонах требует аналитического времени в часах. Улучшенное (более короткое) время отклика сенсоров будет ключевым моментом в разработке сенсоров ДНК-оригами для биомедицинских приложений. Более того, объединение сенсоров ДНК-оригами с различными белками, такими как ферменты, возможно, улучшило бы функциональность комплекса ДНК-оригами [22,142]. Улучшение визуализации со сверхвысоким разрешением могло бы помочь в количественном обнаружении целей in vitro и позволить изучать взаимодействия нескольких различных биомолекул in situ [38].Еще одним важным моментом является стабильность и эффективность динамических механизмов в физиологических условиях, таких как биологические жидкости (кровь, плазма, сыворотка мочи, слюна, спинномозговая жидкость).
Все больше и больше исследований сосредотачиваются на том, как улучшить стабильность путем изменения структуры структуры с использованием различных типов покрытия (полиэлектролит [143] или инкапсуляция структур ДНК-оригами [144]). Поскольку многие из этих стратегий стабилизации влияют на связывание мишени, а также на динамические характеристики структур, поиск улучшенной стабильности может оказаться трудным.Более того, обнаружение конкретной цели может нарушаться из-за неспецифических взаимодействий, что приводит к ложному сигналу [145, 146]. Сенсоры на основе ДНК-оригами могут предоставить новые возможности для решения некоторых из этих проблем, поскольку они могут воспринимать на уровне одной молекулы и могут стать относительно стабильными в биологических жидкостях, при условии, что в комплекс включен метод стабилизации [144]. Более того, сенсоры на основе ДНК-оригами могут различать специфические и неспецифические взаимодействия [147]. Кроме того, крупномасштабное производство и хранение датчиков ДНК-оригами по доступной цене являются важными факторами при рассмотрении биомедицинских приложений.
Действительно, ДНК-оригами можно производить в больших масштабах, что делает это огромным преимуществом этого метода. В нескольких исследованиях уже обсуждалась ожидаемая стоимость будущего крупномасштабного производства этих структур и их будущего использования в клинических исследованиях [148, 149]. Оценка стоимости производства для комплексов на основе ДНК-оригами составила бы десять евро за дозу, к этому следует добавить дополнительные затраты: такие как чистота, согласованность партии и другие фармацевтические расходы [149]. Для сравнения с рыночными ценами на лечение антисмысловыми олигонуклеотидами, которое стоит до 125 000 долларов США за инъекцию [149].Однако ожидания относительно рыночных цен на метод ДНК-оригами ниже, чем на антисмысловые методы лечения, из-за крупномасштабного производства и возможности лечения нескольких заболеваний. ДНК-оригами можно комбинировать с различными методами, такими как литография (DALI) [150]. Этот конкретный метод сочетает в себе универсальность ДНК-оригами с техникой литографии для создания металлической наноструктуры с плазмонными свойствами [150], что позволяет изготавливать большие плазмонные метаповерхности с небольшими (~ 10 нм) размерами.
Литографию также можно использовать для размещения структур ДНК-оригами в определенном месте, как показано Gopinath et al. [151], где структура ДНК-оригами треугольной формы была помещена внутри фотонного кристалла. Этот метод может быть интересен для дальнейшего изучения обнаружения одиночных молекул без меток. Важно отметить, что в нескольких исследованиях уже сообщалось о возможности длительного хранения (т.е. до нескольких лет) без нарушения структурной и функциональной целостности комплексов ДНК-оригами [28,152].
В заключение отметим, что развитие метода ДНК-оригами для разработки новых сверхчувствительных инструментов обнаружения идет очень быстро.Эти типы датчиков раздвигают границы человеческого творчества и науки, поскольку потребность в устройствах такого типа чрезвычайно высока. Возможность быстрого обнаружения конкретных мишеней на уровне одной молекулы может открыть неожиданные возможности для технологий на основе ДНК-оригами для исследования неизведанных областей диагностики с беспрецедентной точностью.
Bay Area, FoldHaus, представит свое крупномасштабное произведение оригами «Shrumen Lumen» в течение Дня труда.
Shrumen Lumen – это художественная демонстрация кинетических грибов, наполненных светодиодами и расширяющихся до 14 футов.
«Мы – коллектив, мы все собираемся вместе, чтобы создавать эти сумасшедшие произведения искусства, и происходить из разных сообществ, и строить их для достижения главной цели», – сказал Сильвер.«Чтобы сделать эти изделия, нужно много разных навыков. У нас есть инженеры-электрики, инженеры-механики и (и) люди, пишущие специальное программное обеспечение для управления движением и освещением шоу».
СВЯЗАННЫЙ: Художник, стоящий за арт-инсталляцией “Entwined” в парке Golden Gate
Большая часть произведений искусства FoldHaus сделана из гофрированного пластика, алюминия, стали, светодиодных фонарей и т. Д.
ШРУМЕН ЛЮМЕН: ✨🍄✨ Художественный коллектив Bay Area, FoldHaus, начал создавать масштабное искусство оригами для развлечения.Теперь их работы путешествуют по миру и выставляются в музеях.
Обратите внимание на их временную арт-инсталляцию «Шрумен Люмен» в Данвилле. pic.twitter.com/9nOHv9uQfk
– ABC7 Melissa Pixcar (@ MelissaABC7) 23 июля 2021 г.
«Он должен выдерживать довольно сильные ветры. Мы проектируем его (Shrumen Lumen), чтобы выжить в условиях пустыни, где ветер может дуть со скоростью 60-70 миль в час», – сказал Сильвер.«Мы также выбрали этот материал, потому что свет очень красиво проходит сквозь него. Он рассеивает свет. Поэтому, когда становится темнее, весь материал загорается, и все складки создают эти прекрасные градиенты цвета».
Редвуд-Сити Четвероклассники создают фрески после пандемии, чтобы принести надежду своему сообществу.
Каждый, кто работает над произведением искусства в FoldHaus, добровольно жертвует своим временем и навыками.
Около пятидесяти человек работали над одним произведением искусства, чтобы объединить видение.
«Я думаю, что самый большой урок, извлеченный из всех наших работ, состоит в том, что если у вас есть сообщество, которое заинтересовано в воплощении мечты в реальность, и вы просто выполняете ее постепенно, шаг за шагом. Вы действительно можете сделать все, что захотите. представьте себе, “сказал Сильвер. «Если вы все просто привержены видению и страстно к нему относитесь. Вы можете просто воплотить его в жизнь».
«Мы и представить себе не могли, что наши произведения попадут в музеи и в конечном итоге будут путешествовать по миру», – сказал Сильвер.«Это действительно вызывает у всех нас чувство радости, когда мы наблюдаем, как люди восхищаются нашим искусством. Это огромное чувство радости от того, что мы можем выполнять эти вещи вместе, и мы действительно делаем это, потому что это весело для нас».
Shrumen Lumen временно отображается в центре города Данвилл до Дня труда. Обратите внимание на освещенные грибы перед Деревенским театром и библиотекой Данвилла.
Для получения дополнительной информации посетите веб-сайт FoldHaus.
.
Это необычно, 
Надо попробовать:
..
варить на медленном огне с презрением и солиться __ слезы__ 
Над ними кружит одинокий белоголовый орлан 
..
»
