Технологическая карта урока № 43
11.11.2019
Тема урока Деление смешанных чисел
Тип урока Урок закрепление знаний
Формируемые результаты
Предметные: сформировать умение деление смешанных чисел
Личностные: формировать умение планировать свои действия в соответствии с учебным заданием и представлять результаты своей работы.
Метапредметные: формировать осуществлять контроль своей деятельности в процессе достижения результата
Планируемые результаты
Учащийся научится делить смешанные дроби
Основные понятия
Правило деления дробей.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1.
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Актуализация знаний
Ф
Устно ( презентация, деление десятичных дробей, деление обыкновенных дробей)
4. Изучение нового материала
Ф
теоретический материал, п.14
5. Первичное закрепление знаний
Ф
№ № 446, № 450, № 450 (1-6), № 452 (1.2), № 454
6. Повторение
И
№ 494
7. Итоги урока
вопросы 1,2 с.87
8. Информация о домашнем задании
§ 14, 447, № 453(1,2)
Технологическая карта урока № 44
Тема урока Деление на натуральное число
Тип урока Урок закрепление знаний
Формируемые результаты
Предметные: сформировать умение деление на натуральное число
Личностные: формировать умение планировать свои действия в соответствии с учебным заданием и представлять результаты своей работы.
Метапредметные: формировать осуществлять контроль своей деятельности в процессе достижения результата
Планируемые результаты
Учащийся научится делить на натуральное число
Основные понятия
Правило деления дробей.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Проверка домашнего задания
4. Актуализация знаний
Ф
Устно ( презентация, деление десятичных дробей, деление обыкновенных дробей)
5. Закрепление изученного материала
Ф
№ 448, № 450 (7-12), № 452 (3-6), № 456, № 458, № 461 (1)
И
№ 189, № 190
6. Рефлексия учебной деятельности на уроке
Ответьте на вопросы.
Чему ты научился на урок?
Доволен ли ты своей работой на уроке?
7. Информация о домашнем задании
§ 14, № 449, № 451
Технологическая карта урока № 45
Тема урока Решение задач на тему «Деление чисел»
Тип урока Урок закрепление знаний
Формируемые результаты
Предметные: сформировать умение решения задач
Личностные: формировать умение планировать свои действия в соответствии с учебным заданием и представлять результаты своей работы.
Метапредметные: формировать осуществлять контроль своей деятельности в процессе достижения результата
Планируемые результаты
Учащийся научится решать задачи используя правила деления дробей
Основные понятия
Правило деления дробей.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1.
Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Проверка домашнего задания
4. Актуализация знаний
Ф
Устно № 2, с.88
5. Изучение нового материала
Ф
№ 460, 461 (2), №м463 (1-4), № 465, № 467, № 469, № 471
И
№ 197, № 198, № 199, № 200
6. Повторение
Ф
№ 495
7. Рефлексия учебной деятельности на уроке
Ответьте на вопросы
Какое из заданий, выполненных на уроке, больше всего понравилось?
Какие из заданий, выполненных на уроке, вызвали затруднения?
8. Информация о домашнем задании
§ 14 № 464 (1-3), № 466, № 472
Технологическая карта урока № 46
Тема урока Деление чисел
Тип урока Урок обобщения и систематизации знаний
Формируемые результаты
Предметные: сформировать умение решать задачи, используя деление дробей
Личностные: развивать готовность к самообразованию и решению творческих задач
Метапредметные: формировать осуществлять контроль своей деятельности в процессе достижения результата
Планируемые результаты
Учащийся научится делить смешанные дроби
Основные понятия
Правило деления дробей.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
Проверка домашнего задания
4. Актуализация знаний
Ф
устно № 4 с.88
5. Обобщение и актуализация знаний
Ф
№ 484, № 485, 486, 488, 490, 491, 493
И
№ 205, 206, 207
6. Контроль и коррекция знаний
Ф
сборник самостоят . работ
7. Повторение
И
№ 208
8. Рефлексия учебной деятельности
Продолжите высказывания об уроке:
Я хотел бы ещё узнать…
Мне понравилось…
Мне не понравилось…
8. Информация о домашнем задании
§ 14, № 487, 489, 492
Технологическая карта урока № 47
Тема урока Нахождение числа по заданному значению дроби
Тип урока Урок изучения нового материала
Формируемые результаты
Предметные: обобщить методы решения задач на нахождение числа по значению его дроби, в частности на нахождение числа по его процентам
Личностные: формировать ответственное отношение к учению, готовность к саморазвитию и самообразованию на основе мотивации к обучению и познанию.
Метапредметные: формировать умение использовать приобретённые знания в практической деятельности.
Планируемые результаты
Учащийся научится находить числа по значению его дроби, число по его процентам.
Основные понятия
Правило нахождения числа по значению его дроби, правило нахождения числа по его процентам
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Актуализация знаний
Ф
Устно № 1, с.95
4. Изучение нового материала
Ф
теоретический материал, п.15
5. Первичное закрепление знаний
Ф
№ № 497, 499(1-3), 501 (1,2), 503, 504, 506
И
№ 210, 211, 214
6.
И
№ 533, 536
7. Итоги урока
№ 209
8. Информация о домашнем задании
§ 15, вопросы 1,2, 498, 500 (1,2), 502, № 505.507
Технологическая карта урока
20.11.2019
Тема урока Преобразование обыкновенной дроби в десятичную
Тип урока Урок изучения нового материала
Формируемые результаты
Предметные: формировать умение преобразовывать обыкновенную дробь в десятичную
Личностные: формировать целостное мировоззрение, соответствующее современному уровню развития науки и общественной практики.
Метапредметные: формировать умение видеть математическую задачу в контексте проблемной ситуации в других дисциплинах, в окружающей жизни.
Планируемые результаты
Учащийся научится преобразовывать обыкновенную дробь в десятичную
Основные понятия
Правило преобразования обыкновенной дроби в десятичную, условие, при котором несократимую дробь можно преобразовать в десятичную.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Актуализация знаний
Ф
Устно № 1,2,3, с.102
№ 538
4. Изучение нового материала
Ф
теоретический материал, п.16
5. Первичное закрепление знаний
Ф
№ № 540, 542, 544
И
№ 228, 229, 230
6. Повторение
И
№ 546,548
231
7. Итоги урока
№ 227
8. Информация о домашнем задании
§ 16, вопросы 1,2, № 541, 543, 545, 547, 549
Технологическая карта урока
21.11.2019
Тема урока Бесконечные периодические десятичные дроби
Тип урока Урок изучения нового материала
Формируемые результаты
Предметные: формировать умение читать бесконечную периодическую десятичную дробь, использовать метод преобразования обыкновенной дроби в бесконечную периодическую десятичную дробь.
Личностные: формировать целостное мировоззрение, соответствующее современному уровню развития науки и общественной практики.
Метапредметные: формировать умение использовать приобретённые знания в практической деятельности.
Планируемые результаты
Учащийся научится читать бесконечную периодическую десятичную дробь, использовать метод преобразования обыкновенной дроби в бесконечную периодическую десятичную дробь
Основные понятия
Бесконечная периодическая десятичная дробь, период дроби, бесконечная десятичная дробь.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Актуализация знаний
Ф
Устно № 1,2 с.105
4. Изучение нового материала
Ф
теоретический материал, п.
17
5. Первичное закрепление знаний
Ф
№ № 550, 551, 555, 55
И
№ 233,234,235
6. Повторение
И
№ 557, 559, 560
236
7. Итоги урока
№ 232
8. Информация о домашнем задании
§ 17, вопросы № 552, 554,556,558
Технологическая карта урока
22.11.2019
Тема урока Десятичное приближение обыкновенной дроби
Тип урока Урок изучения нового материала
Формируемые результаты
Предметные: сформировать понятие десятичного приближения обыкновенной дроби, формировать умение находить деятичное приближение обыкновенной дроби.
Личностные: формировать умение соотносить полученный результат с поставленной целью.
Метапредметные: формировать умение соотносить свои действия с планируемым результататом.
Планируемые результаты
Учащийся научится находить десятичное приближение обыкновенной дроби.
Основные понятия
Десятичное приближение обыкновенной дроби, правило нахождения десятичного приближения.
Организационная структура урока
Рабочая тетрадь№ 1
Дидактические материалы
1. Организационный этап
2. Постановка формируемых результатов и задач урока. Мотивация учебной деятельности
3. Актуализация знаний
Ф
Устно № 1 с.107
4. Изучение нового материала
Ф
теоретический материал, п.18
5. Первичное закрепление знаний
Ф
№ № 561(1-3). 563(1-4), 565
И
№ 238, 239,
6. Повторение
И
№ 572,575
237
7. Итоги урока
8. Информация о домашнем задании
§ 18, № 562,564, 567
Этапы урока | Деятельность учителя | Задания для учащихся, выполнение которых приведет к достижению запланированных результатов | Деятельность учеников | Планируемые результаты | |
предметные | универсальные учебные действия (УУД) | ||||
I. Организационный момент. Цели: создать деловой настрой для занятия; информировать о подготовке к уроку | Приветствует учащихся, отмечает устно их готовность к проведению урока. | Подготовка к уроку, концентрация внимания на необходимых действиях. Итоги проверки домашнего задания | Слушают учителя, отвечают на вопросы Настраиваются на рабочий лад. | Осознавать необходимость дисциплинарного взаимодействия учителя и учащихся | Регулятивные: уметь ориентироваться в требованиях к уроку математики |
II. Мотивация к учебной деятельности. Цель: актуализировать требования к ученику с позиций учебной деятельности | Создает условия для актуализации учебной деятельности. Задает вопросы, поправляет ответы. Устанавливает тематические рамки | Устная работа: Выбрать пример, который вызвал затруднение. Объяснить причину, почему последний пример вызвал затруднение? Определить цель урока | Слушают учителя. Отвечают на вопросы, выполняют задания Понимают отсутствие знания правила вычитания Формулируют тему и цели урока. | Знать определение противоположных чисел, формулы Знать правила сложения чисел с разными знаками | Познавательные: умение осознанно и произвольно строить речевое высказывание в устной форме. Личностные: самоопределение. Регулятивные: определять и формулировать цель деятельности на уроке с помощью учителя. Коммуникативные: умение вступать в диалог, участвовать в коллективном обсуждении вопроса. Умение высказывать свою точку зрения и аргументировать ее |
III. Цели: обеспечить выполнение учащимися базовых учебных действий: восприятия, осмысления и первичного запоминания детьми изучаемой темы. Организовать работу по созданию правила и алгоритма по решению примеров на вычитание рациональных чисел | Организует общую работу над решением примеров Фронтальная работа с классом | Запишите примеры в два столбика и вычислите. Выдвинуть гипотезу, как выполнить вычитание рациональных чисел Сверить гипотезу с правилом в учебнике. Страница 211 Записать правило на математическом языке с помощью формулы Составить алгоритм выполнения действия. Алгоритм – Приложение №1. Составить дополнительные формулы Решить примеры – образцы Решить: № 1091 (а,в,д,ж,и,л,м,о,п) | Отвечают на вопросы учителя. Проговаривают свои предположения, делают выводы Сравнивают правило по учебнику со своей формулировкой. Записывают правило на математическом языке с помощью формулы. Перерабатывают правило в алгоритм Составляют дополнительные формулы | Уметь вычитать рациональные числа Принять утверждения: 1) из большего числа можно вычесть меньшее число 2)вычитание можно заменить сложением | Познавательные: уметь работать по алгоритму и аналогии, использовать математический язык для оформления письменного решения примеров. Коммуникативные: уметь аргументировать свое мнение и позицию. Регулятивные: уметь высказывать свое предположение, отстаивать свою точку зрения |
IV. Цели: учить запоминать основные понятия по теме; закрепить изученный алгоритм | Демонстрирует примеры для самостоятельного решения. Организует поочередную проверку, оценивает решения у первых шести человек. Организует оказание помощи ребятам, которые не справились с заданием | Выполнить самостоятельно задание: (по вариантам , с последующей проверкой) | Отвечают на вопросы учителя | Уметь ориентироваться в математических записях, правильности исполнения алгоритма, правильности выполнения действий | Регулятивные: уметь сопоставлять результаты решений, анализировать ситуацию. Личностные: уметь осуществлять самооценку на основе критерия успешности учебной деятельности |
V. Цели: зафиксировать содержание урока; организовать рефлексию и самооценку учениками собственной учебной деятельности | Организует фиксирование изученного материала, рефлексию, самооценку учебной деятельности | Ответить на вопросы: – Какие понятия изучили на уроке? – На какую оценку каждый знает эти понятия? – Что было непонятно? | Отвечают на вопросы учителя. Рассказывают, что повторили, узнали, смогли выполнить. Осуществляют самооценку | Уметь повторять рассмотренные алгоритмы, анализировать собственную учебную деятельность | Регулятивные: уметь оценивать правильность выполнения действия на уровне адекватной ретроспективной оценки. Личностные: уметь осуществлять самооценку на основе критерия успешности учебной деятельности |
VI. Подведение итогов учебной деятельности, домашнее задание. Цели: выставить оценки по итогам урока; нацелить на выполнение домашнего задания | Выставляет оценки с комментированием успешных и неуспешных действий учащихся | Домашнее задание: Работа с учебником: п.36 с. 211-212. Решить в тетради задания: № №1109 (а,в,д,ж,и,л,н,п), 1106 Выучить правило вычитания, алгоритм, формулы | Слушают учителя, записывают домашнее задание, задают вопросы по необходимости | Уметь выявлять аналогию предметных действий | Регулятивные: уметь прогнозировать ситуацию. Личностные: уметь выполнять оценку и самооценку деятельности |
ГЛАВА I. ОБЫКНОВЕННЫЕ ДРОБИ
§ 1. ДЕЛИМОСТЬ ЧИСЕЛ (20 ч)
ДЕЛИТЕЛИ И КРАТНЫЕ (3 ч)
Урок 1. Делители и кратные
Урок 2. Делители и кратные
Урок 3. Делители и кратные
ПРИЗНАКИ ДЕЛИМОСТИ НА 10, НА 5, НА 2 (3 ч)
Урок 4. Признаки делимости на 10, на 5, на 2
Урок 5. Признаки делимости на 10, на 5, на 2
Урок 6. Признаки делимости на 10, на 5, на 2
ПРИЗНАКИ ДЕЛИМОСТИ НА 9 И НА 3 (2 ч)
Урок 7. Признаки делимости на 9 и на 3
Урок 8. Признаки делимости на 9 и на 3
ПРОСТЫЕ И СОСТАВНЫЕ ЧИСЛА (2 ч)
Урок 9. Простые и составные числа
Урок 10. Простые и составные числа
РАЗЛОЖЕНИЕ НА ПРОСТЫЕ МНОЖИТЕЛИ (2 ч)
Урок 11. Разложение на простые множители
Урок 12. Разложение на простые множители
НАИБОЛЬШИЙ ОБЩИЙ ДЕЛИТЕЛЬ. ВЗАИМНО ПРОСТЫЕ ЧИСЛА (3 ч)
Урок 13.
Наибольший общий делитель
Урок 14. Наибольший общий делитель. Взаимно простые числа
Урок 15. Наибольший общий делитель. Взаимно простые числа
НАИМЕНЬШЕЕ ОБЩЕЕ КРАТНОЕ (4 ч)
Урок 16. Наименьшее общее кратное
Урок 17. Наименьшее общее кратное
Урок 18. Наименьшее общее кратное
Урок 19. Наименьшее общее кратное
Урок 20. Контрольная работа № 1
§ 2. СЛОЖЕНИЕ И ВЫЧИТАНИЕ ДРОБЕЙ С РАЗНЫМИ ЗНАМЕНАТЕЛЯМИ (22 ч)
ОСНОВНОЕ СВОЙСТВО ДРОБИ (2 ч)
Урок 21. Основное свойство дроби
Урок 22. Основное свойство дроби
СОКРАЩЕНИЕ ДРОБЕЙ (3 ч)
Урок 23. Сокращение дробей
Урок 24. Сокращение дробей
Урок 25. Сокращение дробей
ПРИВЕДЕНИЕ ДРОБЕЙ К ОБЩЕМУ ЗНАМЕНАТЕЛЮ (3 ч)
Урок 26. Приведение дробей к общему знаменателю
Урок 27. Приведение дробей к общему знаменателю
Урок 28. Приведение дробей к общему знаменателю
СРАВНЕНИЕ, СЛОЖЕНИЕ И ВЫЧИТАНИЕ ДРОБЕЙ С РАЗНЫМИ ЗНАМЕНАТЕЛЯМИ (6 ч)
Урок 29.
Сравнение дробей с разными знаменателями
Урок 30. Сравнение дробей с разными знаменателями
Урок 31. Сравнение, сложение и вычитание дробей с разными знаменателями
Урок 32. Сравнение, сложение и вычитание дробей с разными знаменателями
Урок 33. Сравнение, сложение и вычитание дробей с разными знаменателями
Урок 34. Сравнение, сложение и вычитание дробей с разными знаменателями
Урок 35. Контрольная работа № 2
СЛОЖЕНИЕ И ВЫЧИТАНИЕ СМЕШАННЫХ ЧИСЕЛ (6 ч)
Урок 36. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 37. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 38. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 39. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 40. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 41. Сложение и вычитание смешанных чисел
Урок 42. Контрольная работа № 3
§ 3. УМНОЖЕНИЕ И ДЕЛЕНИЕ ОБЫКНОВЕННЫХ ДРОБЕЙ (32 ч)
УМНОЖЕНИЕ ДРОБЕЙ (5 ч)
Урок 43. Умножение дробей
Урок 44. Умножение дробей
Урок 45.
Умножение дробей
Урок 46. Умножение дробей
Урок 47. «Счастливый случай» (урок-игра)
НАХОЖДЕНИЕ ДРОБИ ОТ ЧИСЛА (4 ч)
Урок 48. Нахождение дроби от числа
Урок 49. Нахождение дроби от числа
Урок 50. Нахождение дроби от числа
Урок 51. Нахождение дроби от числа
ПРИМЕНЕНИЕ РАСПРЕДЕЛИТЕЛЬНОГО СВОЙСТВА УМНОЖЕНИЯ (5 ч)
Урок 52. Применение распределительного свойства умножения
Урок 53. Применение распределительного свойства умножения
Урок 54. Применение распределительного свойства умножения
Урок 55. Применение распределительного свойства умножения
Урок 56. Применение распределительного свойства умножения
Урок 57. Контрольная работа № 4
ВЗАИМНО ОБРАТНЫЕ ЧИСЛА (2 ч)
Урок 58. Взаимно обратные числа
Урок 59. Взаимно обратные числа
ДЕЛЕНИЕ (5 ч)
Урок 60. Деление
Урок 61. Деление
Урок 62. Деление
Урок 63. Деление
Урок 64. Деление
Урок 65.
Контрольная работа № 5
НАХОЖДЕНИЕ ЧИСЛА ПО ЕГО ДРОБИ (5 ч)
Урок 66. Нахождение числа по его дроби
Урок 67. Нахождение числа по его дроби
Урок 68. Нахождение числа по его дроби
Урок 69. Нахождение числа по его дроби
Урок 70. Нахождение числа по его дроби
ДРОБНЫЕ ВЫРАЖЕНИЯ (3 ч)
Урок 71. Дробные выражения
Урок 72. Дробные выражения
Урок 73. Дробные выражения
Урок 74. Контрольная работа № 6
§ 4. ОТНОШЕНИЯ И ПРОПОРЦИИ (19 ч)
ОТНОШЕНИЯ (3 ч)
Урок 75. Отношения
Урок 76. Отношения
Урок 77. Отношения
ПРОПОРЦИИ (4 ч)
Урок 78. Пропорции
Урок 79. Пропорции
Урок 80. Пропорции
Урок 81. Пропорции
Урок 82. Повторение, обобщение и закрепление материала, пройденного за I полугодие
ПРЯМАЯ И ОБРАТНАЯ ПРОПОРЦИОНАЛЬНАЯ ЗАВИСИМОСТИ (3 ч)
Урок 83. Прямая и обратная пропорциональная зависимости
Урок 84. Прямая и обратная пропорциональная зависимости
Урок 85.
Прямая и обратная пропорциональная зависимости
Урок 86. Контрольная работа № 7
МАСШТАБ (2 ч)
Урок 87. Масштаб
Урок 88. Масштаб
ДЛИНА ОКРУЖНОСТИ И ПЛОЩАДЬ КРУГА (2 ч)
Урок 89. Длина окружности и площадь круга
Урок 90. Длина окружности и площадь круга
ШАР (2 ч)
Урок 91. Шар
Урок 92. Шар
Урок 93. Контрольная работа № 8
ГЛАВА II. РАЦИОНАЛЬНЫЕ ЧИСЛА
§ 5. ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ И ОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ ЧИСЛА (13 ч)
КООРДИНАТЫ НА ПРЯМОЙ (3 ч)
Урок 94. Координаты на прямой
Урок 95. Координаты на прямой
Урок 96. Координаты на прямой
ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ЧИСЛА (2 ч)
Урок 97. Противоположные числа
Урок 98. Противоположные числа
МОДУЛЬ ЧИСЛА (2 ч)
Урок 99. Модуль числа
Урок 100. Модуль числа
СРАВНЕНИЕ ЧИСЕЛ (3 ч)
Урок 101. Сравнение чисел
Урок 102. Сравнение чисел
Урок 103. Сравнение чисел
ИЗМЕНЕНИЕ ВЕЛИЧИН (2 ч)
Урок 104.
Изменение величин
Урок 105. Изменение величини
Урок 106. Контрольная работа № 9
§ 6. СЛОЖЕНИЕ И ВЫЧИТАНИЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ И ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ ЧИСЕЛ (11 ч)
СЛОЖЕНИЕ ЧИСЕЛ С ПОМОЩЬЮ КООРДИНАТНОЙ ПРЯМОЙ (2 ч)
Урок 107. Сложение чисел с помощью координатной прямой
Урок 108. Сложение чисел с помощью координатной прямой
СЛОЖЕНИЕ ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ ЧИСЕЛ (2 ч)
Урок 109. Сложение отрицательных чисел
Урок 110. Сложение отрицательных чисел
СЛОЖЕНИЕ ЧИСЕЛ С РАЗНЫМИ ЗНАКАМИ (3 ч)
Урок 111. Сложение чисел с разными знаками
Урок 112. Сложение чисел с разными знаками
Урок 113. Сложение чисел с разными знаками
ВЫЧИТАНИЕ (3 ч)
Урок 114. Вычитание
Урок 115. Вычитание
Урок 116. Вычитание
Урок 117. Контрольная работа № 10
§ 7. УМНОЖЕНИЕ И ДЕЛЕНИЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ И ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ ЧИСЕЛ (12 ч)
УМНОЖЕНИЕ (3 ч)
Урок 118. Умножение
Урок 119. Умножение
Урок 120. Умножение
ДЕЛЕНИЕ (3 ч)
Урок 121.
Деление
Урок 122. Деление
Урок 123. Деление
РАЦИОНАЛЬНЫЕ ЧИСЛА (2 ч)
Урок 124. Рациональные числа
Урок 125. Рациональные числа
СВОЙСТВА ДЕЙСТВИЙ С РАЦИОНАЛЬНЫМИ ЧИСЛАМИ (3 ч)
Урок 126. Свойства действий с рациональными числами
Урок 127. Свойства действий с рациональными числами
Урок 128. Свойства действий с рациональными числами
Урок 129. Контрольная работа № 11
§ 8. РЕШЕНИЕ УРАВНЕНИЙ (15 ч)
РАСКРЫТИЕ СКОБОК (3 ч)
Урок 130. Раскрытие скобок
Урок 131. Раскрытие скобок
Урок 132. Раскрытие скобок
Урок 133. Повторение и обобщение материала за III четверть (урок-игра)
КОЭФФИЦИЕНТ (2 ч)
Урок 134. Коэффициент
Урок 135. Коэффициент
ПОДОБНЫЕ СЛАГАЕМЫЕ (3 ч)
Урок 136. Подобные слагаемые
Урок 137. Подобные слагаемые
Урок 138. Подобные слагаемые
Урок 139. Контрольная работа № 12
РЕШЕНИЕ УРАВНЕНИЙ (4 ч)
Урок 140. Решение уравненийк
Урок 141.
Решение уравнений
Урок 142. Решение уравнений
Урок 143. Решение уравнений
Урок 144. Контрольная работа № 13
§ 9. КООРДИНАТЫ НА ПЛОСКОСТИ (13 ч)
ПЕРПЕНДИКУЛЯРНЫЕ ПРЯМЫЕ (2 ч)
Урок 145. Перпендикулярные прямые
Урок 146. Перпендикулярные прямые
ПАРАЛЛЕЛЬНЫЕ ПРЯМЫЕ (2 ч)
Урок 147. Параллельные прямые
Урок 148. Параллельные прямые
КООРДИНАТНАЯ ПЛОСКОСТЬ (3 ч)
Урок 149. Координатная плоскость
Урок 150. Координатная плоскость
Урок 151. Координатная плоскость
СТОЛБЧАТЫЕ ДИАГРАММЫ (2 ч)
Урок 152. Столбчатые диаграммы
Урок 153. Столбчатые диаграммы
ГРАФИКИ (3 ч)
Урок 154. Графики
Урок 155. Графики
Урок 156. Графики
Урок 157. Контрольная работа № 14
Чтобы в сжатые сроки увидеть высокие результаты применения механизма самоподготовки с применением самого практикума и гдз по математике 6 класс дидактические материалы Мерзляк, необходимо выделять достаточное количество времени на такую работу.
Многие эксперты сходятся во мнении, что минимально следует заниматься около часа в день, при этом, не делая длительных перерывов в такой работе. Например, пропуски более чем на две недели в ежедневных занятиях приводят к забыванию части материала. А последующее “наверстывание” программы большими блоками – к ухудшению качества его усвоения.
В числе тех, кто регулярно и постоянно применяет ответы по математике за 6 класс дидактические материалы (коллектив авторов: Полонский, Рабинович и Якир) – такие категории заинтересованных пользователей:
Это позволяет сократить время на её проведение, но при этом – сохранить на высоком уровне качество результата. Учитывая, как много работы сегодня у учителей, такой подход представляется актуальным;Ряд специалистов скептически относятся к еуроки ГДЗ, считая, что они мешают детям самостоятельно найти ответы на математические задания и вопросы. Но если пользоваться ими в целях сверки своих ответов с эталонными или для построения эффективной системы самоподготовки, то плюсы от их применения очевидны для всех. Среди прочего:
Сегодня сборники готовых решений применяет все большее число заинтересованных пользователей. Все они отмечают эффективность и полезность этих ресурсов, возможность включать их в самые разнообразные современные схемы и методики подготовки.
Технологическая карта урока по математике, 6 класс
Работу выполнила Фуганова Иринья Николаевна,
учитель математики
Г. Великий Новгород
МАОУ “Гимназия №2”
Предмет: математика
Преподавание предмета ведется по учебнику
Математика. 6 класс учеб. для общеобразовательных учреждений/ Н.Я. Виленкин, В.И. Жохов, и др. М.: Мнемозина, 2012
Тема урока “Длина окружности”
6 класс
Продолжительность урока 40 минут
Технологическая
карта урока по математике, 6 класс.
Тема урока: «Длина окружности.»
Тип урока: урок открытия нового знания.
Цель урока:
Образовательная: сформировать знания учащихся о измерении и вычислении длины окружности.
Развивающая: развитие познавательной активности учащихся и на каждом этапе урока развивать универсальные учебные действия школьников.
Воспитательная: формировать навыки сотрудничества, взаимопомощи в коллективном учебном труде.
Деятельностная: формировать у учащихся умения самостоятельной исследовательской деятельности с постановкой учебной задачи, проводить эксперимент, производить вычисления и делать соответствующие выводы на основе полученных результатов, применять полученные знания для решения прикладных задач.
Задачи урока:
Установить
факт прямой зависимости длины окружности
и длины диаметра, на основе этого ввести
понятие числа”ПИ”, вывести формулу
вычисления длины окружности, формирование
умений применения данной формулы для
решения прикладных задач.
Продолжить развитие умений выдвигать и проверять гипотезы, устанавливать связи между величинами, работать а парах и группах.
Формировать умения управлять своей учебной деятельностью.
Методы и методические приемы: проблемный, частично-поисковый
Цель деятельности учителя:
создать условия для:
возникновения внутренней потребности включения в деятельность;
развития познавательной активности учащихся при выполнении краткой исследовательской работы;
понимания практической направленности знаний учащихся по данной теме.
Планируемые результаты (УУД):
познавательные: проводят сравнение, анализ результатов исследовательской работы, делают выводы, выдвигают гипотезы и предположения;
регулятивные: вносят необходимые коррективы в действие, после его завершения, на основе характера сделанных ошибок; осуществляют самоанализ и самоконтроль;
коммуникативные: учитывают разные мнения и стремятся к координации различных позиций в сотрудничестве;
личностные: вырабатывают умение
ясно, точно, грамотно излагать свои
мысли в устной и письменной речи,
понимать смысл поставленной задачи,
выстраивать аргументацию, приводить
примеры.
Предметные умения:
устанавливают факт прямой зависимости длины окружности и длины диаметра;
знакомятся с числом π и его особенностями;
выводят формулы вычисления диаметра, радиуса и длины окружности;
применяют данные формулы для решения прикладных задач.
Организация пространства:
формы работы: фронтальная, парная , индивидуальная, групповая.
образовательные ресурсы: Математика .6 класс учеб. для общеобразовательных учреждений/ Н.Я. Виленкин, В.И. Жохов, и др. М.: Мнемозина, 2012, набор для проведения исследовательской деятельности(пластиковый стаканчик, лист бумаги, нить, штангенциркуль, набор кругов разного диаметра, структура таблицы результатов) задания для индивидуальной, парной и групповой работы(см. Приложение к уроку), компьютер, проектор.
Примерный конспект урока
Этап
урока. | Деятельность учителя. | Деятельность учащихся. |
1. Этап мотивации к учебной деятельности. деятельности. Цель: Создать условия для возникновения внутренней потребности включения в деятельность. Развитие познавательных и регулятивных УУД. | Учитель: В
следующем учебном году вы будете
изучать новый предмет -геометрия.
Этот предмет изучает геометрические
фигуры (квадрат, прямоугольник,
треугольник и т.д.) и их свойства.
Знания, полученные при изучении данного
предмета необходимы специалистам в
области архитектуры, конструирования
и т.д. Сегодня на уроке мы будем
рассматривать геометрическую фигуру,
состоящую из точек плоскости,
расположенных на заданном расстоянии
от данной точки. Назовите данную
геометрическую фигуру. Учитель демонстрирует с помощью проектора ребус, ответом на который является слово “Окружность”. ( Приложение 1) | Учащиеся делают предположение о какой геометрической фигуре идет речь. Отгадывают ребус. |
Актуализация знаний. Пробное учебное действие. локализация затруднений. Построение проекта выхода из затруднения. Цель: Создать условия для подготовки мышления учащихся к построению учебных действий и воспроизведения знаний умений и навыков достаточных для построения нового способа действий. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД. | Вы
сделали верное предположение, сегодня
на уроке мы будем рассматривать
геометрическую фигуру – окружность.
Сейчас я предлагаю вам вспомнить , что
вы знаете о данной геометрической
фигуре и какие основные элементы
окружности вам известны. ( Приложение 2 ) Выясняют, как связаны диаметр и радиус окружности. Учитель записывает на доске формулу связи диаметра окружности с ее радиусом. Учитель: Окружность -это множество точек, удаленных от данной точки на одно и тоже расстояние. Сливаясь, эти точки образуют замкнутую линию. Длину радиуса и диаметра можно измерить или вычислить. А вот как вычислить или измерить длину окружности? | Учащиеся указывают на окружности центр, радиус, диаметр, дугу, полуокружность. Вычисляют длину диаметра окружности, по значению радиуса и наоборот, вычисляют значение радиуса, если значение диаметра известно. Выдвигают
предположения или алгоритм измерения
и вычисления длины окружности. |
3. Этап целеполагания. Цель: создать условия для того, чтобы учащиеся сами сформулировали цель урока. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД. | Учитель: Возможно вы правильно сделали предположение, о том как измерить и вычислить длину окружности, но его еще необходимо проверить. Давайте сформулируем тему и цель нашего урока . Учитель записывает тему урока и цель на доске. | Учащиеся формулируют тему урока”Длина окружности”. Цель урока: сформировать знания о измерении и вычислении длины окружности. Учащиеся в тетради записывают тему урока и цель урока. |
4. Постановка учебной задачи. Цель: На основе цели учебной деятельности выбор способа и средств ее реализации Развитие
познавательных, личностных регулятивных
и коммуникативных УУД. | Учитель: Согласно вашего плана исследование начнем с измерения длины окружности, а затем выведем формулу для вычисления длины окружности. Сегодня на уроке вам будет предложена работа в парах и группах. Напомните мне, какие правила работы в парах и группах на уроке необходимо соблюдать. Учитель слушает ответы и дополнения к ответам учащихся. Учитель: Вы сейчас выполните небольшую исследовательскую работу в парах. На каждой парте представлен набор с подручным материалом, который необходим для того чтобы провести данное исследование (пластиковый стаканчик, лист бумаги, нить, штангенциркуль, набор кругов разного диаметра, структура таблицы результатов). Результаты исследования занесите в таблицу, оформите таблицу в тетради. (Приложение 3) | Учащиеся проговаривают правила работы на уроке в парах и группах; проверяют набор с подручным материалом; оформляют
в тетради структуру таблицы для
внесения результатов исследования. |
Реализация построенного проекта. Цель: создать условия для построения учащимися нового способа действия и формирования умения его применять при решении задачи вызвавшей затруднение так и для решения других задач данного типа. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД. | Учитель наблюдает за ходом проведения исследовательской работы, помогает учащимся, которые столкнулись с затруднением. Учитель: 1. Какую закономерность при заполнении таблицы вы увидели? Учитель вводит понятие числа “ПИ”, записывает на доске обозначение данного числа, рассказывает об истории возникновения данного числа и его особенностях. Учитель: 2. Как зависит длина окружности от длины диаметра? 3.Как можно вычислить длину окружности, зная ее диаметр? | Учащиеся выполняют задания по алгоритму, представленному в структуре таблицы, делают соответствующие выводы (отношение длины окружности к длине диаметра одно и тоже число и тот факт, что длина окружности прямо пропорциональна длине диаметра ) Учащиеся,
которые быстро выполнили задание,
помогают отстающим. Отвечают устно на вопросы учителя, дополняют ответы одноклассников. |
Первичное закрепление знаний с проговариванием во внешней и письменной речи. Цель: Усвоение нового способа действия при решении типовых задач. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД | Фронтальная работа. Подведем итог исследовательской работы: Учитель задает вопросы учащимся, корректирует ответы учеников. Учитель:
Учитель
предлагает учащимся записать формулу
для вычисления длины окружности. Какие знания вы приобрели выполняя, исследовательскую работу? | Учащиеся отвечают на вопросы учителя, дополняют или корректируют ответы одноклассников. Ученик записывает данную формулу на доске. Ученик записывает данную формулу на доске. |
Самостоятельная работа с проверкой по эталону. Цель: организовать самостоятельное выполнение задания учащимися на выполнение учащимися типовых заданий на новый способ действия. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД. | Учитель: Перед вами на карточках задание. Заполните пропуски в таблице. Учащиеся, которые выполнят задание первыми выполняют дополнительное задание из учебника №852 стр. 139. (Приложение 4) Учитель
записывает дополнительное задание
на доске. Оказывает индивидуальную помощь учащимся Правильное решение демонстрируется через проектор. Решение № 852 оформляет на доске ученик, который раньше всех выполнил задание и проверил его решение у учителя. Проговаривает алгоритм решения задачи. | Учащиеся самостоятельно выполняют задание. Учащиеся первыми справившиеся с заданием показывают результат учителю и оказывают помощь затрудняющимся учащимся. Учащиеся проверяют работу по эталону и корректируют результаты вычислений. Записывают решение №852 в тетрадь. |
Физкульминутка. Ученик, который проводит физкультминутку предлагает учащимся упражнения, в состав которых входят круговые вращения. ( упражнения для глаз, туловища, кистей рук, коленей, локтей ) | ||
Включение
знаний в систему и повторение. Цель: закрепление ранее изученного материала, включение нового способа действий в систему знаний. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД. | Учитель: В ходе выполнения самостоятельной работы вы использовали формулы вычисления длины окружности, диаметра и радиуса окружности. Эти формулы можно будет применять при вычислении еще одной величины, связанной с кругом , о которой мы будем говорить на следующем уроке – площадь круга. Но на данном этапе урока вы будете работать в группах, выполнять задания, в которых необходимо применить знания, полученные на предыдущих уроках и новые знания. Самостоятельная работа в группах. (Приложение 5). Учитель: Итоги самостоятельной работы в группах будут подведены на следующем уроке, после проверки работ учащихся учителем. | Учащиеся
разбиваются на группы по 4 человека. |
Рефлексия Цель: Создать условия для рефлексии и самооценки учащимися результатов учебной деятельности на уроке. Развитие познавательных, личностных регулятивных и коммуникативных УУД | Учитель:
| Учащиеся
отвечают на вопросы учителя, дополняют
ответы одноклассников. |
Домашнее задание | Для всех: Учебник стр. 141-142 № 868, 871, 873(а,г). Для желающих: Составьте самостоятельно, или найдите в задачниках 2-3 прикладные задачи по теме “Длина окружности”. Представьте текст и решение задач на бумажном или электронном носителе. Укажите источник информации. | Учащиеся определяют задания для самопроверки |
Литература |
| |
Приложение 1
Ответ: ОКРУЖНОСТЬ
Приложение 2
Задание
1. Вычислить d=?, если r=4см.
2. Вычислить r=?, если d=14,6 дм.
Приложение 3
Задание:
1. Измерьте длину окружностей дна и края пластикового стаканчика.
2. Измерьте диаметр окружностей дна и края стаканчика.
3. Вычислите радиус окружностей дна и края пластикового стаканчика.
4. Найдите отношение длины окружности к диаметру, результат округлите до сотых.
5. Заполните данные таблицы для соответствующих кругов.
6. Сделайте вывод.
7. Запишите формулы для вычисления соответствующих величин.
Таблица результатов исследования:
Радиус окружности (r,см) | Диаметр окружности(d,см) | Длина окружности (C,см) | Отношение длины окружности к радиусу(С/d) | |
1. | ||||
2. Край пластикового стаканчика | ||||
3 Окружность красного круга | 2 см | |||
4. Окружность желтого круга | 8 см | |||
5. Окружность зеленого круга | 6 см | |||
Вывод: | ||||
Формулы для вычисления соответствующих величин | ||||
Приложение 4
Самостоятельная
работа с последующей проверкой по
эталону.
Задание:
Заполните пропуски в таблице. Значение числа π округлите до сотых.
№ задания | Радиус окружности (r, см) | Диаметр окружности(d, см) | Длина окружности (C,см) |
1 | 2,4 | ||
2 | 14,6 | ||
3 | 50,24 |
Приложение 5
Задание:
Решите задачи. Число π округлите до единиц. Решение задач представь для проверки учителю.
1.
Диаметр колеса тепловоза равен 180 см.,
за 2,5 минуты колесо сделало 500 оборотов.
С какой скоростью идет тепловоз?
2. Диаметр земного шара примерно равен 12, 7 тыс. км. Скольким тысячам километров равен радиус и длина экватора Земли?
3. Один из самых больших глобусов в стране был изготовлен для Парижской всемирной выставки в 1889 году. Диаметр этого глобуса равен 12,7 м. В каком масштабе этот глобус изображал Землю? Какова длина экватора и длина меридианов этого глобуса?
4. Вычислите длину круговой орбиты искусственного спутника Земли, если спутник вращается на расстоянии 320 км от Земли. Используйте дополнительные данные из задачи №2.
Эти карточки с заданиями по математике для подготовки к экзамену EQAO были созданы, чтобы помочь вашим учащимся в течение года повторять провинциальный стандартизированный тест для 6-го класса. Всего 34 карточки – 27 с выбором ответа и 7 с открытым ответом. Лист записи для учащихся предоставляет больше места для учащихся, чтобы они могли обосновать свои ответы на вопросы с открытым ответом.
В этот набор входят как цветные, так и черно-белые карточки с заданиями для удобной печати, по 4 карточки с заданиями на листе (просто разрежьте по пунктирным линиям).Для дополнительной прочности заламинируйте карточки с заданиями.
В этом наборе представлены все 5 направлений: Числовой смысл и нумерация, Структура и алгебра, Измерение, Геометрия и пространственный смысл, Управление данными и вероятность.
Вы можете использовать эти ежемесячные карточки с заданиями в качестве математического центра, в качестве звонка или выходного листка, во время занятий по математике с гидом, для обучения всей группы, для размышлений или практических занятий во время уроков, состоящих из 3 частей, во время занятий в небольших группах, для прогулок по галерее, во время игры в скутеры или даже для волонтеров или родителей для работы со студентами.Ответы включены в этот набор.
Я также включил Лист отслеживания данных, чтобы отслеживать успехи ваших
учащихся и области потребностей.
Нажмите ЗДЕСЬ, чтобы просмотреть все мои ежемесячные карточки с заданиями по подготовке к экзамену EQAO
Щелкните ЗДЕСЬ, чтобы просмотреть все мои карточки с заданиями по математике для подготовки к экзамену EQAO.
Другие ресурсы по математике, которые могут вас заинтересовать:
• Набор математических журналов, содержащий 4 полных ресурса для ваших интерактивных математических журналов
• Интерактивный математический журнал
• Интерактивный математический журнал 2
3 900 Reflection Fans • Концептуальные плакаты по математике• Набор «Математика Cootie Catchers»
• Создание лучших ответов по математике
• Математика по месяцам — ежемесячные плакаты по математике
• «Собери вместе — совместное решение задач для Common Core 6-го класса»
• Stick -It Together – совместное решение задач для Common Core, 5-й класс
•Stick-It Together – совместное решение задач для Common Core, 4-й класс
• Карточки с математическими заданиями EQAO – комплект для 6-го класса
• Карточки с математическими заданиями EQAO – класс 3 Связка
Видеоуроки по всем школьным предметам Эффективная подготовка к ОГЭ и олимпиадамИзображения обложек учебников размещаются на страницах данного сайта исключительно в качестве иллюстративного материала (пункт 1 статьи 1274 части четвертой Гражданского кодекса Российской Федерации)
ФГОС Звавич, Кузнецова Образование
Часть 1, 2 Потапов, Шевкин Просвещение
Теперь вам не нужно ломать голову над тем, правильно ли вам удалось решить задачу, вы можете просто проверить ее с помощью книги решений!
Кроме того, в книге решений есть подробное объяснение решения задач и уравнений, необходимые формулы и правила. Таким образом, даже при механическом копировании работы учащийся волей-неволей запоминает правила выполнения заданий и систематизирует эти знания в своей голове.
Зачастую одного школьного урока для полного усвоения материала недостаточно. В этом случае пригодятся специальные обучающие материалы и решения для них. Но важно помнить, что работа с ГДЗ затем приносит значительные результаты при выполнении: 
Стремительное развитие общества привело к значительному усложнению школьных программ и общеобразовательных реформ.
Информационная нагрузка на современного школьника постоянно растет, и сегодня, чтобы усвоить весь необходимый материал, ребенку приходится проводить за партой 8 часов: весь рабочий день, и это без учета затраченного времени. по подготовке домашнего задания.Такая нагрузка приводит к усталости, снижению работоспособности, потере мотивации. Помочь справиться с возрастающим объемом информации, научиться анализировать и логически мыслить, повысить успеваемость поможет ГДЗ – готовые домашние задания.
ГДЗ, или “решебники” – это учебные пособия, которые активно используются в качестве пособий, дополняющих образовательную программу по таким предметам, как русский язык, математика (алгебра), химия, физика и ряду других. В настоящее время создано множество ресурсов в помощь школьникам и их родителям: Ставкур, Спиши.Ру, ГДЗ от Путина и другие, но как с их помощью получить настоящие знания?
Решаки для родителей Методические пособия, именуемые ГДЗ, разрабатываются опытными педагогами, прежде всего, в помощь родителям.
На протяжении всей школьной жизни многие взрослые стремятся контролировать учебный процесс, чтобы быть в курсе успехов и неудач ребенка, помогать ему в освоении новых знаний. Однако, это не всегда возможно.
Во-первых, потому что современная образовательная программа претерпела значительные изменения – это легко заметить, посетив такой сайт, как Мегаботан, ГДЗ Путина.Во-вторых, не каждый родитель сможет запомнить теоретические знания, заложенные в школе, а значит, проконтролировать правильность выполнения ребенком домашнего задания. В-третьих, у взрослых может просто не хватить времени на то, чтобы самостоятельно с ребенком разобраться с домашними заданиями (особенно в многодетных семьях). Но это не значит, что нужно пускать образовательный процесс «само собой»: иногда помощь родителей просто необходима, чтобы ребенок не потерял интерес к предмету, усвоил знания, понял трудный для него материал. его.И ГДЗ вполне может в этом помочь. С их помощью:
Таким образом, использование тетрадей с решениями направлено, прежде всего, на помощь школьникам в усвоении сложного материала.
Дополнение к школьной программеКак известно, школьная программа ориентирована на «среднего ученика», но что делать тем, кто по каким-то причинам отстал от программы (например, из-за продолжительной болезни) или, наоборот, развивается быстрее, чем подавляющее большинство большинство одноклассников? В обоих случаях решатели станут универсальным ответом.
С помощью ГДЗ отстающий ученик сможет понять материал, который он не усвоил, и «догнать» остальных в классе, а для учащихся, чей уровень выше среднего, ГДЗ станет «палочкой-выручалочкой». », с которым он сможет двигаться дальше в своем развитии, усваивая материал с опережением школьной программы.Более того, часто такие ресурсы, как Мегаботан и Ответ.Ру, используются родителями для того, чтобы дать ребенку знания, выходящие за рамки школьной программы, расширить кругозор ребенка.
ГДЗ также является уникальным инструментом для репетиторов и учителей. Не секрет, что усложнение школьной программы привело к тому, что почти каждый ученик посещает репетиторов для подготовки к выпускным экзаменам и зачетам. Книжки-решения активно используются учителями, чтобы помочь своим ученикам освоить весь школьный курс, а также для проверки знаний школьников и контроля их успеваемости.
Кстати, поскольку такие ресурсы, как «Скриб Онлайн» или «Чит.Ру», изучают и используют учителя, ученики не могут просто списать домашнюю работу из тетради с решениями — учитель это сразу заметит. Поэтому ГДЗ нельзя использовать таким образом.
Экспертное заключение Несмотря на вышесказанное, мнения специалистов по поводу готовых домашних заданий разделились. Некоторые считают, что такие льготы приносят больше вреда, чем пользы. Поэтому были проведены многочисленные исследования влияния ресаков на общеобразовательный процесс.И выводы поражают: американские ученые Стивенс и Лайонсон доказали, что при использовании ГДЗ мозг ребенка работает почти в два раза активнее для анализа изучаемой информации, что увеличивает скорость усвоения материала в 1,4 раза и, соответственно, повышает успеваемость школьника.
.
Положительное влияние ГДЗ это, прежде всего:
Именно по этим причинам с каждым годом появляется все больше головоломок, самые популярные из которых собраны для удобства учителей, учеников и их родителей на этом ресурсе.
Изображения обложек учебников размещаются на страницах данного сайта исключительно в качестве иллюстративного материала (пункт 1 статьи 1274 части четвертой Гражданского кодекса Российской Федерации)
ФГОС Ткачева, Федорова Образование
Часть 1, 2. ФГОС Колягин, Ткачева Образование
Тут ответ однозначный: кто хочет списать, тот и спишет, и произойдет это без понимания смысла. Правильно ли составлено письменное задание? Запомнит ли учащийся изучаемый материал в этом случае? Навряд ли. Даже учитывая тот вариант, что для списывания будет использоваться ГДЗ , можно с уверенностью сказать, что это будет происходить в спокойной обстановке, располагающей к анализу написанного, и при этом обучающийся получит определенные навыки.По сути, этот процесс ничем не отличается от урока, когда все послушно переписывают с доски решаемую задачу.
При этом вариант решения, о котором учащийся либо не знал, либо забыл, гарантированно остается в памяти учащегося.
Вы можете сделать подборку литературы самостоятельно, но более грамотно – обратиться за помощью к специалистам.Это могут быть репетиторы, школьные учителя-предметники, руководители математических кружков и курсов.
В том числе и тех, кто планирует участвовать и побеждать в тематических олимпиадах.Бюджетное образовательное учреждение профессионального образования
Ханты-Мансийский автономный округ − Югра
Нижневартовский социально-гуманитарный колледж
Факультет начального общего и дополнительного образования
Урок (Русский язык)
Ё Юй и их функции в словах.Класс: 1 A
Дата: 1 A
Дата урока: 01.12/2017
Подготовлено:
Студент 215 .N Группа
ФИО ФАМЕНЕДЕ МЕЛНИКОВА Татьяна Алексеевна,
(ФИО)
Специальность
Преподавание в начальных классах
(шифр Название специальности)
Руководитель организации:
учитель начальных классов МБОУ СОШ №3 ФИО Ефременко Зульфия Фанилевна,
(Фамилия Имя Отчество) подпись
Руководитель колледжа
ФИО Майдибор Елена Сергеевна
Тема: Буквы Е, Ё, Ю, И и их функции в словах.
Цель: развивать умение учащихся различать функции букв
Е, Ё, Ю, И в разных позициях в слове.
Задачи: совершенствовать знания о гласных звуках;
Провести наблюдение за смысловой функцией
Гласные в слове;
Обучить распознаванию гласных среди других звуков в слове;
Развивать речь, мышление, умение выделять главное, обобщать,
Развивать фантазию;
Воспитывать ответственность, добросовестное отношение к
Выполненная работа.
Во время занятий
И.Орг.момент
Проверка готовности к занятию.
Сегодня, как всегда, необходимо ваше внимание. Вы должны показать знания, полученные на предыдущих уроках.
Ребята, урок мы проведем в сказке, которую расскажем вместе. Вместе с нами в сказке окажется волшебный шар. Итак, начнем! С каких слов обычно начинаются сказки? («В некотором царстве, в некотором государстве», «Жили-были»)
В некотором королевстве, в определенном государстве Жили-были Буквы Е, Е, Ю, И.
Но их можно было услышать, потому что они были настоящими певцами. У этих писем были тайные друзья, о которых мы узнаем позже.
Итак, в путь сказочными тропами в страну Знаний!
II. Обновление знаний. Каллиграфия.
Перед нами камень-указатель. (Дети читают надписи на камне). Главные герои обычно идут по одному пути, а мы с волшебным шаром пройдем все пути (гласным, тайным друзьям, секреты раскроем).Ведь для нас каждый путь уже исследован, нужно все рассказать волшебному шару.
Итак, выбираем путь налево – к гласным!
Момент очищения:
Ее
ю и
Возьмите карту №1. Положите ее перед собой.
Упражнение на внимание.
В течение 1 минуты вы должны найти слова среди мешанины букв. Выделите их.
MabanandklpryapplePearcloyoCucumber
Назовите слова, которые вы нашли.(Банан, яблоко, груша, огурец.)
Среди этих слов найдите одно лишнее. (Огурец.)
Почему вы решили, что это слово лишнее? (Это овощ, остальные фрукты.
)
Убрать карты. Продолжаем работать дальше с буквами.
Сколько букв в алфавите? (33)
Сколько звуков? (31)
Почему звуков меньше, чем букв? (б и б – не обозначают звуки)
Напишите в тетради буквы, которые я буду диктовать.
(1 учащийся у доски записывает, остальные учащиеся записывают в тетради, я диктую
Буквы: АЕЕОУЙЫЙ
Прочитайте написанные вами буквы.
Что вы можете о них сказать? (Это буквы обозначающие гласные звуки)
Сколько гласных букв в алфавите? (10)
Сколько мы записали? Кто назовет букву, которую мы не записали? (Э) впиши.
Вот будет специальный разговор об этом письме в следующих уроках.
А сегодня мы поговорим о других письмах.
Все эти буквы я разделил на две группы. Нравится.
Но сегодня мы будем работать с первой группой гласных e e yu i.
III. Постановка учебной задачи.
Если говорить об этих буквах сегодня на уроке, то вы должны помнить, что это очень хитрые буквы.
И почему? Вот о чем мы поговорим.
IV. Работа по теме урока.
Идем дальше с нашим волшебным колобоком вправо – тайные друзья!
Выполним задание, которое написано в карточке №2
1.НАБЛЮДЕНИЕ
СЕЛ ЭЛЬ ИСТРЕБИТЕЛЬ СЕМЬЯ
ПОЛЕТ ЁЛКА ПРИЁМ ОБЪЯВЛЕНИЕ
КЛЮВ ЮЖНЫЙ КАБИНА ШИТЬ
МЯСНАЯ СТОЙКА ПИТЬЕВАЯ
Где слова букв Е, Йо, Ю, Я в словах первого столбца? (после согласных, в середине слова)
Какую роль они играют? (смягчить предыдущий согласный).
Сколько и какие звуки они обозначают? (Читаем каждое слово и наблюдаем) СЕЛ (Э), КЛЮВ (У), ПОЛЕТ (О), МЯСО (А)
Какой вывод делаем? (Значит, эти буквы обозначают один звук, если стоят после мягких согласных).Отличная работа!
Прочитайте слова во втором столбце.
Где буквы Е, Йо, Ю, И в словах второго столбца? (В начале слова.)
Посмотрим, какие звуки они обозначают и сколько их? ЭЛЬ (ЕЛЬ), ЁЛКА (ЁЛКА), ЮГ (ЮГ), ЯМА (ЯМА)
Какой вывод делаем? (Так эти буквы обозначают два звука в начале слова.
) Молодец! Запишите эти слова.
Посмотрим на слова третьего столбца.Читай слова.
Где буквы Е, Е, Ю, И? (После гласных.)
Посмотрим, какие звуки они обозначают и сколько их? ИСТРЕБИТЕЛЬ (БОЙЕТС), РЕЦЕПЦИЯ (ПРИЕМНАЯ), КАБИНА (КАЮТ) СТЕНДА (СТЕНДА)
Какой вывод делаем? (Значит, эти буквы обозначают два звука после гласных). Отличная работа! Запишите эти слова.
Посмотрим на слова четвертого столбца. Читай слова.
Где буквы Е, Е, Ю, И? (После ь и ъ)
Посмотрим, какие звуки они обозначают и сколько их? СЕМЬЯ (СЕМЬЯ), ОБЪЯВЛЕНИЕ (ОБЪЯВЛЕНИЕ), ШУ (ШЮ), ПЁТ (ПЁТ).
Какой вывод мы делаем? (Значит, эти буквы обозначают два звука в после б и б). Отличная работа! Запишите эти слова.
2. Заключение.
Какой вывод мы можем сделать? При каких условиях буквы Е, Е, Ю, Я обозначают два звука? (Если они стоят в начале слова, после гласной и после б и б.)
Молодец!
V. Физическая минута
Дыхательные упражнения:
О, и что-то случилось в городе Гласных Букв! (Дети вместе с воспитателем продолжают рассказывать сказку).
Соловей-разбойник письма свистом пугал. Все спрятались. Давайте вместе сделаем зарядку и прогоним Соловья-разбойника. Дуй сильнее, еще сильнее!
Молодец! Соловья-разбойника прогнали.
VI. Закрепление изученного материала.
Бабушка знает весь мир,
Ей всего триста лет.
Ее дом стоит на курьих ножках,
Стоит на тропинках фей
Молодец! Это Баба Яга.
Баба Яга вас пропустит, если вы расскажете ей все секреты “Хитрых Гласных”. Дети разговаривают. (Буквы Е Ё Ю у меня два звука: – в начале слова, после гласной и после знаков ь и ъ)
Молодец! Баба Яга теперь пойдем дальше.
VII. Отражение.
А теперь мы идем прямо по дороге и раскрываем секреты.
Подведем итоги.
Какую роль могут играть буквы E Y Y Z
Учебник с.60
Задание 6, 7 (устно).
Задание 8: рассмотри картинки, изображение каких предметов ты видишь?
мак, ежик, ерш, шар, деревце.(ель)
Какое слово пропущено? (Мак)
Почему? (Все согласные твердые, а в остальных словах буквы хитрые)
Запишите слова, в которых выделенная буква обозначает гласный звук и указывает на мягкость предшествующего согласного звука.
Бортовой чек:
Шарик, тетка, пос.
Сказочное путешествие на гласные Е Е Ю Я
В некое царство, в некое государство… Е Е Ю Я
на гласные, друзья-тайны тайны откроют
на гласные
ЭЙЙЯУЙЙЕ
тайные друзья
Ел, дерево, юг, яма. Истребитель, приемная, кабина, стоя. Семья, реклама, шить, пить.
ФИЗМИНУТКА
Бабушка знает весь мир, Ей всего триста лет.Ее дом на курьих ножках Стоит на сказочных дорожках.
раскроем секреты
Шарик, тетка, пос.
Уважаемый посетитель нашего сайта! Мы рады предложить вашему вниманию более 1000 бесплатных видеоуроков по всем предметам школьной программы. Особый упор делается на основные школьные предметы: математику, английский язык, русский язык, физику, химию, биологию и историю. Все уроки разбиты по классам и предметам. То есть внутри каждого класса можно выбрать определенный предмет и наоборот.Далее в каждой из категорий находятся видеоуроки, конспекты уроков и проверочные работы.
Также на нашем образовательном канале много задач с решениями. Уроки готовят квалифицированные преподаватели, многие из которых являются педагогами высшей категории с большим педагогическим опытом.
Воспользоваться нашими учебными материалами могут также репетиторы на дистанционных и очных занятиях. Особенно удобно использовать онлайн-уроки совместно с интерактивной доской, доступной для учителей в меню «Виртуальный кабинет».персональный аккаунт. При проведении урока через Интернет репетитор может загрузить урок прямо в учебную оболочку.
Желаем Вам приятного просмотра, побольше знаний и отличных оценок в школе!
Сорго является преобладающей яровой культурой в засушливых районах зернового пояса на северо-востоке Австралии.Среда выращивания в этом районе характеризуется высокими температурами и переменным количеством осадков, хотя многие почвы имеют достаточную водоудерживающую способность, чтобы позволить выращивать сельскохозяйственные культуры на сохраненной подпочвенной влаге (Pratley, 2003).
По мере истощения подпочвенной влаги к концу вегетационного периода часто развивается легкий или сильный стресс от засухи (Chapman et al., 2002), что снижает урожайность сельскохозяйственных культур. Ожидается, что в следующие десятилетия эта ситуация будет происходить еще чаще, поскольку изменчивость климата будет возрастать, а погодные условия станут более экстремальными (Lobell et al., 2015a), как это наблюдалось в течение последних двух десятилетий во всем мире, а также в Австралии (IPCC, 2014).
С изменением климата количественное размножение по определенным признакам, повышающим урожайность в условиях ограниченной воды, станет еще более важным. Одним из таких признаков является индекс площади листьев (LAI), поскольку размер растительного покрова имеет важные последствия для использования воды (Borrell et al., 2014a,b). Возможность точно охарактеризовать площадь листа значительно улучшит выбор генотипов сорго, которые хорошо адаптированы к среде с ограниченным количеством воды.
Например, было обнаружено, что в средах с конечным стрессом от умеренной до сильной терминальной засухи культуры с меньшей площадью листьев на растение имеют преимущество в урожайности, поскольку их меньшее потребление воды перед цветением сохраняет подпочвенную влагу, которая может быть доступна во время критического периода созревания зерна. период заполнения (He et al., 2016). Считается, что свойство оставаться зеленым у сорго, связанное со снижением старения листьев и повышением урожайности в условиях засухи после цветения, действует посредством этого механизма, вызывая снижение кущения и меньшую площадь листьев перед цветением (Borrell et al., 2014а,б). Оставаться зеленым было важной чертой в программах селекции сорго в Австралии, что отчасти способствовало значительному увеличению тенденций урожайности сорго в засушливых условиях по сравнению с умеренными и влажными условиями за последние три десятилетия (Potgieter et al., 2016). До сих пор селекционеры положительно отбирали растения на сохранение зеленого цвета, визуально оценивая старение листьев после цветения.
Однако это работает только в испытаниях, в которых развиваются подходящие условия засухи для проявления признака.
Помимо этих связей с эвапотранспирацией (George-Jaeggli et al., 2017), LAI также полезен для оценки доли поглощенной фотосинтетически активной радиации, которая требуется для моделирования фотосинтеза кроны (Weiss et al., 2004). Таким образом, возможность измерять развитие площади листа с течением времени позволит оценить не только схему водопользования генотипа, но и его вероятный фотосинтетический выход.
В то время как визуальные оценки остаточной зелени во время наполнения зерна могут быть достаточно точными при оценке в нужное время и при правильном уровне ограничения воды, трудно оценить площадь листьев растений или индекс площади листьев (LAI) в начале сезона. , а фактические измерения площади листьев требуют много времени.Измерение площади листьев на тысячах участков в один момент времени, не говоря уже о нескольких моментах времени в течение вегетационного периода, нецелесообразно.
Необходим недорогой высокопроизводительный метод фенотипирования размера кроны генотипов сорго.
Первое применение многоспектральных изображений дистанционного зондирования и разработка индексов растительности для наблюдения за сельскохозяйственными культурами относится к первой серии НАСА LANDSAT в 1970-х годах (Tucker, 1979). С тех пор неуклонно развивается применение технологии дистанционного зондирования, в частности, гиперспектральной визуализации (Goetz, 2009), для картирования растительности и прогнозирования урожайности, и было разработано множество различных индексов с использованием конкретных длин волн, которые можно использовать для оценки роста растений. параметров (Beeri and Peled, 2006; White et al., 2012). Совсем недавно это было распространено на прогнозирование биофизических характеристик сельскохозяйственных культур и растительности, таких как чистая первичная продукция (ЧПП), доля поглощенной фотосинтетически активной радиации и LAI. Это было сделано с помощью спектральных индексов (например, NDVI, EVI), полученных из спектров отражения в видимом и ближнем инфракрасном диапазонах с пространственным разрешением от среднего до высокого в больших масштабах (Huete et al.
, 2002; Hanes, 2014).
В то время как использование цифровой камеры, прикрепленной к беспилотному летательному устройству, беспилотные летательные аппараты (БПЛА) были впервые предложены в качестве экономичного способа наблюдения за небольшими участками пшеницы почти десять лет назад (Lelong et al., 2008) совсем недавно дешевые, но высокоточные технологии позиционирования и цифровой обработки изображений, а также технологии беспилотных летательных аппаратов стали широко распространены, так что их использование стало практичным как для фермеров, так и для исследовательских программ (Haboudane et al., 2004; Chapman и др., 2014; Кандиаго и др., 2015). Комбинация этих технологий обеспечивает потенциал для высокопроизводительного фенотипирования, позволяющего программам селекции растений проводить количественный скрининг больших селекционных популяций.
В этом документе представлены результаты пилотного исследования с использованием многороторного БПЛА, оснащенного узкополосной мультиспектральной камерой (пять полос шириной 10–40 морских миль) для захвата изображений селекционных линий сорго с различными характеристиками растительного покрова за семь дат.
Мы оценили три узкополосных индекса растительности, т. е. нормализованный разностный индекс вегетации (NDVI), расширенный индекс вегетации (EVI) и нормализованный разностный индекс красных краев (NDRE) для оценки таких признаков, как покров древесного покрова, индекс площади листьев и листовой поверхности. хлорофилла, которые представляют особый интерес для селекционеров сорго в северном зерновом поясе Австралии.
Предыдущие исследования продемонстрировали полезность таких вегетационных индексов для оценки LAI сои и кукурузы (Viña et al., 2011) и пшеницы (Haghighattalab et al., 2016), но ранее таких исследований для сорго не проводилось. Цель нашего исследования состояла в том, чтобы оценить пригодность вегетационных индексов, рассчитанных на основе спектральных данных, полученных с помощью мультиспектральной камеры, установленной на БПЛА, для оценки растительного покрова, площади листьев и содержания хлорофилла в листьях различных генотипов сорго, выращенных на селекционных участках.
.Мы также обсуждаем полезность такого подхода для оценки селекционных линий сорго на предмет различий в размере кроны и содержании хлорофилла в листьях на критических стадиях выращивания, например, во время цветения и во время налива зерна.
Был проведен эксперимент для проверки способности технологий многоспектрального зондирования на борту платформы БПЛА для расчета различных индексов растительности для оценки характеристик растительного покрова, таких как растительный покров, площадь листьев, зелень листьев или содержание хлорофилла и биомасса отдельных засеянных участков. к разным генотипам сорго.В этой статье основное внимание уделяется результатам, связанным с растительным покровом, LAI и содержанием хлорофилла.
Было отобрано десять генотипов зернового сорго, известных своими различиями в признаках кроны, таких как высота растения, угол наклона листьев и площадь листа, включая 4 генотипа с контрастным типом старения (т.
е. быстрое старение после цветения = стареющий тип или медленное старение = сохранение зеленого цвета). тип).
10 генотипов сорго были расположены в рандомизированной полной блочной схеме с 3 блоками (10 генотипов × 3 ряда), в результате чего было получено 30 участков (рис. 1).Участки имели 4 ряда в ширину с междурядьями 0,76 м и длиной 10 м (т.е. 30,4 м 2 ) и были засажены в направлении восток-запад.
Рисунок 1 . Экспериментальная планировка участков на территории Эрмитажа на фото-мозаике, сделанной 3 февраля. Участки располагались в три ряда по десять столбцов в ряду. Цифры на рисунке относятся к положению столбца-строки каждого графика. Ряды рассматривались как блоки, и генотипы были полностью рандомизированы внутри каждого блока (ряда).
Участок исследования находился в исследовательском центре Эрмитажа (28°12′ ю.ш., 152°06′ в.д., 480 м над уровнем моря) на северо-востоке Квинсленда. Почву опытной площади кондиционировали за 6 месяцев до посева путем внесения 3,5 т га -1 гипса, 350 кг га -1 NatraMin (AgSolutions, Австралия) и 6 т га -1 откормочного навоза.
. За месяц до посева опытную площадь удобряли 220 кг га -1 GRAN-AM (20% азота, 24% серы, Incitec Pivot, Австралия) и 100 кг га -1 мочевины (46% азота). ).Участки были засеяны сеялкой точного высева 19 ноября 2015 г. Опытный образец был засеян на почти ровном участке на самомульчирующейся аллювиальной глине с высоким содержанием монтмориллонитовой глины (McKeown, 1978) с полным рыхлением почвы. Профиль влажности при посеве. Испытание не орошалось, но регулярные осадки в посевах и подпочвенные запасы предотвратили развитие значительной водной ограниченности. Приживаемость урожая была переменной из-за поверхностного затопления сразу после посева. Однако данные сравниваются на уровне квадратов выборки (подробности см. ниже), так что 30 квадратов выборки при каждом урожае можно по существу рассматривать как образцы потенциальной площади листа для разнообразного набора генотипов.
Во время посева были собраны точные наземные контрольные точки (GCP) с использованием портативного устройства GPS (Global Positioning System) с разрешением 1 см (Trimble XT, Trimble, Sunnyvale California).
Каждая из этих опорных точек была отмечена квадратной бетонной брусчаткой, окрашенной синими треугольниками, чтобы их было легко идентифицировать сверху.
миссии по сбору данных были проведены в разное критическое время в период роста урожая (таблица 1). Пробные квадратные срезы равномерно установленных участков двух центральных рядов (по 1 погонному метру от каждого) брали в пределах каждой делянки на двух разных стадиях: до цветения (ок.через 8 недель после посева или за 3 недели до цветения) и во время или в течение 1 недели после цветения.
Таблица 1 . Детали эксперимента, даты и собранные переменные.
Чтобы уменьшить влияние условий окружающего освещения, мы ограничили миссии по сбору данных ясными и безоблачными днями и проводили их примерно в середине утра.
В качестве платформы БПЛА использовался мультиротор 3D Robotics X8+ (Беркли, Калифорния). Преимущество X8+ состоит в том, что он может летать на очень малых высотах и с низкой скоростью, что имеет решающее значение для создания точной мозаики с высоким разрешением (Corrigan, 2015).
Высота полета для каждого полета была установлена на уровне 20 м, в результате чего расстояние выборки на земле (GSD) или размер пикселя составляли ~ 0,5 см.
Узкополосная мультиспектральная камера RedEdge™ (MicaSense, Сиэтл, Вашингтон) (http://www.micasense.com/rededge/), одновременно фиксирующая 5 полос на определенных нанометровых (нм) длинах волн, была установлена на платформе БПЛА. Были захвачены следующие полосы: синий (B: центральная длина волны 475 нм, ширина полосы 20 нм), зеленый (G: 560 нм, 20 нм), красный (R: 668 нм, 10 нм), красный край (RE: 717 нм, 10 нм). ) и ближней инфракрасной области (БИК: 840 нм, 40 нм) (рис. 2).Камера записывала изображения и данные GPS на локальную цифровую карту в виде 16-битных необработанных файлов GeoTIFF. Это позволило выполнить пост-геокоррекцию и создание мозаики. Горизонтальное поле зрения составляло 47,2 градуса при фокусном расстоянии 5,5 мм, обеспечивающем разрешение изображения 1280 × 960 пикселей.
Рисунок 2 . Мультиспектральные полосы камеры Micasense™ в спектре видимого и инфракрасного света. Пики коэффициента пропускания каждой полосы показаны в электромагнитном спектре на определенных нанометровых (нм) длинах волн.Синий (B: центральная длина волны 475 нм, ширина полосы 20 нм), зеленый (G: 560 нм, 20 нм), красный (R: 668 нм, 10 нм), красный край (RE: 717 нм, 10 нм) и ближний Инфракрасный (БИК: 840 нм, 40 нм). Источник: http://www.micasense.com.
Камера RedEdge включает коэффициенты заводской калибровки в каждом изображении для свойств цепи оптики, таких как дисторсия объектива и оптическое виньетирование. Atlas использует модель датчика CMOS (комплементарный металл-оксид-полупроводник) вместе с извлеченными областями из изображений калиброванной панели отражательной способности Ламберта для преобразования цифрового числа необработанного изображения (DN) в единицы отражательной способности.Затем эти изображения линейно комбинируются с помощью процесса фотограмметрии для оценки отражательной способности поверхности каждого пикселя на окончательной карте отражательной способности.
После каждого полета изображения для каждой из пяти длин волн загружались в облако ATLAS (MicaSense, Сиэтл, Вашингтон) (http://www.micasense.com/atlas/). Облачный сервис использует программное обеспечение Pix4d (PIX4d, Лозанна, Швейцария) (www.pix4d.com) и проприетарные алгоритмы для объединения изображений для создания многослойной орто-мозаики полета с географической привязкой для каждой даты.Сшитые изображения формата GEOTIFF для каждой полосы были загружены из ATLAS и импортированы в ArcGIS (https://www.arcgis.com/home/index.html) для наложения слоев и георектификации в GCP для каждой даты.
Чтобы можно было преобразовать DN в отражательную способность, в начале и в конце каждого полета было получено изображение белой панели отражающей способности, которое было загружено вместе с изображениями до обработки в облаке. В процессе создания мозаики использовалась отражательная способность эталонной панели, так что каждый из 5 загруженных файлов GeoTIFF представлял собой откалиброванную карту отражательной способности для соответствующей полосы.Значения пикселей пропорциональны % отражения, при этом значение пикселя 32 768 соответствует коэффициенту отражения 100% (65 535 соответствует коэффициенту отражения 200%). После того, как 5 каналов были сложены для одной даты полета, данные для каждой даты были географически скорректированы до высокоточных GCP. Затем значения пикселей были преобразованы в значения коэффициента отражения от 0 до 1 путем деления каждого пикселя на максимальное значение коэффициента отражения, равное 32 768. Пиксели с зеркальным отражением (например, яркое зеркальное отражение) и отсутствующие значения из мозаик были исключены при анализе путем маскирования.
После корректировки коэффициента отражения пикселей индексы для каждого участка и квадрата, вырезанного из каждой мозаики, были сгенерированы в программном обеспечении ArcGIS, а затем извлечены и сохранены в файл формата ASCII для сравнения с измеренными данными. Отражательная способность областей квадратных разрезов для любого отдельного полета может быть определена путем изучения последующего полета (после разреза), чтобы точно определить, где были сделаны разрезы.
На основе коэффициента отражения, измеренного датчиком RedEdge™, были рассчитаны два спектральных индекса.Эти индексы связаны со здоровьем и архитектурой растительного покрова (т. е. площадью листьев и биомассой). Наиболее широко используемый вегетационный индекс — Нормализованный разностный вегетационный индекс (NDVI). NDVI представляет собой простое нормализованное соотношение между диапазонами волн NIR и R и, следовательно, является сопоставимым показателем между датами (Rouse et al., 1974):
NDVI=(NIR-R)/(NIR+R) (1)Мы использовали пороговое значение NDVI > 0,5, чтобы зафиксировать отражение только от зеленых листьев и исключить отражение фона почвы. Этот порог оказывает наибольшее влияние, когда растения маленькие, т.е.е., во время измерения перед цветением.
Расширенный вегетационный индекс (EVI), относящийся к архитектуре полога, был рассчитан следующим образом (Huete et al., 2002):
EVI=2,5*[NIR-RNIR+6*R-7,5*B+1 ] (2) Значенияпикселей NDVI и EVI были объединены для получения отдельных показателей индекса делянки для каждой 30,4-метровой делянки сорго 2 на каждую дату полета. Максимальные (NDVI макс. , EVI макс. ) и средние (NDVI средние , EVI средние ) значения для каждого индекса были получены из этого временного ряда.
Чтобы оценить степень приживаемости урожая (т.е. количество растений, видимых после появления всходов), мы рассчитали покрытие урожая (СС, %) для каждого участка. Изображение RGB было сгенерировано из мозаики Micasense. Затем CC рассчитывали как долю зеленых пикселей на участок. Мы определяли пиксели как «зеленые», если их оттенок находился в диапазоне от 70 до 140 градусов.
Общее количество растений на всей площади делянки (т.е. 30,4 м 2 ) подсчитывали через 26 дней после посева (DAS).Площадь листа (LAI) измеряли деструктивно (квадраты выборки) на земле в течение вегетационного периода (предцветение, 54 DAS) и через 2 недели после начала цветения последнего генотипа (цветение, 83 DAS). В каждый момент отбора проб все растения в пределах 1,52 м 2 квадрата отбора проб (2 × 1 м от средних 2 рядов каждой 4-рядной делянки) срезали на уровне земли и доставляли в лабораторию для обработки. Растения разделяли на стебли, листья и метелки, основные стебли и побеги отдельно и сушили в печи с принудительной тягой при 80°С до достижения минимальной сухой массы, а затем взвешивали.Во время выборки цветения регистрировали количество стеблей (главный стебель и побеги вместе).
Для анализа различий в скорости старения между генотипами мы рассчитали нормализованный индекс разницы красных краев (NDRE) (Gitelson, Merzlyak, 1994; Sims, Gamon, 2002):
NDRE=(NIR-RE)/(NIR+RE) (3)Индекс NDRE сильно коррелирует с содержанием хлорофилла в растениях и поэтому является хорошим заменителем фотосинтетической способности (Гительсон и Мерзляк, 1994; Симс и Гамон, 2002; Гительсон и др., 2003). Разницу между NDRE при максимальном (пиковом) покрытии листвы и NDRE в период созревания (конечная дата вылета) использовали в качестве простого показателя скорости старения (RS NDRE). Чтобы проверить, полезен ли этот индекс для дифференциации между генотипами, которые, как известно, стареют (склонность к быстрому старению после цветения) или остаются зелеными (склонность к медленному старению после цветения), мы сгруппировали подмножество из 4 генотипов в 2 группы (стареющие). и оставайся зеленым).
Все анализы и графики были выполнены с использованием R (R Core Team, 2016).
Мы использовали простые линейные регрессии или логарифмические функции в зависимости от наилучшего соответствия между вегетационными индексами (т. е. NDVI и EVI) и данными измерений на уровне выборочных площадей.
Для проверки значительного влияния генотипа или группы на отдельные вегетационные индексы мы использовали линейные смешанные модели в пакете lme4 в R (Bates et al., 2015).
Общая форма используемых смешанных моделей:
, где отклик (вектор y) моделируется набором фиксированных эффектов (вектор β) и случайных эффектов (вектор μ), а ε — член случайной ошибки.Матрицы плана X и Z назначают наблюдениям фиксированные и случайные эффекты соответственно.
Для временных рядов NDVI или NDRE по сравнению с количеством дней после посева (DAS) для отдельных генотипов смешанная модель включала вектор β, включающий генотип (фактор с 10 уровнями) и DAS (фактор с 7 уровнями) (фиксированные эффекты) и вектор μ состоящий из блока (3 уровня) на графике и вектора ε, содержащего ошибку (случайные эффекты).
Чтобы проверить, оказывает ли группа (стареющая или остающаяся зеленой) значительное влияние на разницу между NDRE при максимальном покрытии кроны и NDRE при созревании, мы сначала протестировали смешанную модель с вектором β, включающим генотип (фактор с 4 уровнями) и группу ( фактор с 2 уровнями), μ включает блок (3 уровня) и вектор ε включает ошибку, но, поскольку генотип не оказывает существенного влияния, мы включили только группу в вектор β в окончательной модели.Предположения о нормальности были проверены с помощью графика квантиль-квантиль и, похоже, были соблюдены. Анализ ковариации был проведен с группой в качестве переменной, чтобы проверить, были ли наклоны отношения NDRE к количеству дней после посева в период после цветения значительно различаться между стареющими и остающимися зелеными генотипами.
Усреднено по всем участкам, значения NDVI (>0,5) и EVI агрегированы по всем 30.4 м 90 639 2 90 640 площади делянок составляли 0,75 и 0,37 соответственно на дату первого полета (рис. 3). Максимальные значения NDVI встречались между 68 и 83 DAS и колебались от 0,72 до 0,86 в зависимости от генотипа. По прошествии этого времени NDVI снизился из-за старения растений и достиг значений от 0,62 до 0,67 к концу эксперимента (133 DAS) (рис. 3). Средние значения EVI оставались относительно одинаковыми для всех, но последний день полета, когда EVI был значительно ниже (рис. 3).
Рисунок 3 .Блочные диаграммы, показывающие значения NDVI (—) и EVI (—), агрегированные по всем участкам площадью 30,4 м 90 639 2 90 640 и усредненные по всем 30 участкам за семь дат полета. Даты лёта: 12 января или 54 дня после посева (ДАС), 26 января (68 ДАС), 3 февраля (76 ДАС), 10 февраля (83 ДАС), 16 февраля (89 ДАС), 25 февраля (98 ДАС), 31 марта 2016 г. (133 DAS).
Из-за поверхностного затопления в первую неделю после посева, влияющего на всходы, покрытие культур варьировалось от 7 и 18% до 57 и 77% через 54 дня после посева (DAS) (12 января) и 76 DAS (3 февраля). ) соответственно (рис. 4).Фактическое количество растений колебалось от 36 до 204 растений на участок (30,4 м 2 ). Эта изменчивость дала нам возможность проверить достоверность использования NDVI для оценки растительного покрова в широком диапазоне растительных покровов. При агрегировании по всей площади участка NDVI (> 0,5) значительно и сильно коррелировал с растениями на участке ( R 2 = 0,58, RMSE = 0,03, рис. 5).
Рисунок 4 . Совокупный покров посевов, рассчитанный для целых участков, наложенный на видимое (узкополосное RGB) изображение эксперимента по селекции сорго, сделанное до цветения (верхнее изображение) или за неделю до цветения (нижнее).ПК варьировался от низкого (светло-зеленый) до высокого (темно-зеленый).
Рисунок 5 . Агрегированный NDVI для целых делянок при цветении по сравнению с общим количеством растений на каждой 30,4 м 2 делянке. Линейная функция: EVI = 0,0006*Растения + 0,71; R 2 : коэффициент регрессии; RMSE, среднеквадратическая ошибка; р — уровень статистической значимости. Сплошная линия — это аппроксимированная линейная функция через точки выборки (открытые кружки).
Максимальное покрытие посевов на уровне всего участка составляло в основном >30 и 50% на стадиях до цветения (изображение в январе) и на стадиях цветения (изображение в феврале) соответственно (рис. 4).
Значения индекса площади листа (LAI), полученные на квадратных участках выборки, варьировались от 0,71 до 4,01 (м 2 / м 2 ) перед цветением и увеличивались до 1,31–4,71 через 2 недели после цветения на всех участках.
Вегетативные индексы, полученные из пикселей, агрегированных по всей площади делянки как в период перед цветением, так и в период цветения, имели сильную линейную корреляцию с LAI из квадратных срезов (таблица 2).Корреляции были лучше для NDVI, чем для EVI, как видно из более высоких коэффициентов регрессии (R 2 ) и меньших среднеквадратических ошибок (RMSE). NDVI max также хорошо коррелировал с LAI на дату отбора образцов.
Таблица 2 . Отношения между NDVI (> 0,5) и EVI агрегированы по всем участкам (участок; 30,4 м 90 639 2 90 640 ) или только по квадратным площадям выборки (квадрат; 1,5 м 90 639 2 90 640 ) с индексом площади листьев (LAI) на уровне 54 (до цветения). ) и 83 (цветение) дня после посева.
При простом агрегировании пикселей по фактическим квадратным площадям выборки индексы растительности объясняли большую изменчивость LAI, на что указывает большее R 2 , но среднеквадратическая ошибка не всегда улучшалась (таблица 2).
Когда данные индекса площади листа из квадратных срезов и NDVI, агрегированные по всем делянкам, были объединены для дат выборки как до цветения, так и для периода цветения (всего 60 образцов), логарифмическая функция соответствовала данным немного лучше, чем линейная (среднеквадратическая ошибка 0.038 против 0,041 для логарифмического и линейного соответственно) (рис. 6).
Рисунок 6 . Совокупный NDVI для целых делянок по сравнению с LAI из квадратных срезов на каждой делянки как на дату выборки до цветения, так и на дату цветения вместе взятые. Логарифмическая функция NDVI = 0,15 ln(x) + 0,71; R2: коэффициент регрессии; RMSE, среднеквадратическая ошибка; р — уровень статистической значимости. Сплошная линия — подобранная функция через точки выборки (открытые кружки).
Нормализованный разностный вегетативный индекс (NDVI) (агрегированный по всему участку) постепенно увеличивался и достигал максимальных значений (>0.9; окрашены в синий цвет) к дате отбора проб цветения (83 DAS или 10 февраля) (рис. 7). После этой даты значения NDVI снизились примерно до 0,5 (светло-зеленый) из-за прогрессирующего старения листьев по мере приближения генотипов к зрелости.
Рисунок 7 . Нормализованный разностный вегетационный индекс (NDVI) для каждой даты по исследуемой территории в течение основного вегетационного периода. Черные разделительные линии обозначают границы участков, а белые замаскированные области представляют области, где были взяты пробные квадратные разрезы.
Значения NDRE длябыли намного ниже, но показывали аналогичную картину медленного увеличения примерно до 2 недель после цветения (83 DAS), а затем снижались как NDVI (рис. 8). Поскольку NDRE связан с хлорофиллом, различия в значениях NDRE от NDVI пикового полога (т. е. NDVI max ) до зрелости (дата последнего полета) связаны со скоростью старения. В исследование были включены генотипы, о которых известно, что они быстро стареют (стареющие генотипы; MR Buster и R955637), а также другие генотипы, которые имеют свойство оставаться зеленым, что означает, что они имеют более медленную скорость старения и сохраняют большую площадь зеленых листьев во время налива зерна по сравнению со стареющими типами. особенно при ограничении воды (зеленые генотипы R931945-2-2 и R931945-2-2TM) (рис. 8).
Рисунок 8 . NDVI avg (A) и NDRE avg (B) агрегированы по всей площади участка от цветения до созревания для четырех генотипов сорго, отличающихся по характеристикам сохранения зеленого цвета. MR Buster (коричневый) и R955637 (желтый) относятся к стареющим типам, тогда как R931945-2-2 (светло-голубой) и R931945-2-2TM (темно-синий) относятся к линиям с постоянным зеленым признаком. Точки представляют собой средние значения методом наименьших квадратов для NDVI и NDRE, соответственно, предсказанные линейной смешанной моделью.Черные вертикальные полосы представляют собой стандартные ошибки для трех повторов в каждый момент времени.
Когда эти генотипы были сгруппированы (т. е. группа, остающаяся зеленым: R931945-2-2 и R931945-2-2TM, и стареющая группа: MR Buster и R955637), RS NDRE (разница между NDRE при максимальном покрытии кроны и NDRE при уборке зрелости) был значительно выше для стареющей группы (0,19 против 0,13, 90 174 p 90 175 < 0,05, 90 174 n 90 175 = 12), что указывает на то, что эти генотипы стареют быстрее по сравнению с генотипами, классифицируемыми как генотипы, сохраняющие зеленый цвет.В соответствии с этим наклон взаимосвязи между NDRE и DAS от максимального NDRE до зрелости был значительно круче (-0,003 единицы в день) для стареющей группы по сравнению с группой, остающейся зеленой (-0,002 единицы в день) p <0,01, что указывает на то, что стареющие генотипы потеряли хлорофилл значительно быстрее, чем остающиеся зелеными генотипы (рис. 9).
Рисунок 9 . NDRE avg агрегировано по всему участку от максимального покрова до зрелости (последний полет) для стареющих (MR Buster и R955637; A ) и остающихся зелеными генотипов (R931945-2-2 и R931945-2-2TM; B ).Точки — это значения для отдельных графиков. Сплошные линии — это подобранные функции через точки выборки (открытые кружки).
Из-за разного количества растений на участках в этом пилотном исследовании мы смогли проверить пригодность вегетативных индексов для оценки процентного покрытия и LAI в диапазоне плотностей. Фактическое количество растений на участке площадью 30,4 м колебалось от 36 до 204 растений. Корреляции между фактическим количеством растений и процентным покрытием, рассчитанным с использованием NDVI, были значительными и умеренно сильными.Качество подгонки увеличивалось, когда применялась маскировка, а пиксели с NDVI ниже 0,5 (т. е. почва и неживые материалы) не учитывались.
Корреляции между вегетационными индексами и оценкой LAI по квадратам улучшились, когда значения индекса были агрегированы только по площади пробного квадрата, а не по всей площади участка. Агрегирование только по площади квадрата обеспечило более прямую корреляцию между индексом и LAI, избегая неоднородности растительного покрова на участке, связанной с переменным укоренением.Пробные вырубки были отобраны там, где растительный покров был более однородным, поэтому значения покрова на уровне участка и полученные значения вегетационного индекса отличались от значений, полученных только на выборочных вырубках. Следовательно, разумно предположить, что в более однородных испытаниях ожидаемая взаимосвязь должна быть аналогична найденной для квадратичных сравнений (таблица 2). Для подтверждения этих взаимосвязей проводятся дальнейшие эксперименты.
Вероятные ограничения могут существовать при применении этого подхода к другим местам и культурам.Например, использованный порог показал значительное улучшение статистического анализа, как и показатель EVI, но его полезность требует дальнейшего изучения. Кроме того, многократный сбор данных во время пилотного исследования демонстрирует потенциал этих методов для изучения динамики растительного покрова. Вероятным ограничением сравнения индексов за разные даты является то, что условия внешней освещенности могут различаться между полетами. Здесь это было ограничено полетами только в ясные безоблачные дни и в середине утра.Кроме того, NDVI менее чувствителен к таким изменениям, поскольку является индексом отношения.
В предыдущих исследованиях сообщалось о насыщении NDVI при более высоких значениях LAI (т. е. LAI > 4), и, таким образом, в густых растительных пологах использование EVI может быть предпочтительнее, чем NDVI (Huete et al., 2002; Myneni et al., 2002). Все наши экспериментальные участки были засажены с целевой плотностью популяции 5 растений на квадратный метр, а LAI при цветении колебался от 1,3 до 4,7. При объединении данных до антезиса и антезиса мы также наблюдали небольшое улучшение мощности предсказания при подборе логарифмической вместо линейной функции (рис. 6).Для оценки LAI на селекционных участках сорго с более высоким LAI также может быть лучше использовать EVI вместо NDVI.
Пиковые значения NDVI варьировались от 0,72 до 0,86, а конечные значения NDVI — от 0,62 до 0,67. В этом испытании конечные значения не были намного ниже максимальных значений, учитывая, что стресс от засухи не был существенным, а урожайность на однородных делянках превышала 9 т га -1 . Линии с признаком сохранения зеленого цвета, R931945-2-2 и R931945-2-2TM, имели более медленное снижение NDRE после цветения по сравнению с двумя стареющими генотипами, MR Buster и R955637.Свойство оставаться зеленым было связано с увеличением урожайности в условиях засухи после цветения (Borrell et al., 1999, 2000; Jordan et al., 2012), а также из-за частоты засухи после цветения в районах выращивания сорго. был активно отобран для участия в программах разведения австралийского сорго. Возможность отслеживать старение с течением времени поможет селекционерам в выборе для сохранения зеленого цвета в условиях засухи.
Селекция на урожайность при ограничении воды была в центре внимания селекции сорго в Австралии в течение последних трех десятилетий.Это вполне может объяснить, почему повышение урожайности сорго в засушливых условиях в настоящее время более чем вдвое превышает урожайность во влажных условиях (Potgieter et al., 2016). Однако существует потенциал для дальнейшего повышения урожайности в условиях ограниченных водных ресурсов путем улучшения соответствия площади листьев и динамики водопользования временным характеристикам засухи (Chapman et al., 2000). Представленный здесь подход дает возможность отслеживать LAI различных генотипов в течение всего вегетационного периода, тем самым предоставляя селекционерам информацию о динамике растительного покрова.Это поддержит ускоренную разработку и выпуск коммерческих гибридов, адаптированных к конкретным типам сред.
Помимо селекционеров, агрономы и растениеводы также получат доступ к информации о динамике растительного покрова, поскольку это позволит им оценить водопотребление и ожидаемую урожайность своих культур сорго по мере развития сезона. Помимо прямого влияния на использование воды сельскохозяйственными культурами (George-Jaeggli et al., 2017), LAI также относится к доле поглощенной фотосинтетически активной радиации (PAR) и, следовательно, является одним из наиболее важных атрибутов растительного покрова (Weiss et al., 2004; Садрас и Макдональд, 2012 г.; Сибли и др., 2014; Садрас и Кальдерини, 2015). LAI является важной входной переменной для моделей сельскохозяйственных культур, таких как APSIM (Keating et al., 2003), которые используются для прогнозирования урожайности в полевых и региональных масштабах (Lobell et al., 2015b). Усовершенствованием этой методологии будет возможность отслеживать LAI по мере его увеличения до максимального значения и путем точного учета кочанов, почвы и стареющих листьев оценивать LAI по мере его изменения во время наполнения зерна. Измерение LAI в течение всего сезона позволит использовать эти модели сельскохозяйственных культур для оценки сезонного роста сельскохозяйственных культур и потенциального водопотребления.
Помимо способности масштабировать фенотипирование от нескольких до тысяч селекционных участков, представленный здесь подход облегчит масштабирование фенотипирования от растения к делянке и в полевых масштабах и, таким образом, позволит промышленности максимизировать потенциал урожайности как на генетическом и агрономическом уровне.
AP и BG внесли равный вклад в эту рукопись. GH и DJ получили финансирование для исследования. AP, BG, SC, DJ и GH спланировали и разработали эксперименты.BG организовал сбор данных, а JWi, ME и KL собрали наземные и воздушные данные соответственно. AP, LS, JWa и KL обрабатывали изображения. BG и AP провели статистический анализ, интерпретировали результаты и подготовили рукопись при участии SC. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.
Это исследование финансировалось Центром передового опыта трансляционного фотосинтеза, Австралийским исследовательским советом (грант CE140100015), Фондом Билла и Мелинды Гейтс (грант OPPGD1197 iMashilla «Целевой подход к улучшению выращивания сорго в районах Эфиопии с недостатком влаги») и крупным Грант на оборудование и инфраструктуру «Платформа определения фенотипа для улучшения селекции растений» Университета Квинсленда.
Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Мы благодарим селекционеров сорго и сотрудников фермерских хозяйств Исследовательского центра Эрмитажа Департамента сельского хозяйства и рыболовства Квинсленда в Уорике за подготовку семян и посадку для испытаний, Мари Бутей-Паллас и временных сотрудников за помощь в сборе данных на местах, Коллин. Обратитесь за дизайном испытаний и советами по статистическому анализу, DuPont Pioneer и PacificSeeds за использование их гибридных семян и Габриэлем Торресом и Джастином Макаллистером из MicaSense за использование рисунка 2 и полезные комментарии к рукописи.Мы также хотели бы отметить вклад Австралийской корпорации исследований и разработок зерна и правительства Квинсленда в разработку зародышевой плазмы и текущее финансирование программы селекции сорго в Квинсленде.
Бейтс Д., Махлер М., Болкер Б. и Уокер С. (2015). Подгонка линейных моделей смешанных эффектов с использованием lme4. Дж. Стат. ПО 67, 48. doi: 10.18637/jss.v067.i01
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Беэри, О.и Пелед, А. (2006). Спектральные индексы для точного мониторинга сельского хозяйства. Междунар. J. Remote Sens. 27, 2039–2047. дои: 10.1080/01431160612331392950
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Боррелл А.К., Бидингер Ф.Р. и Сунита К. (1999). Оставаться зеленым связано с урожайностью рекомбинантных инбредных линий сорго, различающихся по скорости старения листьев. Междунар. Сорго Просо Newsl. 40, 31–34.
Академия Google
Боррелл, А.К., Hammer, G.L., and Henzell, R.G. (2000). Повышает ли поддержание площади зеленых листьев сорго урожайность в условиях засухи? II. Производство и выход сухого вещества. Растениеводство. 40, 1037–1047. doi: 10.2135/cropsci2000.4041037x
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Borrell, A.K., Mullet, J.E., George-Jaeggli, B., van Oosterom, E.J., Hammer, G.L., Klein, P.E., et al. (2014а). Адаптация к засухе сорго, остающегося зеленым, связана с развитием кроны, анатомией листа, ростом корней и поглощением воды. Дж. Экспл. Бот. 65, 6251–6263. дои: 10.1093/jxb/eru232
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Боррелл, А. К., ван Остером, Э. Дж., Маллет, Дж. Э., Джордж-Джегли, Б., Джордан, Д. Р., Кляйн, П. Е., и соавт. (2014б). Аллели Stay-green по отдельности повышают урожайность зерна сорго в условиях засухи, изменяя развитие полога и модели поглощения воды. Н. Фитол. 203, 817–830. doi: 10.1111/nph.12869
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Кандиаго, С., Ремондино, Ф., Де Гиглио, М., Дуббини, М., и Гаттелли, М. (2015). Оценка мультиспектральных изображений и индексов растительности для приложений точного земледелия по изображениям с БПЛА. Дистанционный датчик 7, 4026–4047. дои: 10.3390/rs70404026
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Чепмен, К.С., Мерц, Т., Чан, А., Джекуэй, П., Храбар, С., Дрексер, Ф.М., и соавт. (2014). Pheno-Copter: маловысотный автономный роботизированный вертолет с дистанционным зондированием для высокопроизводительного полевого фенотипирования. Агрономия 4, 279–301. doi: 10.3390/agronomy4020279
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Чепмен, С.К., Купер, М., и Хаммер, Г.Л. (2002). Использование моделирования урожая для создания генотипа по эффектам взаимодействия с окружающей средой для сорго в условиях ограниченных водных ресурсов. австр. Дж. Агрик. Рез. 53, 379–389. дои: 10.1071/AR01070
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Чепмен, С. К., Купер, М., Хаммер, Г. Л., и Батлер, Д. Г.(2000). Генотип по взаимодействию с окружающей средой, поражающий зерновое сорго. II. Частота различных сезонных моделей стресса от засухи связана с влиянием местоположения на урожайность гибридов. австр. Дж. Агрик. Рез. 51, 209–221. дои: 10.1071/AR99021
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Джордж-Джегли, Б., Мортлок, М.Ю., и Боррелл, А.К. (2017). Больше не всегда лучше: уменьшение площади листьев помогает сорго, остающемуся зеленым, медленнее использовать почвенную воду. Окружающая среда.Эксп. Бот. 138, 119–129. doi: 10.1016/j.envexpbot.2017.03.002
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Гительсон А.А., Гриц Ю. и Мерзляк М.Н. (2003). Взаимосвязь между содержанием хлорофилла в листьях и спектральной отражательной способностью и алгоритмы неразрушающей оценки хлорофилла в листьях высших растений. J. Физиол растений. 160, 271–282. дои: 10.1078/0176-1617-00887
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Гительсон, А.и Мерзляк, М. Н. (1994). Изменения спектральной отражательной способности, связанные с осенним старением листьев Aesculus hippocastanum L. и Acer platanoides L.. спектральные особенности и связь с оценкой хлорофилла. J. Физиол растений. 143, 286–292.
Академия Google
Гетц, AFH (2009). Три десятилетия гиперспектрального дистанционного зондирования Земли: личный взгляд. Дистанционный датчик окружающей среды. 113 (Прил. 1), С5–С16. doi: 10.1016/j.rse.2007.12.014
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Haboudane, D., Miller, J.R., Pattey, E., Zarco-Tejada, P.J., и Strachan, I.B. (2004). Гиперспектральные вегетационные индексы и новые алгоритмы прогнозирования зеленого LAI навесов сельскохозяйственных культур: моделирование и проверка в контексте точного земледелия. Дистанционный датчик окружающей среды. 90, 337–352. doi: 10.1016/jrse.2003.12.013
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Haghighattalab, A., Гонсалес Перес, L., Mondal, S., Singh, D., Schinstock, D., Rutkoski, J., et al. (2016). Применение беспилотных авиационных комплексов для высокопроизводительного фенотипирования крупных селекционных питомников пшеницы. Plant Methods 12, 35. doi: 10.1186/s13007-016-0134-6
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Хейнс, Дж. М. (2014). Дистанционное зондирование и фотограмметрия. Берлин; Гейдельберг: Springer-Verlag.
Академия Google
Хе, Дж., Ду, Ю.-Л., Ван, Т., Turner, N.C., Yang, R.-P., Jin, Y., et al. (2016). Экономное использование воды повышает урожайность сои ( Glycine max (L.) Merr.) в условиях засухи. С/х. Управление водой . 179, 236–245. doi: 10.1016/j.agwat.2016.07.008
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Huete, A., Didan, K., Miura, T., Rodriguez, E.P., Gao, X., и Ferreira, L.G. (2002). Обзор радиометрических и биофизических характеристик вегетационных индексов MODIS. Дистанционный датчикОкружающая среда. 83, 195–213. doi: 10.1016/S0034-4257(02)00096-2
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
МГЭИК (2014 г.). Изменение климата, 2014 г.: Обобщающий отчет. Вклад рабочих групп I, II и III в Пятый оценочный доклад Межправительственной группы экспертов по изменению климата . ред. Р. К. Пачаури и Л. А. Мейер. Женева: МГЭИК; Основная писательская команда.
Джордан, Д. Р., Хант, С. Х., Круикшенк, А. В., Боррелл, А. К., и Хенцелл, Р. Г. (2012). Взаимосвязь между свойством оставаться зеленым и урожайностью зерна у элитных гибридов сорго, выращенных в различных условиях. Растениеводство. 52, 1153–1161. doi: 10.2135/cropsci2011.06.0326
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Китинг Б.А., Карберри П.С., Хаммер Г.Л., Проберт М.Е., Робертсон М.Дж., Хольцворт Д. и др. (2003). Обзор APSIM, модели, предназначенной для моделирования сельскохозяйственных систем. евро. Дж. Агрон. 18, 267–288. doi: 10.1016/S1161-0301(02)00108-9
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Лелонг, C.C.D., Бургер, П., Джубелин, Г., Ру Б., Лаббе С. и Барет Ф. (2008). Оценка снимков с беспилотных летательных аппаратов для количественного мониторинга урожая пшеницы на небольших участках. Датчики 8, 3557–3585. дои: 10.3390/s8053557
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Лобелл Д. Б., Хаммер Г. Л., Чену К., Чжэн Б., Маклин Г. и Чепмен С. К. (2015a). Изменяющееся влияние засухи и теплового стресса на сельскохозяйственные культуры на северо-востоке Австралии. Глоб. Чанг. биол. 21, 4115–4127.doi: 10.1111/gcb.13022
Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
Лобелл Д. Б., Тау Д., Зайферт К., Энгл Э. и Литтл Б. (2015b). Масштабируемый спутниковый картограф урожайности. Дистанционный датчик окружающей среды. 164, 324–333. doi: 10.1016/jrse.2015.04.021
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
McKeown, FR (1978). Классификация земель Научной станции Эрмитажа . Отдел землепользования: Департамент первичной промышленности Квинсленда, Брисбен, Австралия.
Минени, Р. Б., Хоффман, С., Князихин, Ю., Приветт, Дж. Л., Гласси, Дж., Тиан, Ю., и соавт. (2002). Глобальные продукты площади листьев и доли растительности поглощают PAR из данных MODIS за первый год. Дистанционный датчик окружающей среды. 83, 214–231. doi: 10.1016/S0034-4257(02)00074-3
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Потгитер, А.Б., Лобелл, Д.Б., Хаммер, Г.Л., Джордан, Д.Р., Дэвис, П., и Брайдер, Дж. (2016). Тенденции урожайности сорго и пшеницы в различных условиях окружающей среды в Австралии. С/х. Лесной метеорол. 228–229, 276–285. doi: 10.1016/j.agrformet.2016.07.004
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Пратли, Дж. (2003). Принципы растениеводства . Мельбурн, Виктория: Издательство Оксфордского университета.
Академия Google
Основная группаR (2016 г.). R: Язык и среда для статистических вычислений. Вена: Фонд статистических вычислений R.
Роуз, Дж. Мл., Хаас, Р., Шелл, Дж.и Диринг, Д. (1974). «Мониторинг систем растительности на Великих равнинах с помощью ERTS», в 3d ERTS-1 Symp. , Том. 1 Раздел A (Вашингтон, округ Колумбия: Центр космических полетов имени Годдарда; НАСА), 309–317.
Академия Google
Садрас, В. О., и Кальдерини, Д. Ф. (2015). Физиология сельскохозяйственных культур . Лондон; Уолтем, Массачусетс; Сан-Диего, Калифорния: Academic Press.
Академия Google
Садрас, В. О., и Макдональд, Г. (2012). Эффективность водопользования зерновых культур в Австралии: принципы, контрольные показатели и управление .Кингстон, Виктория: Корпорация исследований и разработок зерна.
Академия Google
Сибли, А. М., Грассини, П., Томас, Н. Э., Кассман, К. Г., и Лобелл, Д. Б. (2014). Тестирование подходов дистанционного зондирования для оценки изменчивости урожайности на кукурузных полях. Агрон. Почвы Окружающая среда. Квал. 106, 24–32. doi: 10.2134/agronj2013.0314
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Симс, Д. А., и Гамон, Дж. А. (2002). Взаимосвязь между содержанием пигмента в листьях и спектральной отражательной способностью у широкого круга видов, структур листьев и стадий развития. Дистанционный датчик окружающей среды. 81, 337–354. doi: 10.1016/S0034-4257(02)00010-X
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Такер, CJ (1979). Линейные комбинации красных и фотографических инфракрасных лучей для наблюдения за растительностью. Дистанционный датчик окружающей среды. 8, 127–150. дои: 10.1016/0034-4257(79)
-0Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Винья, А., Гительсон, А. А., Нгуи-Робертсон, А. Л., и Пэн, Ю. (2011). Сравнение различных индексов вегетации для дистанционной оценки индекса площади зеленых листьев сельскохозяйственных культур. Дистанционный датчик окружающей среды. 115, 3468–3478. doi: 10.1016/j.rse.2011.08.010
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Вайс, М., Барет, Ф., Смит, Г.Дж., Джонкхир, И., и Коппин, П. (2004). Обзор методов определения индекса площади листьев (LAI) in situ : часть, I. I. Оценка LAI, ошибки и выборка. С/х. Лесной метеорол. 121, 37–53. doi: 10.1016/j.agrformet.2003.08.001
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Уайт, Дж.W., Andrade-Sanchez P., Gore M.A., Bronson K.F., Coffelt T.A., Conley M.M., et al. (2012). Феномика в полевых условиях для исследований генетики растений. Полевые культуры Res. 133, 101–112. doi: 10.1016/j.fcr.2012.04.003
Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google
Лейшманиоз, вызываемый простейшими паразитами рода Leishmania , представляет собой серьезную проблему здравоохранения во многих регионах мира.Отсутствие эффективных диагностических тестов по месту оказания помощи (POC), применимых в эндемичных районах с ограниченными ресурсами, является серьезным препятствием для эффективного лечения лейшманиоза и борьбы с ним. Разработка метода петлевой изотермической амплификации (LAMP) предоставила новый инструмент для разработки диагностического теста POC, основанного на амплификации ДНК патогена. LAMP не требует термоциклера, относительно недорог и прост в выполнении с высокой чувствительностью и специфичностью амплификации.В этом обзоре мы обсуждаем текущие технические разработки, приложения, диагностические характеристики, проблемы и будущее LAMP для молекулярной диагностики и эпиднадзора за паразитами Leishmania . Исследования с использованием анализа LAMP для диагностики лейшманиоза человека показали чувствительность от 80% до 100% и специфичность от 94% до 100%. Эти наблюдения позволяют предположить, что LAMP предлагает хороший метод молекулярной POC для диагностики лейшманиоза, а также легко применим для скрининга групп риска и москитов-переносчиков инфекции Leishmania в эндемичных районах.
Разработка чувствительных диагностических тестов по месту оказания медицинской помощи имеет жизненно важное значение для совершенствования программ Leishmania -инфекционного контроля и лечения. В этом обзоре представлена информация о разработке диагностического теста петлевой изотермической амплификации (LAMP) и освещаются последние достижения в области молекулярной диагностики лейшманиоза и потребности в будущих исследованиях. Кроме того, мы подробно изучаем будущий потенциал LAMP в качестве экспресс-теста по месту оказания медицинской помощи (в клинике и в полевых условиях) для диагностики и энтомологического мониторинга инфекции Leishmania , включая оценку программ борьбы с Leishmania – эндемичным области.
Образец цитирования: Nzelu CO, Kato H, Peters NC (2019) Изотермическая амплификация, опосредованная петлей (LAMP): усовершенствованный молекулярный метод для выявления инфекции Leishmania . PLoS Negl Trop Dis 13(11): e0007698. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007698
Редактор: Сима Рафати, Институт Пастера Ирана, ИСЛАМСКАЯ РЕСПУБЛИКА ИРАН
Опубликовано: 7 ноября 2019 г.
Copyright © 2019 Нзелу и др.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.Финансирование: Эта работа была поддержана за счет средств Стратегии исследования инфекций, воспалений и хронических заболеваний, вице-президента исследовательского отдела Университета Калгари (https://ucalgary.ca/iicd/) и Канадских институтов Исследования в области здравоохранения (http://www.cihr-irsc.gc.ca/e/193.html), предоставить MPO 142302 NCP. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.
Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.
Лейшманиоз представляет собой разнообразный спектр клинических синдромов, вызываемых более чем 20 видами облигатных внутриклеточных простейших паразитов рода Leishmania , и передается при укусе инфицированной самкой москита.Лейшманиоз является одной из наиболее запущенных и связанных с бедностью тропических болезней в мире [1]. Заболевание является эндемичным в 98 странах, от него страдают 12 миллионов человек во всем мире, при этом, по оценкам, 350 миллионов человек подвержены риску заражения [2]. К сожалению, в большинстве стран заболеваемость часто недооценивается в основном из-за невыявленных случаев, отсутствия доступа к медицинской помощи или занижения отчетности [3]. Различные виды Leishmania вызывают заболевания как у людей, так и у животных, а Leishmania часто называют зоонозом.После попадания на кожу Leishmania может вызвать легкие и атипичные типы кожного лейшманиоза (CL), деструктивного кожно-слизистого лейшманиоза (MCL) и смертельно опасного системного висцерального лейшманиоза (VL). Клинические проявления болезни во многом связаны с инфицирующим штаммом паразита. Учитывая, что лейшманиоз является новой и неконтролируемой болезнью в некоторых регионах и увеличивается в некоторых эндемичных районах, своевременная диагностика и лечение пациентов имеют первостепенное значение для сдерживания болезни.
Имеющиеся в настоящее время средства диагностики лейшманиоза можно разделить на три группы: паразитологическая, серологическая и молекулярная диагностика, каждая из которых имеет свои преимущества и недостатки. Традиционные паразитологические методы, включающие микроскопию и посев паразитов, остаются золотым стандартом диагностики. Хотя технически он специфичен, он обладает низкой чувствительностью, и лишь несколько медицинских центров в этой области способны культивировать паразитов. Серологические методы, сопоставимые по чувствительности с паразитологическими методами, доступны в виде твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) и экспресс-тестов (БДТ) на основе rK39 [4, 5], иммунофлуоресцентного теста на антитела (ИФАТ), вестерн-блоттинга и прямого реакция агглютинации (ДАТ) [6, 7].Однако методы серологической диагностики также имеют некоторые недостатки, такие как перекрестная реактивность и ложноположительные результаты [4, 6, 7]. Молекулярные методы представляют собой эффективную альтернативу указанным выше методам и обладают большей чувствительностью и специфичностью [6, 7]. Присутствие ДНК Leishmania в качестве молекулярного биомаркера инфекции можно эффективно использовать как у человека, так и у других млекопитающих-хозяев. Клинические образцы человека, такие как цельная кровь, моча, костный мозг, лимфатические узлы, сыворотка, лейкоцитарная пленка [6], аспираты или соскобы кожных поражений [8, 9], надежно использовались для обнаружения присутствия ДНК паразитов.Несмотря на очевидную доступность эффективных диагностических тестов, ограниченность ресурсов в эндемичных странах или отсутствие опыта у врачей и лаборантов в неэндемичных странах приводит либо к отсутствию диагностики, либо к задержкам и неточной диагностике. Следовательно, как в эндемичных, так и в неэндемичных регионах требуется чувствительный и специфический метод молекулярной диагностики. Одним из основных и широко используемых методов молекулярной диагностики является обнаружение ДНК Leishmania методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) [6, 7].Обнаружение ДНК возбудителя непосредственно в клинических образцах позволило сделать диагностику инфекции с большей аналитической точностью. Однако этот метод требует дорогостоящего оборудования, очистки ДНК, длительного времени диагностики и отсутствия применимости в полевых условиях, что препятствует использованию диагностики на основе ПЦР в условиях ограниченных ресурсов, эндемичных по заболеваниям. Чтобы преодолеть ограничения ПЦР, в 2000 году был разработан новый молекулярный метод, петлевая изотермическая амплификация (LAMP), как удобный и экономически эффективный диагностический инструмент диагностический инструмент как для эндемичных, так и для неэндемичных регионов.Преимущество LAMP заключается в отсутствии необходимости в капитальном оборудовании, упрощенных методах выделения ДНК, таких как кипячение и центрифугирование, обнаружении амплификации невооруженным глазом и использовании сухих реагентов, включая фермент полимеразу.
Несколько исследований показали полезность метода LAMP в качестве полезного инструмента для быстрого обнаружения патогенных агентов (бактерий, паразитов и вирусов) инфекционных заболеваний [9, 11–15]. Диагностические наборы LAMP разработаны также фирмой Eiken Chemical Co. (Япония) для африканского трипаносомоза человека (ААТ) [16], туберкулеза [17], малярии [18, 19] и лейшманиоза [20, 21]; и недавно диагностический набор LAMP для туберкулеза был одобрен Всемирной организацией здравоохранения [22].Компания Meridian Biosciences (Цинциннати, Огайо) также разработала анализ без центрифугирования под названием ген illumi для обнаружения малярии на уровне рода [23]. С момента появления LAMP в качестве простого и надежного теста амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) различные исследования показали ряд прототипов LAMP-анализов в области лейшманиоза. Здесь мы представляем обзор, текущее состояние, диагностическую эффективность и перспективы метода LAMP на молекулярной основе для лечения лейшманиоза, а также его перспективы в качестве инструмента ксеномониторинга/надзора в эндемичных районах.Вставка 1 показывает стратегию поиска и критерии отбора, использованные в этом обзоре. Ход включенных исследований графически представлен на рис. 1.
Мы провели поиск статей в PubMed, Embase, Web of Science, Google Scholar и Scopus по следующим ключевым словам: Leishmania Анализ LAMP; кожный лейшманиоз; молекулярная диагностика; ПЦР и ЛАМПА; диагностика лейшманиоза ; колориметрический краситель; паразитарная ДНК; лейшманиоз; кожно-слизистый лейшманиоз; висцеральный лейшманиоз; посткалаазарский кожный лейшманиоз; собачий лейшманиоз; и москитная муха, наблюдение, ксеномониторинг и другие родственные слова.
Критерии приемлемости включали следующее: оригинальные исследования, оценивающие тест LAMP; клинический кожный лейшманиоз, висцеральный лейшманиоз, посткалаазарский кожный лейшманиоз у человека, собачий лейшманиоз и обнаружение Leishmania у москитов в качестве соответствующих целевых условий; адекватная справочная классификация; и абсолютное количество истинно положительных, истинно отрицательных, ложноположительных и ложноотрицательных наблюдений, полученных на основании данных, представленных при диагностике лейшманиоза человека.Коммерческие и лабораторные тесты соответствовали требованиям. Точность теста LAMP суммировали как чувствительность и специфичность с 95% доверительными интервалами. Анализ был выполнен с использованием Review Manager ( RevMan ) версии 5 . 3 . Copenhagen : The Nordic Cochrane Center , The Cochrane Collaboration , 2014 .
Недавним достижением в молекулярной (на основе нуклеиновых кислот) диагностике стала разработка LAMP [10], среди прочих, таких как амплификация на основе последовательности нуклеиновых кислот (NASBA) и рекомбиназно-полимеразная амплификация (RPA). ) [24, 25].В методе LAMP используется ДНК-полимераза Bacillus stearothermophilus ( Bst ), обладающая как полимеразной, так и обратной транскриптазной активностью, и набор из четырех праймеров (два внутренних праймера с типичной длиной примерно 40–42 п.н. и два внешних праймера). , с типичной длиной примерно 17–20 п.н.), которые распознают шесть различных последовательностей ДНК-мишени, что делает их высокоспецифичными по отношению к мишени. Иногда добавление двух дополнительных праймеров (петлевого прямого праймера и петлевого обратного праймера с типичной длиной приблизительно 20 п.н.), называемых петлевыми праймерами, ускоряет реакцию амплификации, тем самым уменьшая необходимое время реакции [26].Разработка праймеров LAMP проста и может быть выполнена с помощью удобной онлайн-платформы: программное обеспечение Primer Explorer V4 (http://primerexplorer.jp/e), работающее в среде выполнения Java, продукт Eiken Chemical Co. LAMP обладает способностью амплифицировать несколько копий ДНК до 10 9 менее чем за 60 мин с высокой эффективностью [10]. Механизм реакции LAMP включает три основных этапа: инициацию, циклическую амплификацию и удлинение (рис. 2). Обычно реакция начинается со связывания внутренних праймеров, содержащих последовательности смысловой и антисмысловой цепей ДНК-мишени, после чего следует синтез ДНК с замещением цепи внешними праймерами (начальная стадия).Затем происходит стадия циклической амплификации и элонгации [10]. Одной из хороших особенностей LAMP являются свойства автоматического смещения цепи полимеразы Bst , что позволяет проводить реакцию амплификации с использованием нагревательного блока или обычной водяной бани, поддерживаемой при определенной температуре, без использования дорогостоящих термоциклеров. Появление осадка пирофосфата магния (побочный продукт амплификации ДНК) является положительным индикатором амплификации ДНК-мишени. Турбидиметрия в реальном времени облегчает количественную оценку матричной ДНК в реакции и позволяет анализировать мельчайшие количества ДНК.Кроме того, ампликон LAMP можно анализировать с помощью электрофореза в агарозном геле и/или простой колориметрической визуализации невооруженным глазом в закрытых системах детекции [27] и флуориметрии в реальном времени [21, 28]. Таким образом, основным преимуществом LAMP является его применение в полевых условиях или в условиях ограниченных ресурсов.
CL является наиболее распространенной клинической формой лейшманиоза во всем мире, характеризующейся наличием язвенных поражений, приводящих к обезображивающим и/или инвалидизирующим рубцам [2].КЛ эндемичен в тропиках и неотропиках и более чем в 70 странах мира, а 90% случаев приходится на семь стран: Афганистан, Алжир, Бразилию, Иран, Перу, Саудовскую Аравию и Сирию [29]. КЛ чаще всего ассоциируется с Leishmania ( Leishmania ) major , L . ( L .) тропика и L . ( L .) aethiopica видов в Старом Свете и несколько видов Leishmania — L .( L .) мексиканский , L . ( L .) amazonensis , L . ( Вианния ) braziliensis , L . ( V .) гуянский , L . ( V .) panamensis и L . ( V .) peruviana — в Новом Свете [30]. В некоторых регионах два и более вида часто симпатричны [31]. Виды, распространенные в Старом Свете, в большинстве случаев вызывают самоизлечивающиеся язвы, в то время как виды Нового Света, как известно, вызывают синдром, называемый американским тегументарным лейшманиозом, состоящий из КЛ и множества других проявлений, таких как МКЛ, а также диффузного и диссеминированного кожного лейшманиоза. лейшманиоз (ДКЛ или диффузный КЛ) [32].
Поскольку клинический спектр КЛ широк и может быть неправильно диагностирован как другие кожные заболевания, такие как кожные микозы, проказа, келоид, вульгарная волчанка или саркоидоз [33], дифференциальный диагноз может быть очень важен для лечения. В то время как микроскопия и культура остаются золотым стандартом для диагностики КЛ, чувствительность вариабельна и требует много времени, требуя технических знаний и значительной инфраструктуры. Метод, основанный на серологии, не очень полезен в диагностике КЛ из-за неопределяемых или низких титров антител.Многие методы молекулярной диагностики, которые позволяют использовать менее инвазивные образцы с большей чувствительностью и специфичностью, были широко разработаны для диагностики КЛ. В частности, в последние десятилетия для диагностики КЛ используется метод ПЦР, нацеленный на различные последовательности генов [34, 35]. ПЦР-платформы для КЛ демонстрируют специфичность (84–100%) и чувствительность (90–98%) [34, 36].
Первым LAMP-тестом на КЛ при биопсии кожи была универсальная обратная транскриптаза (RT-LAMP), нацеленная на консервативную область гена Leishmania рибосомной РНК (рРНК) 18S с пределом обнаружения инфекции 10 и 100 паразитов/мл [ 37].Недавно в различных исследованиях этот метод был разработан для различных приложений, особенно тех, которые основаны на генах 18S рРНК Leishmania и миникольцевой кинетопластной ДНК (кДНК) в странах, эндемичных по CL (таблица 1). Выбор гена 18S рРНК в большинстве тестов pan- Leishmania LAMP был обусловлен его высокой консервативностью среди видов Leishmania , в то время как было доказано, что ген кДНК обеспечивает высокую чувствительность по отношению к другим генам в сравнительных исследованиях из-за его большого количества копий. [38, 39].Совсем недавно анализ LAMP, нацеленный на ген цистеиновой протеазы B (cpb), также использовался для диагностики случаев КЛ в Тунисе [40]. Сравнительное исследование анализов pan- Leishmania LAMP с использованием праймеров, нацеленных на гены 18S рРНК и гистонов Leishmania , соответственно, с использованием очищенных ДНК видов, вызывающих КЛ — L . ( Л .) майор , Л . ( л .) тропика , л . ( L .) мексиканский , L .( V .) braziliensis , L . ( V .) гуянский , L . ( V .) panamensis – показал аналогичный предел обнаружения на уровне 0,01 паразита / мкл для обоих генов, но было обнаружено, что гистоновый праймер не способен амплифицировать все L . ( V .) Guyanensis и L . ( V .) braziliensis протестированных штаммов, что указывает на низкую гомологию последовательностей с некоторыми штаммами [39].Исследования показали полезность слюны пациента [41] и метода прямого кипячения LAMP [42] в диагностике КЛ. Было обнаружено, что метод кипячения не снижает чувствительности обнаружения Leishmania анализов LAMP [42, 43]. Кроме того, была продемонстрирована лампа Flinders Technology Associates (FTA)-LAMP для CL с чувствительностью обнаружения всего 0,01 паразита/мкл на клинических тканях, обнаруженных на картах FTA, полученных от пациентов в Перу [9]. Установленный анализ LAMP показал полезность карт FTA в качестве инструмента прямого отбора проб для диагностики CL и был сравним с использованием очищенной ДНК в качестве матрицы.Заявленный FTA-LAMP является дальнейшим усовершенствованием применения LAMP, поскольку он позволяет избежать необходимости обращения с жидкостями во время сбора и транспортировки проб, а также хранения хладагента/холода. Несмотря на то, что в нашем обзоре доступной литературы было выявлено лишь несколько исследований CL-LAMP на людях, диагностическая точность LAMP-тестирования на CL показала чувствительность 80–92% и специфичность 94–100% при биопсии ткани. в трех исследованиях [44–46] (рис. 3А). В целом, эти отчеты подтверждают потенциальную роль LAMP в качестве надежного диагностического теста на КЛ, который будет широко применяться как в эндемичных, так и в неэндемичных регионах.
Рис. 3. Заявленная точность диагностики LAMP при исследовании и тестировании с лесными участками.
(A) Кожный лейшманиоз (CL)-LAMP на биопсии ткани (B) Висцеральный лейшманиоз (VL)-LAMP на цельной крови. (C) VL-LAMP на лейкоцитарной пленке. (D) Коинфекция ВИЧ-VL-LAMP на цельной крови. (E) Пост-калаазарский кожный лейшманиоз (PKDL)-LAMP при биопсии ткани. FN, ложноотрицательный; FP, ложноположительный результат; TN: истинно отрицательный; ТП, истинно положительный.
https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007698.g003
ВЛ характеризуется лихорадкой, потерей веса, истощением и спленомегалией и приводит к летальному исходу, если его не лечить. VL вызывается L . ( L .) infantum (как в Новом, так и в Старом Свете) или L . ( L .) доновани (только в Старом Свете). Заболевание распространено в тропических регионах, причем более 90% всех случаев зарегистрированы в Индии, Бангладеш, Судане, Бразилии, Эфиопии и Южном Судане [47].Посткалаазарский кожный лейшманиоз (ПКДЛ) — осложнение ВЛ, характеризующееся пятнистыми, пятнисто-папулезными и узелковыми поражениями у пациентов, перенесших ВЛ. Показательно, что в межэпидемический период ВЛ пациенты, у которых развилась ПКДЛ, рассматриваются как потенциальные резервуарные хозяева паразита [48]. Таким образом, выявление и идентификация пациентов как с ВЛ, так и с ПКДЛ в эндемичных районах имеет первостепенное значение для борьбы с лейшманиозом.
Диагностика как ВЛ, так и ПКДЛ основывается на микроскопическом исследовании мазков тканей; однако этот метод имеет низкую чувствительность.Для ВЛ микроскопия имеет чувствительность 93–99 % для аспирата селезенки, 53–86 % для аспирата костного мозга и 53–65 % для аспирата лимфатического узла [49], в то время как для ПКДЛ она имеет чувствительность 67 %. –100 % для узловых поражений, 36–69 % для распространенных поражений и 7–33 % для макулярных поражений [50]. Серологические методы, такие как DAT, ELISA и тест-полоски rK39, обладают высокой чувствительностью, но сопряжены со своими проблемами, такими как невозможность различения симптоматических и бессимптомных случаев, перекрестная реактивность с другими заболеваниями и непостоянные результаты при ко-инфекции ВИЧ-ВН. случаи инфекции — и особенно неубедительны для диагностики PKDL [51–52].Как и в случае диагностики КЛ, было успешно показано, что несколько инструментов на молекулярной основе ПЦР обладают повышенной чувствительностью и точностью в диагностике ВЛ и ПКДЛ с использованием различных матриц [6, 35, 53]. Молекулярные тесты потенциально важны в случае коинфекции ВИЧ-ВН из-за низкого ответа антител у ВИЧ-инфицированных пациентов, что снижает чувствительность серологических тестов [54]. Среди трех форм лейшманиоза больше внимания уделялось разработке диагностики ВЛ на основе LAMP, и Фонд инновационной новой диагностики (FIND) также направил свои усилия на снижение бремени ВЛ с помощью инновационной методики LAMP (http:/ /www.finddiagnostics.org). Такой интерес к ВЛ неудивителен, поскольку недавние данные моделирования диагностики ВЛ показывают, что ранняя диагностика и лечение пациентов могут значительно снизить передачу заболевания в эндемичных районах [55]. Следовательно, для раннего обнаружения инфекционного агента потребуется простой и быстрый специфический тест, что, следовательно, делает LAMP идеальным тестом на ВЛ.
Видоспецифичные анализы LAMP на основе гена кДНК в значительной степени используются для диагностики ВЛ и ПКДЛ в эндемичных районах (таблица 1), а также родоспецифические LAMP для ВЛ либо на основе генов Leishmania 18S рРНК, либо генов ITS1 [ 28, 41], которые были внутренними анализами.Loopamp Leishmania Detection kit (Eiken Chemical, Япония), первый набор Leishmania LAMP, который поставляется в готовом к использованию формате с праймерами, нацеленными как на миникольца 18S рРНК, так и на миникольца кДНК, характерные для рода Leishmania , также содержит была оценена для диагностики ВЛ [20]. Не было выявлено существенных различий между чувствительностью или специфичностью теста набора LAMP на образцах цельной крови и лейкоцитарной пленки, обработанных либо простым методом кипячения и центрифугирования, либо коммерческими наборами QIAgen для ВЛ в Судане [20].Аналогичное исследование показало, что LAMP, выполненная на ДНК, выделенной из цельной крови, имеет хорошую чувствительность по сравнению с микроскопией высокоинвазивных образцов биопсии [39]. Сообщалось, что диагностическая точность LAMP-тестирования на ВЛ была высокой (чувствительность 80–100% и специфичность 96–100%) во всех исследованиях, независимо от тестируемого образца (цельная кровь, лейкоцитарная пленка) [14, 20, 37, 39]. , 44, 56–59] (рис. 3В и 3С). Эффективность амплификации LAMP при обнаружении инфекции Leishmania в нескольких менее или неинвазивных источниках ДНК, таких как слюна и периферическая кровь [41], важна для снижения вероятности ложноотрицательного результата.Кроме того, LAMP может быть особенно важен для пациентов с коинфекцией вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Было доказано, что у пациентов, страдающих как ВИЧ, так и ВЛ, LAMP обладает хорошей диагностической эффективностью со 100% (95% ДИ, 59–100%) чувствительностью и 100% (95% ДИ, 86–100%) специфичностью [39]. , 41] (рис. 3D). Два исследования обеспечили диагностическую точность LAMP-тестирования на PKDL в биоптатах тканей [44, 57]. Чувствительность и специфичность были отмечены как высокие (97% и 100% соответственно) в обоих исследованиях (рис. 3Е).Кроме того, на стадиях после лечения ВЛ и ПКДЛ LAMP потенциально можно использовать для оценки излечения [44]; однако ранее проведенное исследование выявило неспособность LAMP амплифицировать пациентов после лечения, когда количество паразитов падало до чрезвычайно низкого уровня, примерно 10 паразитов/мл [37]. Изменение предела обнаружения или чувствительности LAMP может быть связано с выбранными праймерами и областью-мишенью, задействованными видами Leishmania и используемыми методами выделения ДНК.В совокупности LAMP продемонстрировал очень хорошие диагностические характеристики для ВЛ и ПКДЛ — с высокой чувствительностью и специфичностью, аналогичной методам ПЦР, — и стал многообещающим тестом для определения риска для скрининга групп риска и диагностики ВИЧ-ВН, а также для оценки лечения ВЛ и ПКДЛ в эндемичных районах.
Лейшманиоз собак (CanL) является важным зоонозным заболеванием, в основном вызываемым L . ( L .) infantum , что связано с долгой историей дружеских отношений между собаками и людьми, а также с москитами-переносчиками.Болезнь существует примерно в 50 странах из 98 стран, где лейшманиозы человека являются эндемичными, поражая в основном три очага: Китай, бассейн Средиземного моря и Бразилию [60]. Хотя L . ( L .) infantum был идентифицирован как основной этиологический агент CanL в Старом Свете [61], в Новом Свете другие виды, такие как L . ( Л .) чагаси ( инфантум ), Л . ( L .) мексиканский , L .( L .) amazonensis и L . ( V .) braziliensis могут быть включены в качестве потенциальных этиологических агентов [60, 62]. Инфекция собак Leishmania имеет два последствия: как резервуар лейшманиоза человека и как причина тяжелого заболевания у собак, которое обычно приводит к летальному исходу при отсутствии лечения [63]. Инфицированные собаки играют важную роль в передаче лейшманиоза и, как таковые, представляют реальную угрозу для неинфицированных собак и людей в эндемичных районах, где присутствуют переносчики москитов.Симптоматические собаки имеют клинические признаки, такие как периферическая лимфаденопатия, потеря веса, папулезный, узелковый дерматит, снижение аппетита, вялость и спленомегалия [60, 64]. Диагноз CanL сложен из-за его вариабельных клинических проявлений и отсутствия симптомов на ранней стадии инфекции. Таким образом, надежный, точный и быстрый диагностический тест необходим для раннего лечения инфицированных собак и предотвращения зоонозной передачи паразита Leishmania людям в эндемичных районах.Диагноз CanL существенно не отличается от такового у людей; несколько прямых методов (культура паразитов и микроскопия) и непрямых методов (серологические и молекулярные тесты) легко доступны для диагностики CanL.
Паразитологические и серологические тесты имеют ограничения в диагностике CanL, особенно у бессимптомных собак или при ранней инфекции [65]. Хотя паразитологическая диагностика является окончательной методологией обнаружения, а аспираты селезенки считаются методом выбора среди лимфатических узлов и костного мозга для диагностики CanL [66], CanL часто диагностируется путем обнаружения специфических антител против паразитов Leishmania с использованием серологических методы.Однако серологические тесты (DAT, IFAT, ELISA) имеют некоторые недостатки, такие как перекрестная реакция с паразитами Trypanosoma , видами, вызывающими КЛ, и другими гемопаразитами; и ложные результаты при низких титрах или случаях иммунологической анергии [67]. Тем не менее, ПЦР со всеми ее вариантами имела наибольший успех благодаря высокой чувствительности (от 89% до 100%) и специфичности (от 95% до 100%) в диагностике CanL [68–71].
Несколько исследований показали полезность LAMP в диагностике CanL (таблица 1).А Л . ( L .) Infantum -специфический анализ LAMP был успешно разработан, нацеливаясь на мультикопийный ген cpb для обнаружения паразитов в крови 75 собак с использованием очищенной ДНК [72]. LAMP показал чувствительность 54,2% и специфичность 80%, и результаты были сопоставимы с гнездовой ПЦР, но имели более низкую чувствительность к IFAT (88,5%), которая, напротив, показала более низкую специфичность (45%) [72]. Дальнейшее исследование сравнило эффективность L на основе кДНК. ( л .) infantum -специфический анализ LAMP на образцах конъюнктивальных мазков с помощью обычной ПЦР, ELISA (сыворотка) и микроскопии (костный мозг) и обнаружил, что LAMP выявляет 61,3% инфицированных собак, что аналогично ПЦР (58,6%) и значительно выше чем ИФА (40,5%) и микроскопия (10,8%) [73]. Однако наборы праймеров kDNA LAMP, разработанные на основе L . ( L .) infantum Штамм , выделенный в Китае, не амплифицирует штаммы из других стран и поэтому не подходит для использования в других эндемичных районах.Кроме того, исследование показало, что неинвазивный сбор образцов привел к высокой популярности среди владельцев собак, что похвально для контроля CanL. Эти исследования дают примеры того, как LAMP может быть реализована для выявления в полевых условиях и раннего лечения CanL.
Молекулярный ксеномониторинг (MX) – это скрининг гематофагов на наличие генетического материала патогена (ДНК/РНК) с использованием молекулярных анализов.Москиты Phlebotomine являются предполагаемыми переносчиками лейшманиозов, и около 800 видов зарегистрировано в пяти основных родах: Phlebotomus и Sergentomyia в Старом Свете и Lutzomyia , Brumptomyia и
51Warileya6 в Новом Свете. [74]. Однако предполагаемыми переносчиками Leishmania являются только виды, принадлежащие к родам Phlebotomus и Lutzomyia [74, 75]. Распространение лейшманиоза во многом зависит от распределения переносчиков москитов.Таким образом, энтомологический мониторинг инфекции Leishmania в эндемичных по лейшманиозу районах дает эпидемиологические преимущества для прогнозирования риска и распространения заболеваний, оценка которых зависит от надежной идентификации инфицированных москитов [27]. Кроме того, оценка уровня инфицирования переносчика может служить индикатором изменения интенсивности передачи и оценки программ борьбы [27].До сих пор обнаружение паразитов Leishmania в отдельных москитах в основном основывалось на вскрытии и микроскопическом исследовании отдельных мух, что технически сложно, трудоемко и занимает много времени, особенно когда необходимо исследовать большое количество образцов из-за низкого содержания Leishmania. уровень инфицирования москитов (0.01–1%), даже в эндемичных районах [76]. Чтобы преодолеть эти технические ограничения, в последние три десятилетия молекулярные подходы (форматы ПЦР) все чаще используются для обнаружения ДНК Leishmania у отдельных или объединенных москитов [76, 77]. Интересно, что LAMP также оказался хорошим инструментом MX для получения информации о распространении или распространении лейшманиоза. Кроме того, с точки зрения рентабельности и полевых условий LAMP предлагает некоторые преимущества по сравнению с ПЦР в качестве полезного метода наблюдения и эпидемиологических исследований лейшманиоза в эндемичных районах.Первой установленной LAMP для быстрого массового скрининга отдельных москитов на инфекцию Leishmania была универсальная LAMP на основе 18S рРНК Leishmania с предварительным добавлением малахитовой зелени (MG) закрытой системы обнаружения, которая может обнаруживать 0,01 паразита [27]. . Результаты полевой MG-LAMP с использованием грубой матрицы москитов без очистки ДНК для обнаружения ДНК Leishmania (рис. 4) были сопоставимы с результатами классической микроскопии и ПЦР. Было обнаружено, что LAMP является высокопроизводительным скрининговым инструментом для обнаружения зараженных Leishmania видов москитов Lutzomyia (8 из 397 пойманных в полевых условиях мух) в эндемичных районах Эквадора [27].Другое исследование подтвердило установленный LAMP для индивидуального скрининга 150 пойманных в дикой природе москитов из эндемичных районов Ирана и показало, что LAMP на основе 18S рРНК обнаружил 10 Leishmania ДНК-положительных москитов ( Sergentomyia baghdadis , S . sintoni и Phlebotomus papatasi ) [78]. Аналогичное исследование также экспериментально подтвердило применимость потенциального поля MG-LAMP для обнаружения L . martiniquensis ДНК москитов в Таиланде; однако ДНК Leishmania не была обнаружена с помощью LAMP и ПЦР при применении к 380 пойманным в полевых условиях мухам, вероятно, из-за низкого уровня заражения в районе исследования [79].Кроме того, эффективность MG-LAMP была дополнительно подтверждена с использованием очищенной ДНК из пулов москитов, и было обнаружено, что он потенциально может использоваться для энтомологического наблюдения за CL в Колумбии со 100% чувствительностью и 96,8% специфичностью [80]. Действительно, эти опубликованные исследования показали потенциальную полезность LAMP для массового скрининга москитов в Старом и Новом Свете. Важно отметить, что LAMP позволяет немедленно в режиме реального времени оценить присутствие паразитов Leishmania в эндемичных очагах, что демонстрирует возможность его интеграции в качестве простого и экономичного молекулярного инструмента для мониторинга или эпиднадзора за инфекциями и идентификации переносчика. разновидность.
Для качественного обнаружения ампликонов LAMP доступен широкий спектр подходов. Амплифицированные продукты могут быть обнаружены визуально с использованием нескольких параметров, включая мутность, флуоресценцию и цвет невооруженным глазом и/или УФ-светом (таблица 2). После электрофореза в агарозном геле открытая система обнаружения обычно используется в качестве подтверждающего анализа продуктов LAMP, которые выглядят как структуры, похожие на цветную капусту, с множеством петель.Наличие мути (осадок белого цвета) в образце из побочных продуктов амплификации использовали как индикатор положительной реакции ДНК LAMP Leishmania , а отсутствие мутности свидетельствовало об отрицательной реакции LAMP [43, 56]. Однако мутность трудно различить, и она нестабильна с течением времени. В качестве альтернативы мутности для прямого обнаружения Leishmania DNA LAMP-положительных образцов использовали интеркалирующие флуоресцентные красители, такие как кальцеин [73], SYBR Green I [57, 78], флуоресцентные детектирующие реагенты (FDR) (Eiken) [37]. , 43], которые технически неудобны из-за необходимости наличия УФ-осветителя для различения результатов теста и могут неспецифически связываться с любой двухцепочечной ДНК, даже с праймерами-димерами, что приводит к неправильной интерпретации результатов [81].Кроме того, для анализа на основе флуоресценции требуется специальное оборудование, такое как светодиодные осветители [21], чтобы можно было считывать флуоресцентные красители или использовать флуориметрию в реальном времени [21, 28]. Использование специализированного оборудования для визуализации результатов LAMP снижает универсальность LAMP и приводит к увеличению общей стоимости анализа LAMP, что может препятствовать его использованию в странах с ограниченными ресурсами. С другой стороны, несмотря на заявленную хорошую чувствительность, SYBR Green I может ингибировать реакцию LAMP, если его добавить перед изотермической инкубацией.Следовательно, краситель необходимо вводить после реакции LAMP, что требует открытия пробирки LAMP или обработки после амплификации (открытая система обнаружения), что представляет собой риск загрязнения и обычно приводит к ложноположительным результатам. Недавние исследования показали использование SYBR Green I, помещенного на внутреннюю сторону крышки реакционной пробирки в анализе с закрытой лампой; однако анализ требует дополнительной стадии короткого вращения после реакции LAMP для распознавания ампликонов [44, 58]. Обнаружение ампликона с предварительным добавлением FDR исключает открытие пробирок и уменьшает проблемы загрязнения; однако FDR имеет низкую чувствительность обнаружения [82] и является дорогостоящим [37].Колориметрические красители для обнаружения LAMP, такие как гидроксинафтоловый синий (HNB) и MG, также использовались для визуализации невооруженным глазом положительных продуктов LAMP в закрытых системах. Добавление красителей HNB и MG в реакционную пробирку LAMP до амплификации исключает открытие пробирок и полностью устраняет проблемы загрязнения [9, 27]. Краситель HNB меняет цвет с фиолетового на небесно-голубой [82] и требует от оператора различать положительные и отрицательные цветовые результаты, что может быть неоднозначным.Напротив, распознавание сигналов МГ отличается высокой чувствительностью, система дает четкое различие между позитивами (светло-голубой цвет) и негативами (бесцветный) на основе визуализации невооруженным глазом, и интерпретация независимым наблюдателем не требуется [9, 27, 41, 80]. Продукты MG-LAMP стабильны, поэтому их можно хранить для целей учета. Несколько исследований показали надежность, высокую чувствительность и широкую применимость закрытой системы обнаружения LAMP на основе MG для Leishmania и других целей.МГ использовали для обнаружения ДНК Leishmania в неочищенном экстракте москита Lutzomyia в Эквадоре [27]; ткань пациента, отмеченная на FTA-карте в Перу [9]; биопсия крови, слюны и тканей в Таиланде [41]; прямые мазки и москиты в Колумбии [80]. В совокупности включение закрытого анализа LAMP открывает новые перспективы для улучшения выявления инфекций, а также позиционирует LAMP как быстрый одношаговый инструмент молекулярной диагностики и ксеномониторинга лейшманиоза и других заболеваний.
Помимо технической осуществимости и производительности, основной проблемой, связанной с широкомасштабным и рутинным внедрением молекулярной диагностики, является ее экономическая эффективность. LAMP доказал свою применимость для обнаружения в полевых условиях, что потенциально устраняет необходимость в дорогостоящих наборах для очистки ДНК, термоциклерах и гель-электрофорезе. Заявленная стоимость Leishmania LAMP варьируется от менее 1 до 3 долларов США.50 за тест [37, 43], по сравнению с 12 долларами США за кПЦР, 2,50 долларов США за полиморфизм длины рестрикционных фрагментов ПЦР (ПЦР-ПДРФ) [34, 37], 1,5–2,5 долларов США за DAT, около 1 доллара США за основанный на rk39 иммунохроматографический-ДЭТ [83] и менее 1 доллара США за микроскопию за тест. Некоторые исследования предполагают, что использование очень дешевого колориметрического красителя, такого как MG [9, 80], для визуализации ампликона LAMP вместо флуоресцентного детектирующего реагента Эйкена [37] и термообработанных образцов в качестве источника матричной ДНК [41–43, 58]. ] может дополнительно снизить стоимость теста.Исследование показало, что анализ малярии LAMP с использованием термообработанной крови стоит от 0,40 до 0,70 долларов США, что ниже, чем доступные в настоящее время ДЭТ [13]. Хотя Leishmania -ДЭТ имеет стоимость, аналогичную микроскопии при использовании в референтных центрах/клиниках, LAMP представляется более подходящим и экономически эффективным во время сезонов или вспышек CL, когда его способность обрабатывать несколько тестов одновременно может быть максимальной [84]. ]. Более того, снижение стоимости LAMP расширит возможности ее применения, особенно в странах с ограниченными ресурсами, эндемичных по лейшманиозу.
Быстрое время выполнения работ также является важным аспектом любого теста, и пациентам и врачам требуется тест, который может быстро дать результат для оперативного лечения. Время практического получения результатов для закрытой LAMP составляет 30–60 минут [9, 20, 44] по сравнению с 3–6 часами для большинства анализов ПЦР и 10–20 минутами для rK39-RDT [83]. LAMP, будучи намного быстрее, чем ПЦР-анализ, относится к категории высокоэффективных, ориентированных на результат МАНК, которые будут поддерживать инициативы по элиминации лейшманиоза.
Разработка и применение метода LAMP для диагностики случаев лейшманиоза в эндемичных районах соответствует недавней глобальной тенденции поиска быстрых тестов POC для контроля инфекционных заболеваний.LAMP представляется идеальным диагностическим тестом, подходящим для выявления забытых и забытых в мире тропических болезней, включая лейшманиоз. Кроме того, он соответствует руководящим принципам, установленным Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), согласно которым диагностика для развивающихся стран должна быть ГАРАНТИРОВАННОЙ: доступной, точной, конкретной, удобной для пользователя, быстрой и надежной, не требующей оборудования и доставляемой конечным пользователям [85]. ]. В этом обзоре мы обобщили диагностическую эффективность и последние достижения с использованием анализа LAMP для обнаружения Leishmania в человеческих CL, VL, PKDL, CanL и москитах.Основываясь на текущем обзоре и обсуждении, следует рассмотреть следующие моменты. 1) Сделать диагностические методы ориентированными на пациента (в клинике и в полевых условиях) было основной целью появления LAMP в качестве POC-теста; поэтому разработанные методы количественной диагностики LAMP неприменимы в качестве тестов POC, поскольку они требуют относительно дорогого оборудования и персонала. Количественные анализы хороши для специальных целей, таких как исследования. 2) чувствительность и специфичность LAMP во многом зависят от используемых наборов праймеров; следовательно, при разработке праймеров необходимо соблюдать осторожность.Несмотря на то, что сложно выбрать правильную и подходящую мишень для амплификации (либо высококонсервативный регион, либо видоспецифичный целевой сайт), крайне важно убедиться, что анализ амплифицирует предсказанную мишень и является специфичным, что может потребовать некоторых предварительная экспериментальная оптимизация перед окончательным выбором праймера. Хотя программное обеспечение Primer Explorer можно использовать для разработки наборов праймеров, успешные праймеры можно создавать вручную, даже если предпочтительные целевые сайты не выбраны программным обеспечением.3) Одной из наиболее привлекательных особенностей LAMP является способность преодолевать потенциальные ингибиторы в неочищенных матрицах. Использование кипяченых клинических образцов [41–43], прямого лизиса крови [58] и неочищенного экстракта москитов [27] сокращает время, стоимость и потребность в обширной лабораторной инфраструктуре. Стабильность ДНК-мишени в неочищенном экстракте москита, хранящемся при температуре -20°C в течение месяцев/лет, была зарегистрирована [27], но не сообщалось о кипячении надосадочной жидкости (кипячение и центрифугирование или Direct Boil-LAMP).Следовательно, важно разработать буферы, которые могут стабилизировать ДНК в супернатанте, чтобы обеспечить согласованность последующей амплификации, прежде чем на нее можно будет полагаться в качестве матрицы. 4) Высокий риск переходящего загрязнения, который часто приводит к ложноположительным результатам в предположительно отрицательных контролях, является серьезной проблемой LAMP. Ампликоны обычно стабильны, поэтому может произойти непреднамеренное переносное загрязнение. Рекомендуется использовать закрытую систему обнаружения конечной точки, чтобы избежать контаминации после амплификации.5) Набор Loopamp Leishmania Detection Kit, который находится в готовом к использованию формате, имеет дополнительное преимущество в виде высушенных реагентов, включая праймеры для родов Leishmania , и имеет срок годности один год при хранении от 1 до 30 °C (Eiken) — дальнейшее развитие LAMP. Кроме того, для реакции амплификации был продемонстрирован безэлектродный стабильный тепловой блок на основе экзотермических химических реакций и материала с фазовым переходом [86], а также было предложено использование перезаряжаемых солнечных батарей в качестве альтернативного источника энергии [81].Тем не менее, разработка согласованной стандартизированной интегрированной системы от простого сбора и сохранения образцов, подготовки матриц и платформы амплификации до закрытого блока обнаружения для конечного использования будет иметь важное значение для полевых и клинических испытаний даже в самых отдаленных сельских эндемичных районах. . 6) Важно подчеркнуть, что положительный результат LAMP всегда следует интерпретировать в сочетании с клиническими патологическими оценками. Сосредоточение внимания на вышеупомянутых моментах, несомненно, улучшит применение LAMP в диагностике лейшманиоза.Важно отметить, что LAMP остался в качестве потенциального экспресс-теста для диагностики и энтомологического мониторинга инфекции Leishmania в эндемичных районах.
1. Лопес-Отин С., Бласко М.А., Партридж Л., Серрано М., Кремер Г. Признаки старения. Клетка. 2013; 153:1194–1217.
2. Franceschi C, Campisi J. Хроническое воспаление (воспаление) и его потенциальный вклад в возрастные заболевания. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2014; 69: Приложение 1. S4–S9.
3. Франчески К., Гараньяни П., Парини П., Джулиани К., Санторо А.Воспаление: новая иммунометаболическая точка зрения на возрастные заболевания. Нат Рев Эндокринол. 2018; 14: 576–590.
4. Dimri GP, Lee X, Basile G, Acosta M, Scott G, Roskelley C, Medrano EE, Linskens M, Rubelj I, Pereira-Smith O. Биомаркер, который идентифицирует стареющие клетки человека в культуре и в стареющей коже в виво . Proc Natl Acad Sci U S A. 1995; 92:9363–9367.
5. Кампизи Дж., д’Адда ди Фаганья Ф. Клеточное старение: когда с хорошими клетками происходят плохие вещи.Nat Rev Mol Cell Biol. 2007 г.; 8: 729–740.
6. Горонзи Дж.Дж., Вейанд С.М. Понимание иммуносенесценции для улучшения реакции на вакцины. Нат Иммунол. 2013; 14:428–436.
7. Goronzy JJ, Fulbright JW, Crowson CS, Poland GA, O’Fallon WM, Weyand CM. Значение иммунологических маркеров в прогнозировании реакции на вакцинацию против гриппа у пожилых людей. Дж Вирол. 2001 г.; 75:12182–12187.
8. Гибсон К.Л., Ву Ю.К., Барнетт Ю., Дагган О., Вон Р., Кондеатис Э., Нильссон Б.О., Викби А., Киплинг Д., Данн-Уолтерс Д.К.Разнообразие В-клеток уменьшается в пожилом возрасте и коррелирует с плохим состоянием здоровья. Стареющая клетка. 2009 г.; 8:18–25.
9. Ван Дуин Д., Моханти С., Томас В., Гинтер С., Монтгомери Р.Р., Фикриг Э., Аллоре Х.Г., Меджитов Р., Шоу А.С. Возрастной дефект функции TLR-1/2 человека. Дж Иммунол. 2007 г.; 178:970–975.
10. Panda A, Qian F, Mohanty S, van Duin D, Newman FK, Zhang L, Chen S, Towle V, Belshe RB, Fikrig E, et al. Связанное с возрастом снижение функции TLR в первичных дендритных клетках человека предсказывает ответ на противогриппозную вакцину.Дж Иммунол. 2010 г.; 184:2518–2527.
11. Монтгомери Р.Р., Шоу А.С. Парадоксальные изменения врожденного иммунитета при старении: последние достижения и новые направления. Дж. Лейкок Биол. 2015 г.; 98:937–943.
12. Renshaw M, Rockwell J, Engleman C, Gewirtz A, Katz J, Sambhara S. Передний край: нарушение экспрессии и функции Toll-подобных рецепторов при старении. Дж Иммунол. 2002 г.; 169:4697–4701.
13. Qian F, Wang X, Zhang L, Chen S, Piecychna M, Allore H, Bockenstedt L, Malawista S, Bucala R, Shaw AC, et al.Связанное с возрастом повышение уровня TLR5 приводит к усилению воспалительных реакций у пожилых людей. Стареющая клетка. 2012 г.; 11:104–110.
14. Лим Дж.С., Нгуен К.С., Хан Дж.М., Джанг И.С., Фабиан С., Чо К.А. Прямая регуляция экспрессии TLR5 кавеолином-1. Мол клетки. 2015 г.; 38:1111–1117.
15. Ро Дж.С., Зон Д.Х. Молекулярные паттерны, связанные с повреждением, при воспалительных заболеваниях. Иммунная сеть. 2018; 18:e27.
16. Latz E, Duewell P. Активация воспаления NLRP3 при воспалении.Семин Иммунол. 2018; 40:61–73.
17. Wang Z, Meng S, Cao L, Chen Y, Zuo Z, Peng S. Критическая роль пути NLRP3-каспаза-1 в возрастной индуцированной изофлураном микроглиальной воспалительной реакции и когнитивных нарушениях. J Нейровоспаление. 2018; 15:109.
18. Shi X, Qiu S, Zhuang W, Yuan N, Wang C, Zhang S, Sun T, Guo W, Gao F, Yang S, et al. NLRP3-инфламмасомы вызываются возрастной потерей слуха во внутреннем ухе мышей. Am J Transl Res. 2017; 9: 5611–5618.
19. Чо С.Дж., Руни К., Чой А.М., Стаут-Дельгадо Х.В. Активация инфламмасомы NLRP3 в старых макрофагах снижается во время инфекции Streptococcus pneumoniae . Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2018; 314:L372–L387.
20. Стаут-Дельгадо Х.В., Вон С.Е., Ширали А.С., Джарамилло Р.Дж., Харрод К.С. Нарушенная функция инфламмасомы NLRP3 у пожилых мышей во время гриппозной инфекции восстанавливается путем лечения нигерицином. Дж Иммунол. 2012 г.; 188: 2815–2824.
21.Youm YH, Grant RW, McCabe LR, Albarado DC, Nguyen KY, Ravussin A, Pistell P, Newman S, Carter R, Laque A, et al. Каноническая инфламмасома NLRP3 связывает системное слабовыраженное воспаление с функциональным снижением старения. Клеточный метаб. 2013; 18: 519–532.
22. Metcalf TU, Cubas RA, Ghneim K, Cartwright MJ, Grevenynghe JV, Richner JM, Olagnier DP, Wilkinson PA, Cameron MJ, Park BS, et al. Общий анализ выявил возрастные изменения врожденных иммунных ответов после стимуляции рецепторов распознавания патогенов.Стареющая клетка. 2015 г.; 14:421–432.
23. Seidler S, Zimmermann HW, Bartneck M, Trautwein C, Tacke F. Возрастные изменения подмножеств моноцитов и связанных с моноцитами путей хемокинов у здоровых взрослых. БМС Иммунол. 2010 г.; 11:30.
24. Меткалф Т.У., Уилкинсон П.А., Кэмерон М.Дж., Гнейм К., Чианг С., Вертхаймер А.М., Хискотт Д.Б., Николич-Зугич Дж., Хаддад Э.К. Субпопуляции моноцитов человека транскрипционно и функционально изменяются при старении в ответ на действие агонистов рецепторов распознавания образов.Дж Иммунол. 2017; 199: 1405–1417.
25. Hearps AC, Martin GE, Angelovich TA, Cheng WJ, Maisa A, Landay AL, Jaworowski A, Crowe SM. Старение связано с хронической активацией врожденного иммунитета и нарушением регуляции фенотипа и функции моноцитов. Стареющая клетка. 2012 г.; 11: 867–875.
26. Шоу А.С., Панда А., Джоши С.Р., Цянь Ф., Аллоре Х.Г., Монтгомери Р.Р. Нарушение регуляции функции Toll-подобных рецепторов человека при старении. Старение Res Rev. 2011; 10: 346–353.
27. Челвараян Р.Л., Коллинз С.М., Ван Виллиген Дж.М., Бондада С.Невосприимчивость старых мышей к полисахаридным антигенам является результатом нарушения функции макрофагов. Дж. Лейкок Биол. 2005 г.; 77: 503–512.
28. Herrero C, Marqués L, Lloberas J, Celada A. IFN-gamma-зависимая транскрипция MHC класса II IA нарушена в макрофагах старых мышей. Джей Клин Инвест. 2001 г.; 107: 485–493.
29. Ван Бик А.А., Ван ден Босше Дж., Мастроберардино П.Г., де Винтер М.П., Леенен П.Дж. Метаболические изменения в стареющих макрофагах: ингредиенты для воспаления? Тренды Иммунол.2019; 40:113–127.
30. Jing Y, Shaheen E, Drake RR, Chen N, Gravenstein S, Deng Y. Старение связано с количественным и функциональным снижением плазмоцитоидных дендритных клеток, тогда как миелоидные дендритные клетки относительно неизменны в периферической крови человека. Хум Иммунол. 2009 г.; 70:777–784.
31. Делла Белла С., Бьерти Л., Пресичче П., Ариенти Р., Валенти М., Сареселла М., Вергани С., Вилла М.Л. Дендритные клетки и моноциты периферической крови по-разному регулируются у пожилых людей.Клин Иммунол. 2007 г.; 122:220–228.
32. Шоделл М., Сигал Ф.П. Циркулирующие, продуцирующие интерферон плазмацитоидные дендритные клетки уменьшаются в процессе старения человека. Сканд Дж. Иммунол. 2002 г.; 56:518–521.
33. Sprecher E, Becker Y, Kraal G, Hall E, Harrison D, Shultz LD. Влияние старения на популяции эпидермальных дендритных клеток у мышей C57BL/6J. Джей Инвест Дерматол. 1990 г.; 94:247–253.
34. Шварц Дж.Л., Вейхзельбаум Р., Фрим С.Р. Влияние старения на плотность и распределение клеток Лангерганса слизистой оболочки полости рта.Опыт Геронтол. 1983 год; 18: 65–71.
35. Pietschmann P, Hahn P, Kudlacek S, Thomas R, Peterlik M. Поверхностные маркеры и трансэндотелиальная миграция дендритных клеток пожилых людей. Опыт Геронтол. 2000 г.; 35:213–224.
36. Агравал А., Тай Дж., Тон С., Агравал С., Гупта С. Повышенная реактивность дендритных клеток пожилых людей на собственный антиген, ДНК человека. Дж Иммунол. 2009 г.; 182: 1138–1145.
37. Агравал А., Агравал С., Тай Дж., Гупта С. Биология дендритных клеток при старении.Дж. Клин Иммунол. 2008 г.; 28:14–20.
38. Agrawal A, Agrawal S, Cao JN, Su H, Osann K, Gupta S. Измененное врожденное иммунное функционирование дендритных клеток у пожилых людей: роль сигнального пути фосфоинозитид-3-киназы. Дж Иммунол. 2007 г.; 178: 6912–6922.
39. Хонг CW. Современное понимание дифференцировки и гетерогенности нейтрофилов. Иммунная сеть. 2017; 17: 298–306.
40. Wenisch C, Patruta S, Daxböck F, Krause R, Hörl W. Влияние возраста на функцию нейтрофилов человека.Дж. Лейкок Биол. 2000 г.; 67:40–45.
41. Сапи Э., Гринвуд Х., Уолтон Г., Манн Э., Лав А., Ааронсон Н., Инсолл Р.Х., Стокли Р.А., Лорд Дж.М. Ингибирование фосфоинозитид-3-киназы восстанавливает точность нейтрофилов у пожилых людей: к целенаправленному лечению иммуностарения. Кровь. 2014; 123: 239–248.
42. Simell B, Vuorela A, Ekström N, Palmu A, Reunanen A, Meri S, Käyhty H, Väkeväinen M. Старение снижает функциональность анти-пневмококковых антител и гибель Streptococcus pneumoniae путем фагоцитоза нейтрофилов.вакцина. 2011 г.; 29:1929–1934.
43. Мясник С.К., Чахал Х., Наяк Л., Синклер А., Энрикес Н.В., Сапей Э., О’Махони Д., Лорд Дж.М. Старение при врожденных иммунных реакциях: снижение фагоцитарной способности нейтрофилов и экспрессии CD16 у пожилых людей. Дж. Лейкок Биол. 2001 г.; 70:881–886.
44. Niwa Y, Kasama T, Miyachi Y, Kanoh T. Хемотаксис нейтрофилов, фагоцитоз и параметры активных форм кислорода при старении человека: поперечные и продольные исследования. Жизнь наук.1989 год; 44: 1655–1664.
45. Tseng CW, Kyme PA, Arruda A, Ramanujan VK, Tawackoli W, Liu GY. Дисфункции врожденного иммунитета у старых мышей способствуют системному распространению метициллин-резистентного S. aureus. ПЛОС Один. 2012 г.; 7:e41454.
46. Хазелдин Дж., Харрис П., Чаппл И.Л., Грант М., Гринвуд Х., Ливси А., Сапи Э., Лорд Дж.М. Нарушение формирования нейтрофильных внеклеточных ловушек: новый дефект врожденной иммунной системы пожилых людей. Стареющая клетка. 2014; 13: 690–698.
47. Банерджи М., Мехр Р., Белеловский А., Спенсер Дж., Данн-Уолтерс Д.К. Возрастные и тканеспецифические различия в селекции В-клеток зародышевого центра человека, выявленные с помощью анализа гипермутации гена IgVH и деревьев клонов. Евр Дж Иммунол. 2002 г.; 32: 1947–1957.
48. Fecteau JF, Côté G, Néron S. Новая популяция CD27-IgG+ B-клеток памяти в периферической крови, экспрессирующая гены VH с низкой частотой соматических мутаций. Дж Иммунол. 2006 г.; 177: 3728–3736.
49.Росси М.И., Йокота Т., Медина К.Л., Гарретт К.П., Комп ПК, Шипул А.Х. младший, Кинкейд П.В. В-лимфопоэз активен на протяжении всей жизни человека, но бывают возрастные изменения в развитии. Кровь. 2003 г.; 101: 576–584.
50. Frasca D, Landin AM, Lechner SC, Ryan JG, Schwartz R, Riley RL, Blomberg BB. Старение подавляет транскрипционный фактор E2A, индуцированную активацией цитидиндезаминазу и переключение класса Ig в В-клетках человека. Дж Иммунол. 2008 г.; 180: 5283–5290.
51. Жархары Д.Возрастные изменения способности костного мозга генерировать В-клетки. Дж Иммунол. 1988 год; 141: 1863–1869.
52. Николич-Жугич Ю. Сумерки иммунитета: новые концепции старения иммунной системы. Нат Иммунол. 2018; 19:10–19.
53. Фраска Д., Диас А., Ромеро М., Ферраччи Ф., Бломберг Б.Б. МикроРНК миР-155 и миР-16 снижают AID и E47 в В-клетках пожилых людей. Дж Иммунол. 2015 г.; 195:2134–2140.
54. Ван дер Пут Э., Фраска Д., Кинг А.М., Бломберг Б.Б., Райли Р.Л.Снижение E47 в стареющих В-клеточных предшественниках является стадийно-специфическим и регулируется посттрансляционно за счет оборота белка. Дж Иммунол. 2004 г.; 173:818–827.
55. Фраска Д., Ван дер Пут Э., Райли Р.Л., Бломберг Б.Б. Уменьшение переключения класса Ig у старых мышей коррелирует со снижением E47 и индуцированной активацией цитидиндезаминазы. Дж Иммунол. 2004 г.; 172: 2155–2162.
56. Фраска Д. Стареющие В-клетки при старении и возрастных заболеваниях: их роль в регуляции гуморального ответа.Опыт Геронтол. 2018; 107:55–58.
57. Yang X, Stedra J, Cerny J. Разнообразие репертуара ответа антител на бактериальные антигены у старых мышей. IV. Изучение использования генов VH и VL в очагах селезеночных антител методом гибридизации in situ. Дж Иммунол. 1994 год; 152:2214–2221.
58. Бен-Йехуда А., Сабо П., ЛеМаулт Дж., Манавалан Дж.С., Векслер М.Е. Повышенное использование генов VH 11 и VH Q52 В-клетками селезенки у старых мышей связано с олигоклональной экспансией CD5 + В-клеток. Механическое старение Dev.1998 год; 103:111–121.
59. Han S, Yang K, Ozen Z, Peng W, Marinova E, Kelsoe G, Zheng B. Усиление дифференцировки плазматических клеток селезенки, но снижение долгоживущих высокоаффинных плазматических клеток костного мозга у старых мышей. Дж Иммунол. 2003 г.; 170: 1267–1273.
60. Wang C, Liu Y, Xu LT, Jackson KJ, Roskin KM, Pham TD, Laserson J, Marshall EL, Seo K, Lee JY, et al. Влияние старения, цитомегаловирусной инфекции и инфекции EBV на репертуар В-клеток человека. Дж Иммунол. 2014; 192: 603–611.
61. Goronzy JJ, Hu B, Kim C, Jadhav RR, Weyand CM. Эпигенетика старения Т-клеток. Дж. Лейкок Биол. 2018; 104: 691–699.
62. Диксит В.Д. Влияние иммунно-метаболических взаимодействий на возрастную гибель тимуса и старение Т-клеток. Семин Иммунол. 2012 г.; 24:321–330.
63. Бектас А., Шурман С.Х., Сен Р., Ферруччи Л. Иммунное старение Т-клеток человека и воспаление при старении. Дж. Лейкок Биол. 2017; 102:977–988.
64. Бектас А., Чжан Ю., Вуд В.Х. 3-й, Беккер К.Г., Мадара К., Ферруччи Л., Сен Р.Возрастные изменения транскрипции индуцируемых генов в CD4+ T-лимфоцитах человека. Старение (Олбани, штат Нью-Йорк). 2013; 5:18–36.
65. Британова О.В., Путинцева Е.В., Шугай М., Мерзляк Е.М., Турчанинова М.А., Староверов Д.Б., Болотин Д.А., Лукьянов С., Богданова Е.А., Мамедов И.З., и соавт. Возрастное снижение разнообразия репертуара TCR, измеренное с помощью глубокого и нормализованного профилирования последовательностей. Дж Иммунол. 2014; 192: 2689–2698.
66. Мэнсфилд А.С., Невала В.К., Дронка Р.С., Леонтович А.А., Шустер Л., Маркович С.Н.Нормальное старение связано с увеличением количества клеток Th3, MCP-1 (CCL1) и RANTES (CCL5), с различиями в sCD40L и PDGF-AA между полами. Клин Эксп Иммунол. 2012 г.; 170:186–193.
67. Sandquist I, Kolls J. Обновление регуляции и эффекторных функций клеток Th27. F1000 Рез. 2018; 7:205.
68. Schmitt V, Rink L, Uciechowski P. Баланс Th27/Treg нарушается при старении. Опыт Геронтол. 2013; 48:1379–1386.
69. Тахир С., Фукусима Ю., Сакамото К., Сато К., Фудзита Х., Иноуэ Дж., Уэдэ Т., Хамазаки Ю., Хаттори М., Минато Н.Популяция CD153+CD4+ Т-фолликулярных клеток с признаками клеточного старения играет решающую роль в патогенезе волчанки посредством продукции остеопонтина. Дж Иммунол. 2015 г.; 194: 5725–5735.
70. Фукусима Ю., Минато Н., Хаттори М. Влияние Т-клеток, связанных со старением, на иммунологическое старение и возрастные расстройства. Регенерация воспаления. 2018; 38:24.
71. Ким Дж., Ким А.Р., Шин Э.К. Цитомегаловирусная инфекция и инфляция Т-клеток памяти. Иммунная сеть. 2015 г.; 15:186–190.
72.Сьерро С., Роткопф Р., Кленерман П. Эволюция разнообразных популяций противовирусных CD8+ Т-клеток после мышиной цитомегаловирусной инфекции. Евр Дж Иммунол. 2005 г.; 35:1113–1123.
73. Снайдер К.М., Чо К.С., Боннетт Э.Л., ван Доммелен С., Шеллам Г.Р., Хилл А.Б. Инфляция памяти во время хронической вирусной инфекции поддерживается за счет непрерывного производства короткоживущих функциональных Т-клеток. Иммунитет. 2008 г.; 29: 650–659.
74. Мункс М.В., Чо К.С., Пинто А.К., Сьерро С., Кленерман П., Хилл А.Б. Четыре различных паттерна ответов Т-клеток памяти CD8 на хроническую мышиную цитомегаловирусную инфекцию.Дж Иммунол. 2006 г.; 177: 450–458.
75. Акбар А.Н., Хенсон С.М., Ланна А. Старение Т-лимфоцитов: последствия для повышения иммунитета человека. Тренды Иммунол. 2016; 37:866–876.
76. Чесникевич-Гузик М., Ли В.В., Цуй Д., Хирума Ю., Ламар Д.Л., Ян З.З., Оусландер Дж.Г., Вейанд К.М., Горонзи Дж.Дж. Специфическая для субпопуляции Т-клеток предрасположенность к старению. Клин Иммунол. 2008 г.; 127:107–118.
77. Shimada Y, Hayashi M, Nagasaka Y, Ohno-Iwashita Y, Inomata M. Связанная с возрастом активация отрицательного костимулирующего рецептора PD-1 в мышиных CD4+ T-клетках.Опыт Геронтол. 2009 г.; 44:517–522.
78. Ленг К., Бентвич З., Борков Г. Активация CTLA-4 при старении. Механическое старение Dev. 2002 г.; 123:1419–1421.
79. Lee KA, Shin KS, Kim GY, Song YC, Bae EA, Kim IK, Koh CH, Kang CY. Характеристика возрастных истощенных CD8 + Т-клеток, определяемых повышенной экспрессией Tim-3 и PD-1. Стареющая клетка. 2016; 15: 291–300.
80. O’Hagan DT, Ott GS, De Gregorio E, Seubert A. Механизм действия MF59 – изначально привлекательный адъювантный состав.вакцина. 2012 г.; 30:4341–4348.
81. Cohet C, van der Most R, Bauchau V, Bekkat-Berkani R, Doherty TM, Schuind A, Tavares Da Silva F, Rappuoli R, Garçon N, Innis BL. Безопасность вакцин против гриппа с адъювантом AS03: обзор доказательств. вакцина. 2019; 37:3006–3021.
82. Chlibek R, Bayas JM, Collins H, de la Pinta ML, Ledent E, Mols JF, Heineman TC. Безопасность и иммуногенность вакцины-кандидата субъединицы вируса ветряной оспы с адъювантом AS01 против опоясывающего герпеса у взрослых старше 50 лет.J заразить дис. 2013; 208:1953–1961.
83. Cunningham AL, Lal H, Kovac M, Chlibek R, Hwang SJ, Díez-Domingo J, Godeaux O, Levin MJ, McElhany JE, Puig-Barberà J, et al. Эффективность субъединичной вакцины против опоясывающего герпеса у взрослых в возрасте 70 лет и старше. N Engl J Med. 2016; 375: 1019–1032.
84. Zhou H, Thompson WW, Viboud CG, Ringholz CM, Cheng PY, Steiner C, Abedi GR, Anderson LJ, Brammer L, Shay DK. Госпитализации, связанные с гриппом и респираторно-синцитиальным вирусом в США, 1993–2008 гг.Клин Инфекция Дис. 2012 г.; 54:1427–1436.
85. Van Buynder PG, Konrad S, Van Buynder JL, Brodkin E, Krajden M, Ramler G, Bigham M. Сравнительная эффективность адъювантной и неадъювантной трехвалентной инактивированной противогриппозной вакцины (TIV) у пожилых людей. вакцина. 2013; 31:6122–6128.
86. Henry C, Zheng NY, Huang M, Cabanov A, Rojas KT, Kaur K, Andrews SF, Palm AE, Chen YQ, Li Y, et al. Вакцинация против вируса гриппа вызывает плохо адаптированный В-клеточный ответ у пожилых людей.Клеточный микроб-хозяин. 2019; 25:357–366.e6.
87. Чжоу С., МакЭлхейни Дж. Э. Возрастные изменения памяти и эффекторных Т-клеток, реагирующих на грипп A/h4N2 и пандемические штаммы A/h2N1 у людей. вакцина. 2011 г.; 29:2169–2177.
88. Lee JB, Oelke M, Ramachandra L, Canaday DH, Schneck JP. Снижение репертуара CD8+ T-клеток, специфичных для гриппа, у здоровых гериатрических доноров. Иммунное старение. 2011 г.; 8:6.
89. Del Giudice G, Goronzy JJ, Grubeck-Loebenstein B, Lambert PH, Mrkvan T, Stoddard JJ, Doherty TM.Борьба с многообразным врагом: старение иммунитета, вакцины и здоровое старение. NPJ Aging Mech Dis. 2017; 4:1.
90. Levin MJ, Oxman MN, Zhang JH, Johnson GR, Stanley H, Hayward AR, Caulfield MJ, Irwin MR, Smith JG, Clair J, et al. Специфические иммунные реакции на вирус ветряной оспы у пожилых реципиентов вакцины против опоясывающего герпеса. J заразить дис. 2008 г.; 197:825–835.
91. Ким Дж.А., Сон Р.К., Шин О.С. Усиленная репликация вируса за счет клеточного репликативного старения.Иммунная сеть. 2016; 16: 286–295.
92. Ким Д.А., Парк С.К., Кумар М., Ли Ч., Шин О.С. Взгляд на роль иммуносенесценции во время вирусной инфекции ветряной оспы (опоясывающий лишай) в модели старения клеток. Онкотаргет. 2015 г.; 6:35324–35343.
93. Kim JY, Park GH, Kim MJ, Sim HB, Lee WJ, Lee SJ, Kim SW, Jeon YH, Jang YH, Kim DW. Полезность воспалительных маркеров для прогнозирования постгерпетической невралгии у пациентов с острым опоясывающим лишаем. Энн Дерматол. 2018; 30:158–163.
94. Wei L, Zhao J, Wu W, Zhang Y, Fu X, Chen L, Wang X. Снижение абсолютного числа CD3 + Т-клеток и CD8 + Т-клеток при старении у пациентов с опоясывающим герпесом. Научный представитель 2017; 7:15039.
95. Verschoor CP, Lelic A, Parsons R, Evelegh C, Bramson JL, Johnstone J, Loeb MB, Bowdish DM. С-реактивный белок сыворотки и застойная сердечная недостаточность как значимые предикторы реакции на вакцину против опоясывающего герпеса у пожилых обитателей домов престарелых. J заразить дис.2017; 216:191–197.
96. Wertheimer AM, Bennett MS, Park B, Uhrlaub JL, Martinez C, Pulko V, Currier NL, Nikolich-Zugich D, Kaye J, Nikolich-Zugich J. Старение и цитомегаловирусная инфекция по-разному и совместно влияют на различные циркулирующие субпопуляции Т-клеток в людях. Дж Иммунол. 2014; 192: 2143–2155.
97. Weltevrede M, Eilers R, de Melker HE, van Baarle D. Устойчивость цитомегаловируса и иммунологическое старение Т-клеток у людей в возрасте пятидесяти лет и старше: систематический обзор.Опыт Геронтол. 2016; 77:87–95.
98. Пургейсари Б., Хан Н., Бест Д., Брутон Р., Наяк Л., Мосс П.А. Цитомегаловирус-специфический ответ Т-клеток CD4+ усиливается с возрастом и заметно изменяет репертуар Т-клеток CD4+. Дж Вирол. 2007 г.; 81:7759–7765.
99. Sylwester AW, Mitchell BL, Edgar JB, Taormina C, Pelte C, Ruchti F, Sleath PR, Grabstein KH, Hosken NA, Kern F, et al. CD4+ и CD8+ T-клетки, специфичные для человеческого цитомегаловируса, доминируют в компартментах памяти подвергшихся воздействию субъектов.J Эксперт Мед. 2005 г.; 202: 673–685.
100. Фраска Д., Бломберг Б.Б. Старение, цитомегаловирус (ЦМВ) и реакция на вакцину против гриппа. Hum Вакцина Иммунотер. 2016; 12: 682–690.
101. Derhovanessian E, Theeten H, Hähnel K, Van Damme P, Cools N, Pawelec G. Ассоциированное с цитомегаловирусом накопление поздно дифференцированных Т-клеток CD4 коррелирует с плохим гуморальным ответом на вакцинацию против гриппа. вакцина. 2013; 31: 685–690.
102. Дерхованесян Э., Майер А.Б., Хенел К., МакЭлхани Дж.Э., Слагбум Э.П., Павелец Г.Латентная инфекция цитомегаловирусом связана с плохой реакцией памяти CD4 на коровые белки гриппа А у пожилых людей. Дж Иммунол. 2014; 193:3624–3631.
103. Вальдес А.М., Гласс Д., Спектор Т.Д. Омические технологии и изучение старения человека. Нат Рев Жене. 2013; 14: 601–607.
104. Змора Н., Башиардес С., Леви М., Элинав Э. Роль иммунной системы в метаболическом здоровье и болезнях. Клеточный метаб. 2017; 25: 506–521.
105. Messaoudi I, Warner J, Fischer M, Park B, Hill B, Mattison J, Lane MA, Roth GS, Ingram DK, Picker LJ, et al.Задержка старения Т-клеток за счет ограничения калорийности у пожилых долгоживущих приматов, отличных от человека. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006; 103:19448–19453.
106. Richner JM, Gmyrek GB, Govero J, Tu Y, van der Windt GJ, Metcalf TU, Haddad EK, Textor J, Miller MJ, Diamond MS. Возрастные дефекты переноса клеток в дренирующих лимфатических узлах нарушают адаптивный иммунитет и контроль над инфекцией, вызванной вирусом Западного Нила. PLoS Патог. 2015 г.; 11:e1005027.
107. Sage PT, Tan CL, Freeman GJ, Haigis M, Sharpe AH.Дефектная функция клеток TFH и увеличенные клетки TFR способствуют дефектной выработке антител при старении. Сотовые отчеты. 2015 г.; 12:163–171.
108. Бобри А., Коломбо М., Рапозо Г., Тери С. Секреция экзосом: молекулярные механизмы и роль в иммунных реакциях. Движение. 2011 г.; 12: 1659–1668.
109. Takasugi M, Okada R, Takahashi A, Virya Chen D, Watanabe S, Hara E. Небольшие внеклеточные везикулы, выделяемые стареющими клетками, способствуют пролиферации раковых клеток через EphA2.Нац коммун. 2017; 8:15729.
110. Мицухаши М., Тауб Д.Д., Капояннис Д., Эйтан Э., Зукли Л., Маттсон М.П., Ферруччи Л., Шварц Дж.Б., Гетцль Э.Дж. Старение усиливает высвобождение мРНК экзосомальных цитокинов макрофагами, стимулируемыми Aβ1-42. FASEB J. 2013; 27:5141–5150.
111. Chen H, Ye F, Guo G. Революция в иммунологии с помощью секвенирования одноклеточной РНК. Селл Мол Иммунол. 2019; 16: 242–249.
112. Чон О.Х., Ким С., Лаберж Р.М., Демария М., Ратод С., Вассеро А.П., Чанг Дж.В., Ким Д.Х., Пун И., Дэвид Н. и др.Локальный клиренс стареющих клеток ослабляет развитие посттравматического остеоартрита и создает прорегенеративную среду. Нат Мед. 2017; 23:775–781.
Сначала посмотрите материалы дела: некая шанталь Моник содержит гостиницу «У Ледяного ущелья». Но стало одна за другой происходить аварии. Вот Нэнси и улетела в Канаду, чтобы разобраться в ситуации. В аэропорту нас встречает ассистент Шанталь Олли Рэндал.Сдав в гостиницу, видим, что произошел взрыв в доме для прислуги. По телефону хозяйка хочет, чтобы мы проконсультировались с детективом Тино Бальдуччи (поезд в лунном ущелье). Мы будем изображать горничную и кухарку.
Начать новое расследование!
Мы находимся в Нанси. Имя ему quelkwell. На столе будильник, возьмите ключи от комнат и ознакомьтесь со списком гостей и названием комнат, где они живут. Ознакомимся с инструкцией по очистке, приготовлению и расчистке катка.Мы выходим из комнаты.
Уборка производится до 12:00. Но нет мешка для грязного белья! Спуститесь вниз, повернув налево к лестнице. Снова. В стойке администратора есть телефон! Компьютер и гардероб. Из него сразу возьмите мешок для белья. На полках лежат скомканные бумаги. Мы смотрим на них. Это любовные письма Л. к Эльзе, бывшей горничной.
Под столом еще одна скомканная бумажка, на этот раз это заявление о населении самой Эльзы, где указан ее телефон:
555–2383.На компьютере интересная информация о гостях, но в прошлом году все удалено. Почему?
Поднимемся на уборку. Помните, в номерах нужно снимать только те, где висит на ручке тарелка. Мы идем в комнату Иины. Она берет Лу Талбота. На столе замечаем книгу Джека Лондона «Зов предков». На полу смотрим набор масляных красок и шкафчик с кистями художника. Заправляем кровать и берем синие полотенца.
Следующая комната напротив – это калакал.Это Лыжница Навалкстая. Заправляем кровать. На столе под головой лося читаем статью в журнале о месте проведения Чемпионата по биатлону. Это может быть недалеко от ущелья. Берем оранжевые полотенца.
В комнате пишу пишем, которую занимает Билл Кесслер, проводим уборку и смотрим название книг: Проектирование зданий, основы геологии и техника безопасности при работе с приборами.
Номер напротив занимает Камилла Гваделупа. На ее столе мы читаем журнал журнала и как перезаряжать мушкетные винтовки.
Возле туалета кинуть мешок в мусоропровод. Спуститесь по лестнице и направо, к стене с фотографией. Некоторые фото нет. Остальные говорят мне, что дом принадлежал охотнику Дейна, имел несколько ходов. Среди экспонатов, которые нашел Dan’s Hunter, кости нет. Идем налево. Перед камином читаем статью, как семья отравилась салатом из отеля, а возле отеля люди увидели волка.
Напротив, сидят за игрой.Это Лу и Билл. Говорим с ними. Лу – студентка, а Билл приехал на зимнюю рыбалку. Они просят очистить каток. Идем налево, на столе пирамида. Я выставляю на нем клетки, чтобы везде была свинья. Тайник открыт в пирамиде, но внутри пустой. Слева есть двустворчатая дверь на кухню, но пока там
нет.Выходим на улицу, смотрим на барометр рядом с дверью. Он показывает погодные условия. Мы идем на каток. Возьмите лопату.Весь секрет в том, что надо расчистить лед и расставить там, где 29 предупредительных знаков. Посмотрите на цвет области на шкале ниже. Допускается 2 ошибки, на третьей вы провалитесь под лед.
Как только очищающий ролик будет готов, Нэнси заметит следы волка и пойдет по нему. Они ведут нас к Обелиску. Обратите внимание на кусок торчащей ткани. Следуйте по стопам, прежде чем птица пройдет. Будет большая беда: лавина рухнет. Из-под снега Нэнси выкапывает… Волк. К счастью, он убегает, и тогда девушка освобождается сама. Возвращение обратно по волчьим тропам и лыжам.
Если уже 12 часов, то нужно идти на кухню, готовить обед. Все делается по готовым заказам. Главное, следуйте инструкциям.
Разобравшись с хозяйственными делами, не помешало бы посвятить себя общению с подозреваемыми. Но сначала разговариваем по телефону с гранатой и спасательным патрулем. Они просят Олли проверить бицепс.Также одновременно звонят Тино, Шанталь, пострадавшим в авариях.
Идем в подвал (он рядом с администратором). Там возле сауны мастерская Олли. Он делает дрон для волка, дает нам ключ от снегохода. С другой стороны встречаем лыжников Джанни. Он расскажет нам о взрыве во время тренировки.
Поднимитесь наверх и идите на улицу. Сядьте на снегоход. Чтобы добраться до места и не разбиться, нужно объедать препятствия мышкой. Двигаемся в направлении зеленой стрелки.Когда вы приедете, Нэнси скажет, что никакого аваланжера не было. Веди машину обратно.
Можно не сразу войти в дом, а обойти его. Поехали на снежную крепость, где Фредди и дочь Олли играют в снежки. Мы должны попасть в него 10 раз, чтобы пройти дальше. Это легко.
Проходим в дом прислуги. На месте взрыва находим расплавленный циферблат от часов. Осталась бомба?
Возвращаемся в дом, отпускаем гаечный ключ Олли и разговариваем с Билли и Лу. Лу очень подозрительный, может, он вовсе и не художник? Билл предлагает соревнование по зимней рыбалке.Соглашаться.
Но на улице мороз слишком сильный. Можно посоветоваться с Наде, поговорить с Янни о волках и позвонить Шерифу. Последний расскажет, что дом был взорван пластитом С4. Используется в строительстве.
После ужина ложимся спать. Ставим будильник на 7:00.
На следующий день возьмите низ нижнего белья и пройдите в комнату, где есть соответствующие таблички. После уборки выбросьте мешок в мусоропровод. Готовим завтрак.
После завтрака идем рыбачить в дом. Но мы обнаруживаем, что там кто-то устроил погром. Говорим Олли, он дает нам свою снасть.
Идем к ледяному озеру. Ловим щуку 2 метра. Убедитесь, что охрана или полностью потеряли леску. Чтобы узнать щуку, прочитайте раздел о рыбе на компьютере. Как только рыба будет поймана, возьмите в домике листок с птицей и номер телефона. Похоже, его оставил тот, кто устроил погром.
Как только мы выходим из дома, Нэнси падает в голову из снега.Потеряв сознание, она слышит взрыв. Проснувшись, она заметит, что дом сдуло, а жилетки нет. Куртку можно увидеть на противоположном берегу, но добраться до него нужно, прыгая вдоль языков пламени. При прыжке в один другой может исчезнуть или появиться. Времени мало. Не успеть уйти.
нарукавники Нэнси, чье пальто, в кармане записка с 4 символами. Идём по волчьим следам к лавинному гребню. Как только она скажет, что им нужны снежные окна, нужно повернуть назад.На снегу можно увидеть катание Янни, покататься на нем.
В холле прочитайте записку от Фредди, она обещает открыть большой секрет, как защититься от мороза, если Нэнси снова будет играть с ней в снежки. Приготовление обеда, если пришло время.
Мы говорим Олли, только Шанталь знает от замка до снегоступов. Позвони ей. Но она не скажет код, пока мы не заполним анкету Тони, которая пришла по факсу. Нужно будет опросить гостей. Да, и не забудьте спросить у Янни о фото на сайте отеля.
Янни ассоциирует себя с планетой Плутон. О фото на сайте не может быть и речи.
После ужина ложимся спать.
Утром делаем уборку в номерах, готовим завтрак. Готовя Омлет, добавьте перец всем гостям. Итак, вы узнаете, что его не любит только Лу. Город всех можно узнать с компьютера в холле.
Играем с Фредди в снежки и получаем термоспинку. Вот что такое Секрет Ледяной Принцессы!
Идем к обелиску, лыжный съезд уходит в сторону, проходим через него к месту взрыва, осматриваем воронку, отмечаем окаменелость в одном из камней.Возвращение к дому.
Наверху в комнате Билла возле кровати на тумбочке читаем записку, где он говорит о справедливости. Кому он собирается мстить?
Звоните по телефону, указанному на листке рыболовного дома, это номер общества защиты животных. Но есть только автоответчик.
Идём на выставку про Дэна охотника и поворачиваем налево. В окне стоит Камилла, с ней разговаривает. Она наблюдает за птицами в бинокль. Он сказал, что никогда не был в рыбацком доме.Будильник исчез из ее комнаты. Когда закончим разговор, я подберу пулю с пола. Еще раз прошу Камиллу, она будет все отрицать, но надеть и заставить признаться. Она член Общества защиты диких животных и пуля попала в револьвер пистолета Олли. Планета, с которой она себя ассоциирует, — земля или Венера.
Разговариваем с Биллом. Планета Марс. Лу – Планета Х. Снегоступы не хотят брать взаймы.
Пришло время заполнить анкету и отправить Тино.
К.Г. | Л.Т. | Б.К. | Я В | |
С какой стороны кровати встает П.? | слева | оба | справа | справа |
Из какого города прибыл П.? | Лос-Анджелес | Бр. | Торонто | Брейла |
С какой планетой солнечной системы П. себя ассоциирует? | Земля | Х | Марс | Плутон |
П. не нравится паприка? | вместо | да | вместо | вместо |
Теперь позвони Тони и отправь факс.Он, конечно, все перепутал. Но он скажет код от снегоступов – 7669. Берем их.
При уборке в одной из комнат мы услышали ссору Олли и Камиллы. Спуститесь к Олли и узнайте, что его выселили из Камиллы. В коридоре осталась от нее записка с просьбой перезвонить. И сделайте это. Она сообщает нам интересную информацию о волках.
Пора идти к лавинному гребню. Заправка термопакетами, игра с Фредди в снежки. На полпути услышав волчью команду и звук выстрела.Около воронки найдите блокнот с фотографиями из отеля. Идем дальше. Выкупаем, уже примерзаем к дому, но на двери висит дверной замок. Используйте термобакет. Надо срочно узнать код. В инвентаре у нас есть бумажка из кармана пальто. Но есть некоторые зацепки. Смотрим внимательно. Это как зеркально перевернутые числа, каждое как сиамские близнецы. В итоге получаем код 7941. Внутри дома полное поражение. Найдите 2 термопакета, дневник. Из дневника видно, что Волчья Исида почти ручная.Она даже может отдавать команды.
Здесь появляется сама Изида. Можно попробовать дать ей пару команд. На кровати находим еще один термобакет и испорченную дрель с номером телефона. При выходе снова слышу взрыв.
В холле гостиницы оставлена записка, только на этот раз анонимная с предложением встретиться в сауне и поговорить.
Звонок в больницу. Джулиус Маквуд, владелец дневника и владелец Волка, умер от двустороннего воспаления легких.Совершить вызов по номеру, указанному на чужом устройстве. Это георадар, настроенный на частоту 990 кГц. К тому же запутался. С его помощью вор что-то ищет с помощью взрывов. Может кости динозавра?
На столе мастерской берем красную тряпку.
Идём в сауну. Там на полке 2 детские фотографии Билла. И тут дверь в сауне хлопает. На одной из стен откройте панель. Подключить трубу нужно так, чтобы шла холодная вода.Вот правильное решение.
Дверь откроется, и за ней мы зайдем вместе с самим Биллом. Он расскажет, что изначально этот отель принадлежал его бабушке, но она произвела его на принуждение семьи Моник. Он отрицает свою причастность к взрывам и беспорядкам. Зато расскажет, как получить дневник Дэна с помощью пирамиды в холле.
С ним еще можно поиграть в настольную игру “Лисы и гуси”.
После того, как подойдем к пирамиде, поверните конус к вершине на 45 градусов.Теперь по очереди устанавливайте все виды животных и получайте Дневник Охотника Дэна. Правда, половина информации в нем зашифрована. Так что это не финал.
Шифр, если вам так проще. Весь текст состоит из фраз по 2 строки каждая. Первая буква первой строки соединяется с первой буквой второй. Далее вторая буква первой строки со второй буквой нижней строки и т.д. Таким образом, мы получаем текст:
“Итак, сначала самое главное. Найдите мое тайное убежище в горах.Он спрятан очень надежно, но если найдете, возьмите кость динозавра и вставьте в стену. Тогда попробуй справиться с моей головоломкой. Помните, что первое животное всегда будет первым. Теперь вам предстоит найти мои пещеры и открыть дверь в Обелиск.
В моем доме спрятано три ключа: лось, волк, енот. Ключ лося найти легко. Нажмите на глаз лося и получите сюрприз. Огненное ожерелье подскажет, где прячется енот. Только не будите гостей. Волка найти труднее всего. Только такие, как Мария Кюри и Гейгер, услышат его голос.
Когда утром будете убираться в комнатах, возьмите Полотенца Лу и Джанни. На двери Билла будет написано не беспокоить. Спускайтесь в подвал, к Ски Янни. На полу найдете записка с угрозой.
После завтрака отправляемся на лавинный гребень,в дом охотника.Там даем Исиде понюхать сначала блокнот,а потом по очереди вещи Янни,Олли и Лу.Узнаем что блокнот принадлежит Лу.По возвращении в коридор мы получим пакет.Внутри – вырезка из газеты. Лу уже привлекли к раскопкам костей динозавров.
Проходим мимо стола с игрой и говорим с Лу. Да, его блокнот, он интересуется палеонтологией, но никакие взрывы не устраивают. Даёт нам ключ от шкафчика, где берём кость с обнажения.
Идем к дому на лавиноопасном гребне. Там вставьте кость из обнажения в костное удаление. Перед нами замок. Вставьте жетоны, как показано.
Теперь нижние жетоны вставьте в приемную слева.
Дверь откроется. Едем по рельсам. Справа откройте ящик и увидите схему лабиринта, такую же, как и в дневнике. Пока этого достаточно.
Вернитесь в дом охотника. Проводим здесь.
Утром приезжаем в отель и готовим завтрак. Но для Лу нет приказа. Странно… Берем мешок для белья и идем снимать номера. Лу Убери комнату, открой ключ от шкафа – все кости исчезли!
В комнате Камиллы открылся шкаф, а в нем грубая куртка Нэнси с надписью: Убирайся! Этого было недостаточно!
В комнате Джанни нажмите на глаз чучелу лося, и в стене откроется тайник.Возьмите горящего лосося оттуда. Там радиоприемник, включая его, что-то непонятное…
Спуститесь и спросите Джанни. Сам случайно обнаружил тайник, с помощью передатчика общается с тренером.
Олли отстраняет нас от готовки (Ура!) и сообщает, что Лу Талбот ушел. Также просит аккуратно убрать номера.
Чтобы найти следующий жетон, загляните в дневник. Нарисован енот и ожерелье из экспозиции. 6 цветных колец и 6 цифр.На двери каждой комнаты есть защелка с меняющимся цветом. Выставляю так:
Комната “Рысь” – синяя (на колье изображена синяя, а на двери только синяя).
номер “Бобур” – красный.
Номер лосося белый.
Комната “Виноград” – зеленая.
Цифра “Птичка” – синяя.
Номер “Сова” – красный.
Смотрим на картину енота в коридоре. У него горят глаза. Нажмите на нос и получите жетон корня.
Остался последний жетон. Идём в дом охотника, там под матрасом счётчик Гейгера.Идем к шахте. А вот и Исида! Командир ей: Вперед, вправо, влево, вправо, прыжок, вперед. И сами поднимаются по лестнице.
Поверните направо. Исида уже ждет нас там. Веревка свисает с потолка. Торгам за это. Исида тянет за собой. И идем по коридору прямо к двери, ведущей в Комнату с Обелиском. Одна тарелка с енотом уже открыта. Есть 3 ключа.
Быстро возвращайтесь в отель. На втором этаже, где аварийный выход, нажмите на голову кабана и получите жетон со свиньей.Применив счетчик Гейгера, идем в подвал, к выходу на улицу. Откройте одну из ступенек, это тайник, а в нем жетон с волком.
Теперь подойдите к Биллу и, пожалуйста, поиграйте с ним в Гаса и Фокса. Только вместо ткани с лисой положить жетон с кабаном. Смысл всего: это бить Билла, гонять фишку с кабаном по поворотам с енотом, лососем и свиньей. Таким образом, мы откроем еще три ответвления тоннеля.
В доме охотника идём к шахте, смотрим карту: остальные тоннели открыты.Отдаем приказы Iside:
1. В свинарнике. Вперед, вперед, вперед, прыжок, лапу.
2. В туннеле потерь. Вперед, влево, влево, лапу.
3. В енотовидном туннеле. Вперед, вправо, вперед, прыжок, влево, лапу.
Теперь идем к закрытой двери, вставляем 4 жетона, толкаем дверь. Мы внутри обелиска. Сразу же мы видим черный костюм с оторванным клапаном. Мы должны осмотреться. Мы видим сумку Лу. Он полон взрывчатки.
А потом появится преступник, который сначала попытается обнять, что только что проезжал мимо, потом попытается взорвать Нэнси и все улики, а потом скроется на снегоходе.
Здесь главное не сломаться, управлять левой кнопкой мыши. И преступника задержат, и Нэнси присвоят другое звание.
Танцуй как играть на гитаре с гвоздями. Песня со словами зачем ты моя химия. A4Tech x7 g800mu инструкция. Acer Erecovery Management Windows 7 32 Bit скачать. Сюитёр для акустической гитары Музорг. Nero Time Theater и Seneki читать онлайн. Украинская песня скачать. Автовокзал Ижевск как проехать. 2 кг сколько грамм. Новогодняя детская песенка без слов.Айфон не открывает приложение. Изменения лейкоцитов при мышечной работе. Буйнов Петр MP3. Как принимать витамин Е беременным.
1 Скачать полную версию бесплатно. Cyclo 3 Forte купить в Минске. Валдайский суд Новгородской области. Перевод LIL JON BEND OVA. Матрена Тимофеевна Корчагина Народные элементы. Умер от рака Андрей Круз. Google Chrome не установлен. Купить попсоб для телефона Алиэкспресс. Слушая живого человека, он рассеялся. Учебник по литературе 8 класс 2 часть каупер читал. Креч концерт СПб.Частный детский сад Краснодарского края. 6 класс Мерзляк Полонский Якир. Микроэлементы их биологическая роль. В лесу родилась елочка по-английски. Погрузитесь однажды в сказку. тенге на белорусском языке. В каких продуктах есть витамин С
Тверь Ул Склизкова 48. Карлсон снова приехал послушать. Фотография погибшей семьи в Кемерово. Звук тишины Слушай. Профессиональный словарь врачей. Плюсы и минусы количественных и качественных методов. Все о мужчинах-скорпионах.Чемпионат мира по художественной гимнастике. Удалите драйверы принтера Windows 10. Италия сочинение 4 класс. Развивающие игры до года по месяцам. Психология конфликта Гришин. Из носа текут сопли что делать. Перевод Breakfast Table с английского на русский язык. Деньги обои на рабочий стол 5000. Я слышал твой перевод. Каток в парке горького видео. Скачайте Corel Draw X6 бесплатно и без регистрации.
Песня “Сонные глаза” скачать. О победе отца. Скачать симулятор русского поезда на ПК.Проведение опроса с подробными ответами. Машина для обработки силикона. 3 класс Технология шитья. Песня Мы будем верить и ждать. Платежный терминал Народного банка. Купить рамки для ульев из липы. Применяется полевой метод исследования. Тоталитаризм и его особенности в СССР. Правовые режимы пребывания иностранных граждан в России. Во сне я была русалкой. Расписание поездов в Тулу Царицыно из Украины. Карта Финляндии офлайн для iPhone. Багаж вход в личный кабинет. Степень Пи.Источники формирования оборотных средств организации.
Сериал мейджор часы 4 сезон. Вам еще предстоит работать с этими людьми. Обработка рока минус одна загрузка. Митохондрии способны размножаться. Что можно подарить парню на день всех влюбленных. Скачать Я не сплю заживо. Почему цвета разные. Домашние маски для быстрого роста волос с маслом. Военная база в Сирии. Отследить зверя смотреть. Скачать самый крутой русский рэп. Ты скажи мне текст. Послание Президента Российской Федерации Федеральному Собранию ОГП.Информация об уроке Картина мира. Имбирь и лимон с водой. Как обустроить квартиру только для себя. Тур выходного дня Ижевск-Казань. Dilbar Dilbar mp3 скачать бесплатно.
Прицеп Гринч Коза. Свеча согнута в церкви. 6 Крестовый поход. Доверенность в ГИБДД. Голосовой поиск ОК Google. Кейсы БМ видео. Песня Boots скачать бесплатно и без регистрации. Норма сахара в крови при беременности из вен. Токовые крючки для чего. Саратов Гау Расписание. Как вылечить насморк в домашних условиях без лекарств.Праздник в городе Картин. Проволока для бисера купить оптом. с. Ивановка Кировоград. Кармен Сьют 2 скачать. Сегодня была видна полная луна. Смотрите ТВ3 онлайн. Устранение банок в микроволновке.
Танцы в моей постели пародийный чойд мальчики скачать. Adobe Flash Player 8 скачать бесплатно на русском языке. Force Maja Дата выхода Сериал 8 сезон. Работа для малолетних в Ноябрьске. Фильмы онлайн 2019 игра престолов 7 сезон. Стоматология кедровая Саратов Отзывы. Изготовление экстрактивной машины своими руками.Чувствуется загрузка до звонка. Ветряная мельница, как она проявляется. Презентация Прошедшее совершенное длительное время. Дрон из фильма Обливион. Букеты на новый год из фруктов. Оптимальная влажность в доме. Скачать книгу-оберег из серии. Макарский и Морозова фото. Мир Мир 4 класс Самоучитель 2 часть Плешаков Новицкая Скачать. Актриса Джин Грей. Комиссия по переводу с 2019 года.
Если вы никогда не играли в игры про Нэнси Дрю, то вам будет полезно ознакомиться с книгой “Что должен знать настоящий детектив.Эта книга лежит на столе слева и чтобы ее прочитать, нужно просто нажать на книгу. Когда станет понятно как играть в эту игру, нажмите на Стол. Выберите уровень сложности и отправляйтесь в новое приключение вместе с Нэнси Дрю.Игра проходит практически в реальном времени, хотя и ускорена в несколько раз.Поэтому будьте внимательны и почаще смотрите на циферблат, расположенный в правом верхнем углу экрана, ведь обед и уборка помещения должны проходить в определенное время К тому же сильный мороз и Нэнси долго в такую стужу не выдержит, ее обязательно нужно будет периодически прогревать в теплом месте.В левом верхнем углу будут значки одежды, в которую Нэнси будет одета в тот или иной момент игры. Если Нэнси находится на улице, то также появится индикатор тепла. Внимательно следуйте за ним. Вместе с Нэнси можно либо в помещении, либо применив термобэкет (на него нужно будет нажать в инвентаре. Все движения персонажа будут обозначаться с точки зрения человека, сидящего у экрана монитора, если он не указан. Прохождение игра разделена на дни условно и проходить ее можно в своем темпе и в любом порядке.Если вы заинтересованы в получении пасхальных яиц, то при каждой возможности отправляйте Нэнси в туалетную комнату на втором этаже. Будет описано в прохождении (на прохождение не влияет).
Игра проходила на уровне “Младший детектив”.
Saves (сохранение) для Windows XP. находятся в папке Мои документы \\ Ледяное ущелье Белого Волка
Предупреждение: загрузка сейвов, помните, что ваше прохождение может отличаться от предложенной автором последовательности действий.При этом ваши личные достижения будут утеряны и у вас останется авторская версия игры.
После входных видеороликов смотрим собственную комнату. Подойдите к тумбочке и возьмите ключ . Он лежит на меморандуме в котором указаны номера и распределение гостей. Рассматриваем другие инструкции: инструкция горничной , уход за катком, инструкция для персонала по лавинам, правонарушениям и сауне, график приготовления пищи.
Я помню время, проведенное на кухне. Выходим из комнаты, поворачиваем налево и спускаемся по лестнице. С лестницы поворачиваем налево и идем дальше администратора. Откройте дверцу шкафа и заберите оттуда мешок для стирки . В этот мешок мы добавим грязное белье гостей. Здесь же в шкафу находим и читаем три любовные записки , адресованные Эльзе, бывшей горничной этого отеля. Смотрим на стол слева. На телефон наклеена записка со всеми необходимыми номерами телефонов.Нажмите на экран монитора и прочитайте всю информацию, которую мы можем там найти. Все инструкции для персонала мы уже читали ранее. Смотрим в компьютерную базу, просматриваем список гостей прошлого года. Загляните под стол и найдите там заявление Эльзы Сиблиход об увольнении.
Возвращаемся в коридор на второй этаж. Идем в туалет и выходим в коридор. Подходим к номеру, на котором есть рисунок бобра. Здесь живет Лу Талбот. На ручке двери висит табличка, значит этот номер нужно убрать.Достаньте отмычку из инвентаря, который был у нас на столе, и отвинтите дверь. Смотрим на тапочки возле кровати. Их расположение говорит о том, что Лу сегодня встал с правой ноги. Осматриваем содержимое кейса в котором вы найдете кисти художника. На столе слева смотрим книгу Джека Лондона . Нажмите на кровать, чтобы исправить это. Идем к входной двери и снимаем полотенец .
Выходим из комнаты и идем к номеру напротив. На двери комнаты видим рисунок птицы Калакала.Янни Валькстая живет в этой комнате. Обратите внимание, что, судя по кроссовкам у кровати, он тоже вставал с правой ноги. Заправляем кровать и разворачиваемся к входной двери. На столе, под головой лося, листовой спортивный журнал. Слева от двери берем полотенца и выходим.
Идем в конец коридора и заходим в комнату с рисунком рыси. Билл Кесслер живет в этой комнате. Обратите внимание, Билл сегодня тоже встал с правой ноги. Давайте заполним его кровать. Смотрим на стол две книги “Основы геологии” и “Проектирование зданий”.На стуле справа рассмотрим книгу по технике по безопасности . Шкаф тоже заперт, поэтому берем грязные полотенца и выходим из комнаты. Заходим в номер напротив. На дверях этой комнаты рисунок с ягодами Аллахи. Камилла Гуадалупе живет в этой комнате. Если судить по тапочкам, то Камилла сегодня встала с левой ноги. Перетаскиваем кровать, просматриваем журнал На столе новостей биатлона. Обратите внимание, что на прикроватной тумбочке Камиллы нет привычного будильника.
Выходим из комнаты и идем к лестнице. Слева от туалетной комнаты находится люк в который нужно сбросить мешок с собранным грязным бельем. Откройте крышку люка, возьмите из инвентаря мешок с бельем и бросьте его вниз. Сегодня мы уже выполнили обязанности горничной. Если вы уже успели пообедать, то самое время идти на кухню.
Спускаемся по лестнице и поворачиваем направо. Проходим мимо маляра в правом проходе и разворачиваемся вправо.Заходим в кухонные двери с двойной кроватью и приступаем к приготовлению обеда.
Читать обеденное меню А мы присматриваем за заказами гостей. Для этого нажмите на блюдо, которое стоит на стойке. Чтобы пожарить чесадилью, возьмите полуфабрикат слева и положите на сковороду. Как только Чесадилья поджарится до золотистого цвета, снимите ее со сковороды и положите в посуду того гостя, который ее заказал. Чтобы приготовить гамбургер, сначала нужно наоборот обжарить мясной котлет.Котлеты находятся в левой верхней ячейке с ингредиентами. Котлета должна стать коричневой. Жареную котлету кладем на булочку, затем повторяем заказанные добавки. Берем верхнюю часть булочки, накрываем ею готовый гамбургер и кладем в посуду гостя. Как только заказ выполнен, ставим “галочку” внизу карточки возле надписи “Заказ готов”. Если мы ошибочно ошиблись в заказе, то этот неправильный заказ можно отправить в корзину, которая находится прямо над жаркой в правом верхнем углу.После того, как все заказы выполнены, автоматически оказываемся в холле.
Смотрим направо и осматриваем все вещи на витрине Мини музей. Обратите внимание, что снегоступы Dan Hunter почему-то заперты на кодовый замок. Также мы внимательно рассматриваем все фотографии на стене, посвященные основателю отеля – Хантеру Дэну. Читаем подписи возле фотографий. Щелкаю по пустым рамкам, из которых кто-то вытащил фотографии, читаю надписи возле исчезнувших картинок.Разворачиваемся и от дверей кухни идем налево. У камина берем газету со стола и читаем в ней статью об отравлении в отеле четырех постояльцев. Идем к лестнице и видим от нее дверь в подвал. Спустимся в подвал и поговорим с Олли и с Джанни Волкстая.
Выходим из подвала и направляемся к стойке регистрации. Возле окна стоит женщина и смотрит в окно в бинокль.Познакомьтесь с Камилой Гваделупе. Идем к выходу из отеля. Выход напротив стойки регистрации. Перед уходом обязательно смотрим на барометр справа от двери.
Выходим из гостиницы, поворачиваем направо, доходим до угла и снова идем направо и идем. Поворачиваем в сторону ледяного озера. Но прежде чем пройти туда, нам нужно сразиться в снежках с ледяной принцессой Фредди. Задача проста, а после победы двигаться дальше. Доходим до рыбацкого домика и идем к нему погреться.Осматриваем место угощенной рыбалки и возвращаемся в гостиницу.
Идем к стойке регистрации и звоним Шанталь Моник и Тино Бальдуччи. Идем выполнять просьбу хозяйки. Спускаемся в подвал и говорим с биатлонистом, а потом говорим с Олли Рэнделом.
Давайте выйдем из подвала и поднимемся наверх. Идем в зал и знакомимся с Лу Талботом и Биллом Кесслером, которые сидят за игровым столом. Вместе их можно встретить за столом после завтрака с девяти до одиннадцати, а после ужина с семи до девяти вечера.Билл просит почистить каток, чтобы он мог посоревноваться со своим юным другом. Если на улице очень холодно, Нэнси откажется выходить на улицу.
Но сегодня относительно тепло, и мы выходим на улицу делать полянку. На улице обходим дом слева и ищем указатель с надписью «Каток». Берем лопату и приступаем к расчистке катка. Эта мини-игра напоминает всем известную игру Spern. Наша задача: расставить девять конусов на особо опасных участках с трещинами и тонким льдом.Если вы запутались в цветовой гамме льда, вы всегда можете посмотреть инструкцию «Уход за катком». Чем темнее цвет льда, тем он тоньше. Запомните главное правило: не сбрасывайте лед, на котором расположена трещина, лучше положите на это место конус.
Очистка с нижнего ряда, затем начните зачистку второго ряда, внимательно вглядываясь в цвет соседних льдин. Опасные зоны генерируются случайным образом. Чтобы облегчить себе задачу, почаще сохраняйтесь после расчистки особо опасных участков ото льда, чтобы не начинать все сначала.Скриншот приведен в качестве примера одного из вариантов расчистки катка. Предлагается сохранение “Каток расчищен”. После загрузки этого сохранения вам нужно будет поставить последнюю шишку на трещину.
Когда каток будет очищен, Нэнси автоматически направится по волчьим следам, которые приведут к обелиску охотника Дэна.
Смотрим на клочья черной ткани, зажатые, видимо, какой-то дверью. Поверните налево, а затем идите направо по волчьим следам.Подходим к указателю «Птичий перевал». Делаем шаг вперед и слышим взрыв. Лавина снега накрывается, но кто-то нас обнаружил и начинает отказывать. Но кто это? Выбираемся и идем вперед по волчьим следам. Вернитесь к воронке, образованной взрывом. Но вот солнце склоняется к закату, становится темно и Нэнси автоматически возвращается в отель.
Снова читаем инструкцию повара по приготовлению повара. Сёмгу нужно было наоборот обжарить до золотистого цвета.Перед приготовлением салата в каждую тарелку кладем салатный лист (не путать со шпинатом), а потом уже выкладываем необходимые ингредиенты. Каждый салат заправляем перцем из бутылочки с надписью «Паприка» (молотый перец). В конце Ужина Олли попросит Нэнси не класть паприку в салат Лу Талбота, потому что он ее терпеть не может. После ужина забираемся наверх, переводим будильник на семь часов и нажимаем кнопку сверху.
Если у вас возникли проблемы с прохождением игры Нэнси Дрю белый волк ледяное ущелье Вы всегда можете воспользоваться нашими советами и информацией к действию.Подробно описываем шаги, которые нужно сделать, чтобы полностью пройти игру. Нэнси Дрю Ледяное ущелье Белого Волка . В самых сложных местах мы добавляем картинки, которые могут вам помочь. Прохождение Нэнси Дрю Белого Волка Ледяное ущелье Читайте на нашем сайте.
Начало прохождения игры Нэнси Дрю Белая Волчица Ледяное Ущелье . Вы окажетесь в комнате, возьмите список гостей и ключ, который оставил Олли. Ознакомьтесь с инструкциями по персоналу и обязанностями служащих.Далее приступайте к ним. Спуститесь на 1-й этаж за мешком с нечистым бельем, следуйте налево. Это место двери. В вашем компьютере вы можете узнать более подробные инструкции. Возьмите телефон со стола и позвоните Тино. Затем возьмите сумку в шкафу. В нем вы ищете 3 буквы для Эльзы. Говорят, что у нее случилась неудача в любви. Возле шкафа, под стойкой можно найти еще одно письмо, но в нем будет письмо об увольнении от Эльзы. На страницах нашего сайта.
Теперь нужно подобрать сумку и залезть наверх.По пути осмотрите все комнаты. Теперь вы живете в комнате Quulkwell. Напротив вас номер цепи, он сейчас свободен и закрыт. Далее, по номеру Калакала, там живет Янни Валькер. Грузите свою кровать и листайте журналы, из которых вы узнаете, что прохождение чемпионата секретное, но пройти его можно и недалеко от ледяного ущелья. Затем возьмите грязные полотенца и следуйте по номеру к Иине, она напротив. Также потрясите кровать и заберите все нечистое. Далее идите к следующему, в номер пишите-пишите, Полите книги, которые на столе.Все равно возьми сор из избы и застели постель.
Комната, напротив, в ней живет Аллахи, хозяйка Камиллы Гваделупы. Возьмите журнал «Новости биатлона» и прочитайте в нем статью. Вы узнаете об отзывах других спортсменов о Янни Вальки. Выполняйте свою обычную работу. В конце коридора вы увидите запасной выход и голову кабана. Затем возьмите сумку с любовником в шахте, она возле туалета. Вам также придется готовить. Это также входит в ваши обязанности, чтобы вы знали.В компьютере вы можете узнать об этом.
Завтрак включает в себя тосты и бекон, обжаренные на противне, а также омлет соответственно на сковороде. Блюда с заказами лежат на верхней полке. Выливаем блинную смесь из упаковки, а затем выкладываем ингредиенты соответственно вашему заказу. Не стоит добавлять паприку для маленького Фредди.
На ужин нежирный бекон наоборот приготовишь гамбургер, а цесадиль на сковороде. Выложите готовый бекон на форменные колокольчики и поверх всех остальных ингредиентов.
На ужин нужно приготовить салат. Надавить на анти-ломтики лосося, затем выложить листья салата в тарелки, добавить ингредиенты по порядку.
Как убрать, спуститесь на первый этаж и осмотрите его. Пройдите дальше и увидите напротив стол с настольной игрой и двумя игроками. Познакомьтесь с ними и поговорите. Один из них — Билл Кесслер, он попросит вас почистить каток. Ролик для чистки, это как принцип игры в снайперку, если выбрать уровень сложности младшего сыщика, то каток будет содержать 9 трещин, по количеству фишек, которые вы поставите на опасные места, а если для старшего, то 28.Решите головоломку в соответствии с инструкциями. Как почистить каток, пройтись по следам, как добраться до птичьего перевала, услышать сильный взрыв, вой. Лавина будет перемешана. Волк спасет тебя.
Затем возвращайтесь в отель. Идите к Олли и отдайте сообщение, возьмите ключ от снегохода и задание. Подходит от Джанни и он расскажет о взрыве, также отказывается размещать свое фото на сайте отеля. По телефону сообщите Шанталь об отказе. Поговорите с Кесслером за столом.Примите его благодарность за чистку катка, а также он пригласит вас на соревнования с ним по зимней рыбалке. Ваша задача поймать щуку длиной 2 метра. Езжайте на снегоходе проверить бис гребень, лавины там не оказалось, возвращайтесь назад и отдайте гаечный ключ Олли. Выиграйте Маленького Фредди в снежках, чтобы попасть в рыбацкий домик. В нем все снасти уничтожены, около колодца будет лежать листовка с номером телефона.
Вернитесь в отель, на входе лежит записка от маленькой девочки по имени Фредди, она откроет вам ваш секрет в случаях, когда вы будете играть с ней в снежки.Идите в подвал и поговорите с Джанни.
Тогда вам нужно рассказать Олли об испорченном снаряжении, он отдаст вам свое. Наберите номер, который я нашел на листочках и узнайте, что в это время в ледяном ущелье никого быть не могло. По пути к дому сразитесь с девушкой и получите термопару. Тогда отправляйтесь на рыбалку и назовите щуку длиной 2 фута. Если леска оборвется, лишний раз забросить удочку не составит для вас труда. Как выйдешь из дома, приедешь в снежок. А вот, красотки! Будет взрыв.Белый волк вас спасет, он покажет где шуба, вы к нему попадете, иначе замерзнете. В кармане вы найдете записку с непонятными символами.
Продолжить прохождение игры Нэнси Дрю Белая Волчица Ледяное Ущелье . Начните день с наведения порядка в номере и приготовления пищи. Зайдите за мешок для стирки и обойдите комнату, проверьте кровать и возьмите нижнее белье. В комнате Иины в чемодане не будет некоторых вещей. Затем вы найдете записку о Тумбе. Идите налево от прохода к озеру, и вы найдете расплавленный механизм от часов.Просмотрите список гостей в компьютере, увидите телефоны, позвоните всем. Позвони Шанталь, что бы узнать код замка от снегоступов. Ее вам дадут в случае обмена по заполненной анкете. Поговорите с Камиллой Гваделупой и узнайте планету. Когда разговор прекратится, Нэнси увидит пулю на полу. Камилла будет отрицать, что это ее пуля. Спуститесь в подвал и поговорите с Олли. На ужин добавляйте свою паприку во все заказы, ну естественно, кроме маленькой девочки, ей это не нужно.Заберитесь в комнату, и вы услышите, как Олли ссорится с Камиллой. Как закончится обед, Олли сообщит, что Лу Талботу не понравилась паприка. Вам пришел код – 7669. Покажите птичий пропуск и наденьте снегоход. Кратер возьмите дневник и следуйте ниже. Вы окажетесь возле домика, откройте его с помощью кода, это записка из кармана пальто, показал вам волк.
Введите код – 6512 и войдите внутрь, затем найдите дневник, кратер тоже найдете.Далее вы услышите Рёв за спиной, это белая волчица, как себя вести вы знаете, также вы знаете ее имя. Зовите его по имени и добавляйте команды, он будет счастлив от радости. В доме можно найти термопару, а также устройство с телефоном. На стене вы увидите отпечаток кости, такой же отпечаток в вашем отеле. Ваша задача выяснить, чей дневник вы нашли в кратере. Для этого возьмите любые вещи у жильцов отеля и принесите Изиде, она уже определится. Как вернуться в гостиницу, в коридоре найти приглашение в баню.Идите туда, вы найдете детские фотографии Билла. Так вы окажетесь в ловушке. По времени нужно собрать систему охлаждения, чтобы можно было дождаться морды. Делать это надо на скорость, собирать как можно быстрее. Вас спасет Кесслер, он откроет вам тайну пирамиды. Подойдите к нему и поверните вверх, внизу вы увидите панель с изображениями животных. Нажмите на центр пирамиды, затем поочерёдно начните расставлять животных, они загорятся в панели на зелёный контур.
Только на страницах нашего сайта! Пронумеруйте в уме клетки в виде шахматной доски, по горизонтали А, В, С, D; И вертикальные 1, 2, 3, 4, тогда схема вращения будет такая: енот, d2, а2, а1, остальные одинарные, нужно повернуть каждый к еноту; Волк, А1, А2, А3, А4, Д1, Д2, Д3, Д4, остальные в центре одиночные, нужно повернуться к волку; Свинья, A1, A2, A3, A4, D1, D2, D3, D4, нужно превратиться в свинью; Элок, А1, А4, С2, С3, Д2, Д3, нужно повернуться к лосю.
Внутри пирамиды откроется тайник, там можно найти дневник Дэна Охотника, в нем зашифрованные сообщения.
Если вы ищете секретное место, то возьмите оттуда кость динозавра, а затем разместите пол на открытом воздухе. Решите головоломку. Первое животное всегда будет первым. Ваша задача найти мои пещеры и открыть Верьте в Обелиск. А еще, зашифрованное сообщение в конце дневника: в моем доме впрягаются три ключа: это лосиный, волчий и енотовый.Мне не сложно найти ключ лося, делаем лосиному глазу и получаем приз. Огненное ожерелье подскажет, где прячется енот. Не думайте будить жильцов. Самый сильный волк будет искать волка, только Мария Кюри и Хейгер смогут услышать его голос.
Остальное можно найти в комнате Калакал. Кэш открывается при нажатии на глаза. Получите токен. Будет следующая подсказка. Теперь двигайтесь вниз и исследуйте огненный амулет, висящий на стене. Необходимо запомнить расположение разноцветных кругов, у среднего огня.Поднимитесь на 2 этаж и осмотрите картину с енотом, она весит между комнатами Чинука и Иины. Посередине очага – по краям с обеих сторон по 3 комнаты. На дверных ручках есть механизм с выключателем, при повороте цветов. Возьмите ожерелье в коридоре и крутите механизмы, вставляя цвета, как на ожерелье. Потом осматриваем картинку енота, на ней находят и получают еще 1 жетон с его изображением. Идите в охотничий домик и отдайте нюхательный дневник, по которому узнаете кратер, а также полотенца жильцам.Исида установит, что владелец дневника Лу Талбот. Вернитесь в отель обратно, в коридоре, это от Тино. Вынужден Лу Талбот дать вам ключ от шкафчика, взять кость и вернуться в охотничий домик.
На следующий день, когда будете производить уборку в комнатах, в чулане у начальника вы найдете пальто с прикрепленной запиской “Чисто!”. Идите в охотничий домик, на полу можно найти счетчик геймера, вставьте кость в отпечаток, вам нужно будет вставить все собранное в панель.В дополнительную тонну изображения утки нужно вставить оставшиеся жетоны так. Верните на место жетоны с уткой, и дверь откроется. Вы окажетесь в пещере, пройдите до конца, посмотрите схему справа, она нарисована в дневнике Дэна. Жди к тебе придет Исида. Слева будет лестница, также пройдите в пещеру уровнем выше. Поднимитесь наверх и исследуйте оба верхних прохода, в одном в конце висит веревка. Именно о ней написал Дэн в дневнике. Ваша задача найти человека, который будет держать веревку в тот момент, когда вы вернетесь в отель.Исида поможет вам, спуститесь и посмотрите на схему. Исиде предстоит пройти лабиринты и добраться до веревки. Скажите ей, что делать: вперед, вправо, влево, вправо, прыгать и вперед.
Вам нужно подняться наверх и добраться до веревки. Исида ждет вас уже возле него, натяните веревку и нажмите на блок. Вернитесь в гостиницу, пока Исида держит ее, и на втором этаже в самом конце коридора, где находится фокус, возьмите гантон изо рта свиньи. Вам нужно активировать устройство Хейгера и пройти через отель.Поднимите доску на ступеньку и возьмите ткань с волком. Прохождение игры Nancy Drew White Wolf Ice Gorge продолжается.
Звонок на номер который написан на аппарате из охотничьего домика. Теперь поиграйте с Биллом в игру «Лиза Гуси», в диалоге выберите ответ Нэнси с желанием заменить лису на свинью. Проведите 4 игры и загоните поросенка по очереди в каждом купе. Как ставить свою фишку, бить и удерживать ее между фишками. Все животные должны бросать вызов своим глазам. Можно сделать дополнительный бонус, нужно отвести Нэнси в туалет и она назовет вам некий мистический номер (1-555-697-84-26).Нужно, чтобы вы позвонили и выбрали ответ «узнайте тайну за семью печатями». Мистик расскажет вам о синей глубине, вам нужно следовать за ледяным озером и добыть яичко. Затем вернитесь в гостиницу и осмотрите номер чинука.
Идите в охотничий домик и проверьте схему, пусть дело доходит до рычагов. Необходимо изучить схему и дать задание в МКИД. Она должна повернуть рычаги, чтобы открыть остальные двери. Правильность выполненных действий проверяйте по засветке молнии на схеме, если что-то пойдет не по плану, Исида сломается и вернет обратно.Скажите, что выдает команда: Лось: вперед-левая лапа, свинья: вперед-вперед и вперед надеющаяся лапа, енот: назад-вправо-вперед прыгает левая лапа. Затем идите наверх в левый коридор. Вставьте все жетоны в отверстия, дверь откроется, затем просмотрите видео. Вам нужно будет догнать склон на снегоходе.
В последнее время квест находится не в лучшем положении, так как качественные игры в этом жанре выходят максимум раз в год, а шутеры и ролевые игрушки появляются по нескольку штук в месяц.Однако это не значит, что среди всех проектов нельзя найти ничего хорошего.
Например, есть один очень интересный проект 2013 года, который называется The Room Two. Прохождение этой игры крайне необычное, ведь действовать вам придется в условиях одной единственной локации. Вам интересна такая игра? Тогда прочитайте следующую статью о The Room Two. Прохождение и особенности этой игры будут рассмотрены ниже.
The Room Two — игра, которая отличается от большинства квестов тем, что вам предстоит действовать в одном и том же месте в течение очень длительного периода времени.Итак, ваш герой попадает в таинственное измерение, где ему угрожает смертельная опасность. Его цель – выбраться из этого измерения, пока он не погиб от рук Тьмы.
В отличии от большинства квестов, вам предстоит играть от первого лица, то есть вы будете видеть окружающий мир вокруг вашего персонажа. Если вы не знаете английского языка, то вам стоит скачать The Room Two на русском языке, так как весь интерес игрового процесса заключается в заметках, которые вы будете постоянно находить в комнатах.Собственно, пора рассказать о том, как проходит непосредственно само прохождение.
Если говорить в общем, то в игре The Room Two прохождение разделено на шесть этапов, каждый из которых представляет собой закрытую комнату. Вы начинаете в первой комнате и должны решить все головоломки, которые вы там найдете, чтобы найти выход. В итоге вы окажетесь во второй комнате и будете повторять подобные переходы, пока не закончите решение головоломок в шестой комнате.Только тогда игра будет завершена. Нельзя сказать, что в The Room Two прохождение занимает много времени. Большинство геймеров стэкятся за 4-5 часов.
Если говорить о каждой отдельной комнате, то все они содержат десятки разнообразных головоломок, которые вам необходимо решить. По сути, прохождение разделено на три взаимосвязанные части: поиск предметов, решение головоломок и чтение заметок. Сначала вам нужно будет изучить комнату и отыскать различные предметы, которые помогут вам в дальнейшем.Во-вторых, вам нужно будет решать головоломки, используя предметы, которые вы нашли, чтобы открывать новые головоломки, а в конце и выйти из комнаты. В-третьих, вам нужно будет читать записки от неизвестного, которые вы найдете в каждой комнате. Эти заметки содержат как подсказки по прохождению, так и раскрытие сюжета игры. Из них вы узнаете, что находитесь в другом измерении, а также поймете, что с вами происходит. Вам нужно будет идти по стопам этого неизвестного и надеяться, что вам повезет больше, и вы сможете выбраться из этого измерения живым.
Если вас заинтересовала эта игра и вы хотите попробовать пройти ее со всей информацией, полученной из этой статьи, вы можете обновиться, так как она доступна сразу на нескольких платформах. Во-первых, вы можете установить его на свой персональный компьютер. А во-вторых, он доступен и на мобильной платформе.
Но для начала закончим с номером один. Поместите последнюю пирамиду на стол и возьмите ключ ремесленника. Пройдите в появившуюся дверь. Поместите ручку ремесленника на вершину этой странной палатки, чтобы взломать ее.Возьми это металлическое кольцо. Поместите металлическое кольцо на переднюю панель. Вращайте его, пока отверстие не откроется. Войдите внутрь с окуляром. Здесь нужно сделать так, чтобы под тремя поршнями появились отверстия. Для этого не крутите золотой диск, пока отверстие на заднем набираете линию с поршнем. Используйте медную ручку, чтобы переместить винт. Повторяйте это, пока все три отверстия не будут выровнены, как указано выше. Нажмите кнопку перемещения этого зеркала, чтобы прыгать вокруг света. Возьмите это зеркало из отсека на столе. Поместите это здесь.Затем перемещение первого зеркала возвращается в исходное положение. Вы упадете в яму — войдите внутрь с помощью окуляра. Теперь вам нужно вернуть все лучи света, указывая на красный кристалл, как указано выше. С помощью одной кнопки зафиксируйте два луча на месте, а другой вращайте их без непрерывной работы. Это все о том, чтобы синхронизировать их. Есть три получить. Это руководство охватывает выходной конец. Читайте дальше, чтобы разблокировать этот особый финал. Поместите последнюю пирамиду на стол и возьмите ключ ремесленника.Не проходите через появившуюся дверь. Вместо… Сходите в библиотеку. Потяните за «Поместите маркер здесь» пластину автомобиля Mistic Maggie. Внутри небольшой механизм. Исследуйте колесо. Вращайте его, чтобы превратить в ключ. Идите в офис и используйте ключ на верхнем правом ящике стола. Откройте коробку. Ничего внутри! Ой, подождите, там защелка с левой стороны. Потяните его назад, чтобы показать тайник с ручкой. Удобно, что ручку можно использовать на Ящике слева от стола. Опять же, не так много внутри.Для небольшой защелки на внутренней части правой панели исключение. Щелкни его. Это позволит вам перемещать эти металлические диски в середине стола. Спин — самый левый, чтобы открыть скрытую защелку. Нажмите, чтобы открыть дверь справа. Внутри металлическая пластина. Ползун правый, и двигаем левую защелку. Сдвиньте пластину влево и опустите правую защелку. Сдвиньте тарелку снова вправо и залейте небольшой замок. Вернитесь к этим металлическим дискам. Поверните влево и поправьте так, чтобы отверстия в диске смотрели наружу.Коробка с маркером будет скользить. Возьми это. Поместите жетоны в машину Миссик Мэгги в библиотеке. После короткой сценки вам покажут в заключении карту и дадут коленчатый вал. Идите в эту комнату. Это самый первый выпуск в игре, где вы решили три головоломки на подиуме. На стене замка с тремя дырками. Используйте ручку колеса и поверните ее, чтобы открыть ворота. Войди в комнату. Здесь щелкнуть всеми тремя переключателями, чтобы появились три коробки. У каждого есть номер наверху, и куча двойных выборов.Ваша задача сделать так, чтобы числа складывались (или, в некоторых случаях, вычитались или умножались) — снизу вверх — составляли это число. Если вы не любите заниматься математикой, решения ниже. +08, +04, +05 = 17 +07, х04, +03 = 31 +08, х02, +07, +03, -05, +09 = 30 Когда все три сделали, вы перейдете к эта доска. Переместите три ползунка, чтобы удовлетворить трем рядам источников света, как показано выше. Там будет вывеска с надписью «Библиотека». Прислушайтесь к его совету и идите в библиотеку.Двигайте рукой, чтобы ответить на телефонный звонок. Возьмите крестообразный ключ, появляется. Вернитесь в комнату, в которой мы только что были. Поместите ручку в место над этими ящиками. Четыре символа будут отображаться на полях в быстрой последовательности. Полностью открывайте ящики в том порядке, в котором они вам были показаны, и в последнем поле будет стоять маркер. Если пропустили, поверните ключ еще раз. Последовательность случайна, поэтому мы не можем сказать вам, какие ящики открывать. Вернитесь в библиотеку и поставьте маркер на машину Мэгги. На этот раз вы получаете карту стрельбы и получаете дескриптор.Перед библиотекой идите на более высокий уровень и закройте книжный постер здесь. Возьмите металлический предмет (в настоящее время куб) с обратной стороны книги. Идите в оранжерею. Поместите куб на этот поднос. Вам может понадобиться питание для работы машины – если это так, следуйте инструкциям в нашей версии, заканчивая руководство, чтобы заставить его работать. Сделано что? Смотрите в окуляр и нажимайте правую кнопку, пока ваш куб не превратится в шар. Нажмите среднюю кнопку, чтобы вернуть металлический предмет — теперь это хороший круглый воздушный шар.Вернитесь в библиотеку и поместите сферу с другой стороны книжного плаката. Оттяните две страницы друг от друга, и появится отличный поп-ап театр. Используйте окуляр. Нажмите кнопку и возьмите пустой восковой цилиндр. Используйте пустой восковой цилиндр на каждый граммофон в библиотеке. Кроме того, обратите внимание на номер на трубке здесь: 1795 Идите в оранжерею. Используйте ручку, чтобы включить граммофон и начать играть музыку. Тогда позвоните по телефону «1795». Если вы никогда не пользовались поворотным телефоном – раз, Боже, я чувствую себя старым.Во-вторых, положите палец на цифру один и поверните его по часовой стрелке до упора, а затем отпустите. Повторите с 7, 9 и 5. Вернитесь в библиотеку и выберите рингтоны телефона. Возьмите появившийся цилиндр для травления воска. Используйте окуляр, чтобы вернуться во всплывающий театр. Ставим Цилиндр Патэфф и нажимаем кнопку. Возьмите маркер из коробки. Ты знаешь что делать. Поместите жетон в машину Мэгги, посмотрите карточку выпуска и возьмите металлическое устройство из коробки. Поднимитесь на лифте и используйте это металлическое устройство в щели на заборе, выходящей на качающуюся цепь.Посмотрите в окуляр. Не вращайте колесо, пока две верхние части ключа не сформируются, как указано выше. Затем переместите камеру, чтобы построить нижнюю и верхнюю части ключа. Возьмите появившийся ключ. Идите в оранжерею. Выбить эти расшатанные кирпичи, а потом посмотреть в дырку из окуляра. Вернулся из этого района. Идите в главную комнату с оранжереей и посмотрите с другой стороны на стену, которую вы только что… внутри. Появилась замочная скважина. Используйте ключ. Не включайте его, а снова идите к норе. Вы увидите ключ.Посмотрите в конце и поверните крохотную (на данный момент огромную!) защелку на ее боку. Это аннулирует одну часть замка. Вернитесь на другую сторону стены и поверните ключ на 180 градусов. Подойдите к стене и поверните защелку на другой части ключа. Вернитесь в эту область, и теперь коробка будет разблокирована. Откройте его и возьмите маркер. Мэгги. Подписать. Забыл карту. Загадочный артефакт. Возьми это. Теперь пришло время пройти через последнюю дверь. Сделайте глубокий вдох и шагните внутрь. Поместите ручку ремесленника на вершину этой странной палатки, чтобы взломать ее.Возьми это металлическое кольцо. Поместите металлическое кольцо на переднюю панель. Вращайте его, пока отверстие не откроется. Войдите внутрь с окуляром. Здесь нужно сделать так, чтобы под тремя поршнями появились отверстия. Для этого не крутите золотой диск, пока отверстие на заднем набираете линию с поршнем. Используйте медную ручку, чтобы переместить винт. Повторяйте это, пока все три отверстия не будут выровнены, как указано выше. Нажмите кнопку перемещения этого зеркала, чтобы прыгать вокруг света. Возьмите это зеркало из отсека на столе. Поместите это здесь.Затем перемещение первого зеркала возвращается в исходное положение. Вы упадете в яму — войдите внутрь с помощью окуляра. Теперь вам нужно вернуть все лучи света, указывая на красный кристалл, как указано выше. С помощью одной кнопки зафиксируйте два луча на месте, а другой вращайте их без непрерывной работы. Это все о том, чтобы синхронизировать их. Не проходите через дверь поезда! Вместо этого поместите сюда загадочный артефакт, вращайте металлический диск и смотрите в дырку из окуляра.Это легко. Вращайте камень, пока не увидите луч света, выходящий из отверстия на внутренней стороне циферблата. Затем держите вращающийся диск так, чтобы на нем легко блестела зеленая жемчужина. Когда все огни будут сбоку… Нажмите кнопку наверху, а затем идите в деревянную дверь, чтобы получить финальный побег.
Здравствуйте, дорогие читатели! В этом обзоре мы познакомимся с недавно вышедшей головоломкой The Room Two для Android смартфонов или планшетов, а также с ее минусами и плюсами.В игре нет затянутого сюжета со смыслом, но все же она точно затянет на пару десятков часов. Вы спросите, почему? Я объясню сейчас. Здесь нужно пробираться по загадочным комнатам с неприятными столами, где, в свою очередь, такие же непонятные сундуки, содержащие кучу загадок. И эти загадки в начале уровня могут показаться легкими и быстро решаемыми, но по мере продвижения по уровню эти загадки будут отнимать у вас уже не 5-10 минут времени, а 30-40 минут.Не бойтесь, что 30-40 минут на загадку это много, во время игры у вас будет определенный азарт, из-за которого все эти минуты пролетят быстро, а от игрового процесса вы будете получать только удовольствие. Каждый сундук по-своему индивидуален, каждый сундук имеет свой дизайн, свои замки, свои внутренности и потайные места. Как я говорил, в каждом сундуке много загадок. Иногда вокруг одного сундука может крутиться не один десяток занимательных головоломок, но к концу уровня этот сундук начинает надоедать своей однообразностью.В целом можно сделать вывод, что игра интересная и занимательная, и даже если вы не любитель головоломок, вам эта игра очень нравится. А теперь переходим к техническому показателю игры.
Разработчик этой игры FireProof также выпустил чат 2012 года “The Room”, но теперь он The Room Two 2013 года. . По многим характеристикам игра приятна глазу: графика, тени, освещение, все проработано до мелочей, графику можно спокойно сравнивать с консольной, она очень качественная.Все действия происходят в 3D мире, но и он не такой красочный, как может показаться на первый взгляд, все происходит в мрачном и не очень освещенном месте, весь свет фокусируется на столах и на второстепенных предметах с которыми вы будете нужно взаимодействовать, а все остальное скрыто под мраком. Помимо хорошей графики присутствует еще и музыкальное сопровождение из приятных мотивов, что только расслабляет во время игрового процесса, а если играть в наушниках, то и звук будет качественнее и объемнее, и играть будет интереснее.Многие могут подумать, что эта игра поддерживает только мощные планшеты и телефоны, а тут почти все планшеты и телефоны поддерживают эту игру, даже со слабыми видеочипами и процессорами, и китайские планшеты за 2000-3000 игра не поддерживает, а если у вас более-менее хороший планшет или смартфон, то спокойно качайте эту игру. Дальше цена. И эта цена 99 рублей за игру, я считаю, что это не очень большие деньги за игру, но это только мое мнение, кому-то эта цена покажется нормальной, как и мне, но для многих эта цена велика, и они можно скачать через интернет, но я против такого способа получения игры! Ну вот и подошёл к концу мой обзор, и наконец-то выведу все существенные плюсы и минусы.
Плюсы:
– отличная графика;
– занимательные ребусы;
– Классное музыкальное сопровождение;
– игра “на долго”;
Минусы:
– в основном хмурое освещение;
– Слишком сложные головоломки.
Стиральная машина Indesit WISL 83. ВАЗ 2109 Что лучше карбюратор или инжектор. Танец как играть на гитаре с гвоздями.Песня со словами зачем ты моя химия. A4Tech x7 G800MU инструкция. Acer Erecovery Management Windows 7 32-битная загрузка. Сюитёр для акустической гитары Музорг. Nero Time Theater и Seneki читать онлайн. Украинская песня скачать. Автовокзал Ижевск как проехать. 2 кг сколько грамм. Новогодняя детская песенка без слов. Айфон не открывает приложение. Изменения лейкоцитов при мышечной работе. Буйнов Петр MP3. Как принимать витамин Е беременным.
1 Скачать полную версию бесплатно.Cyclo 3 Forte купить в Минске. Валдайский суд Новгородской области. Перевод LIL JON BEND OVA. Матрена Тимофеевна Корчагина Народные элементы. Умер от рака Андрей Круз. Google Chrome не установлен. Купить попсоб для телефона Алиэкспресс. Слушая живого человека, он рассеялся. Учебник по литературе 8 класс 2 часть каупер читал. Креч концерт СПб. Частный детский сад Краснодарского края. 6 класс Мерзляк Полонский Якир. Микроэлементы их биологическая роль. В лесу родилась елочка по-английски.Погрузитесь однажды в сказку. тенге на белорусском языке. В каких продуктах есть витамин С
Тверь Ул Склизкова 48. Карлсон снова приехал послушать. Фотография погибшей семьи в Кемерово. Звук тишины Слушай. Профессиональный словарь врачей. Плюсы и минусы количественных и качественных методов. Все о мужчинах-скорпионах. Чемпионат мира по художественной гимнастике. Удалите драйверы принтера Windows 10. Италия сочинение 4 класс. Развивающие игры до года по месяцам. Психология конфликта Гришин.Из носа текут сопли что делать. Перевод Breakfast Table с английского на русский язык. Деньги обои на рабочий стол 5000. Я слышал твой перевод. Каток в парке горького видео. Скачайте Corel Draw X6 бесплатно и без регистрации.
Песня “Сонные глаза” скачать. О победе отца. Скачать симулятор русского поезда на ПК. Проведение опроса с подробными ответами. Машина для обработки силикона. 3 класс Технология шитья. Песня Мы будем верить и ждать.Платежный терминал Народного банка. Купить рамки для ульев из липы. Применяется полевой метод исследования. Тоталитаризм и его особенности в СССР. Правовые режимы пребывания иностранных граждан в России. Во сне я была русалкой. Расписание поездов в Тулу Царицыно из Украины. Карта Финляндии офлайн для iPhone. Багаж вход в личный кабинет. Степень Пи. Источники формирования оборотных средств организации.
Сериал мейджор часы 4 сезон. Вам еще предстоит работать с этими людьми.Обработка рока минус одна загрузка. Митохондрии способны размножаться. Что можно подарить парню на день всех влюбленных. Скачать Я не сплю заживо. Почему цвета разные. Домашние маски для быстрого роста волос с маслом. Военная база в Сирии. Отследить зверя смотреть. Скачать самый крутой русский рэп. Ты скажи мне текст. Послание Президента Российской Федерации Федеральному Собранию ОГП. Информация об уроке Картина мира. Имбирь и лимон с водой. Как обустроить квартиру только для себя.Тур выходного дня Ижевск-Казань. Dilbar Dilbar mp3 скачать бесплатно.
Прицеп Гринч Коза. Свеча согнута в церкви. 6 Крестовый поход. Доверенность в ГИБДД. Голосовой поиск ОК Google. Кейсы БМ видео. Песня Boots скачать бесплатно и без регистрации. Норма сахара в крови при беременности из вен. Токовые крючки для чего. Саратов Гау Расписание. Как вылечить насморк в домашних условиях без лекарств. Праздник в городе Картин. Проволока для бисера купить оптом. с. Ивановка Кировоград.Кармен Сьют 2 скачать. Сегодня была видна полная луна. Смотрите ТВ3 онлайн. Устранение банок в микроволновке.
Танцы в моей постели пародийный чойд мальчики скачать. Adobe Flash Player 8 скачать бесплатно на русском языке. Force Maja Дата выхода Сериал 8 сезон. Работа для малолетних в Ноябрьске. Фильмы онлайн 2019 игра престолов 7 сезон. Стоматология кедровая Саратов Отзывы. Изготовление экстрактивной машины своими руками. Чувствуется загрузка до звонка. Ветряная мельница, как она проявляется. Презентация Прошедшее совершенное длительное время.Дрон из фильма Обливион. Букеты на новый год из фруктов. Оптимальная влажность в доме. Скачать книгу-оберег из серии. Макарский и Морозова фото. Мир Мир 4 класс Самоучитель 2 часть Плешакова Новицкая скачать. Актриса Джин Грей. Комиссия по переводу с 2019 года.
Сначала вам нужно пройти уровень обучения. Вы научитесь управлять камерой в игре, взаимодействовать с предметами и перемещаться по комнате.
Когда вы все прочтете, вам нужно будет узнать секрет ларца.Поверните элемент в центре так, чтобы отдельные его части поднялись в нужные положения. Когда все сделано, коробку нужно открыть и взять в руки увеличительное стекло. Продолжайте действовать, фиксируя окуляр , возьмите маленький шестигранник .
Подвижная камера в ошейнике в виде окт. В этом столе находится тот самый ларец, который только что открылся. В углу вы должны найти небольшой шестиугольник из металла. Взяв его, отодвиньте квадратный стол, расположенный в комнате.
Оба шестигранника помещаются в отверстия этого стола, соответствующие их форме.Поверните два дисковых диска, чтобы между ними образовалась круглая форма. Interact Co. Сфера И возьмите ее.
Установите сферу в центр большого компаса, который находится в середине этого стола. Воспользуйтесь окуляром, который найдет секретное сообщение в записке. Вам будет надпись из красных букв SESWN.
Если вы не догадались, это координаты по компасу, направления света. Ю – Юг, В – Восток, З – Запад, С – Север.Так поверните стрелку на компасе. Под вашими глазами появятся те самые буквы.
Взяв медальон, нажмите на него, чтобы открыть. Он состоит из двух отдельных частей. Вращайте эти части с изображением стрелок в обратном направлении. Медальон должен стать квадратным.
Вернитесь к столу с восемью углами, положите медальон в центр коробки, чтобы он открылся. Вы увидите лампу.
Чтобы взять эту лампу , нажмите на нее и удерживайте.Можно сделать это придется дважды. Воспользуйтесь окуляром, чтобы видеть в темноте.
Математика 6 класс Мерзляк А.Г. Урок 105. Вычитание рациональных чисел
Рассмотрение основных понятий.
Решают задания на доске и в тетради
Освоение основных понятий.
Рефлексия учебной деятельности.
Цель этапа урока. Развивающие
задачи этапа.
В качестве
подсказки вам предлагается ребус.
Учитель
демонстрирует рисунок, на котором
представлена окружность, указан центр,
радиус, диаметр и дуга окружности.
С=π*d=2πr
Обсуждают и выполняют задание. Решение
задач группа оформляет на листочках,
решение руководитель группы сдает
учителю на проверку.
Дно
пластикового стаканчика